陈鑫鑫
- 作品数:33 被引量:30H指数:4
- 供职机构:河南省农业科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金青年科技基金国家生猪现代产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 一种非洲猪瘟病毒核酸免提取三重荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒
- 本发明涉及一种核酸免提取的非洲猪瘟病毒B646L、MGF505‑2R和CD2v三基因荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒,属于分子检测技术领域。本发明针对非洲猪瘟病毒的B646L、MGF505‑2R和CD2v基因分别设...
- 郭振华邢广旭陈鑫鑫王方雨李睿乔松林郭军庆张改平
- 文献传递
- 一种CD163突变体及其应用
- 本发明公开了一种CD163突变体及其应用,该CD163突变体是氨基酸序列第534位由谷氨酸E变为赖氨酸K。本发明通过不同种属CD163氨基酸序列比对,选取第534位氨基酸进行定点突变(谷氨酸E突变为赖氨酸K,即E534K...
- 张改平李睿马红芳乔松林陈鑫鑫郭振华赵东李学伍
- 文献传递
- 一种PEDV S-RBD线性B细胞表位及两株特异性识别单克隆抗体和应用
- 本发明公开了一种PEDV S‑RBD线性B细胞表位及两株特异性识别单克隆抗体和应用,所述B细胞表位的氨基酸序列为:TIDLFGYP。利用纯化后PEDV S‑RBD重组蛋白免疫BALB/c小鼠,获得单克隆抗体;利用IPMA...
- 李睿张改平孙彦刚乔松林陈鑫鑫郭振华赵东李学伍
- 文献传递
- 猪瘟抗体检测试纸研发及制备工艺的优化被引量:8
- 2019年
- 为研制灵敏、准确、稳定的猪瘟抗体检测试纸,对胶体金标记猪瘟病毒(CSFV)Erns-E2蛋白的pH、封闭液、保存液及样品垫等试纸生产各环节的保护剂、稳定剂及缓冲系统进行优化,确定猪瘟抗体检测试纸生产的工艺参数,使试纸的准确性、灵敏度及稳定性满足批量生产要求。该试纸在室温干燥条件下可稳定保存1a以上,为实现猪瘟抗体检测试纸的商业化及广泛应用奠定基础。
- 孙亚宁孙亚宁王丽杨苏珍杨苏珍陈鑫鑫张立林邓瑞广邓瑞广
- 关键词:猪瘟抗体试纸
- 一种高尔基体重组和堆叠蛋白65真核表达载体及其构建方法和应用
- 本发明涉及一种高尔基体重组和堆叠蛋白65(GRASP65)真核表达载体及其构建方法和应用,通过构建GRASP65真核表达载体,在非洲绿猴肾上皮细胞系MARC‑145中转染GRASP65真核表达载体;以高致病性PRRSV(...
- 李睿赵爽爽乔松林陈鑫鑫郭军庆邢广旭赵东张改平
- 一种Mhp P46蛋白的获取方法和胶体金免疫层析试纸条
- 本发明涉及生物工程技术领域,特别是涉及一种Mhp P46蛋白的获取方法和胶体金免疫层析试纸条。Mhp P46蛋白的获取方法包括:将Mhp P46基因连接到pCAGGS中,得到pCAGGS‑P46重组质粒;将pCAGGS‑...
- 陈鑫鑫许世萱乔松林孙亚宁邢云瑞杨苏珍李睿郭军庆张改平
- 一种口蹄疫病毒感染动物与疫苗免疫动物鉴别诊断试纸条
- 本发明公开了一种口蹄疫病毒感染动物与疫苗免疫动物鉴别诊断试纸条,该试纸条的检测线是利用口蹄疫病毒非结构蛋白表位多肽人工抗原印制而成,所选用的多肽为口蹄疫病毒非结构蛋白2B、2C、3B上3条表位多肽。本发明制备的人工抗原具...
- 张改平孙亚宁杨苏珍杨继飞陈鑫鑫滕蔓赵东邓瑞广
- 文献传递
- 猪肺炎支原体重组蛋白p46真核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立
- 2025年
- 为了建立一种猪肺炎支原体抗体间接ELISA检测方法,构建pCAGGS-P46真核表达载体,转染至HEK293F细胞中进行真核表达,纯化后采用SDS-PAGE鉴定蛋白纯度及分子质量大小,经Western blot检测重组p46蛋白特异性和反应原性。以重组蛋白p46为包被抗原,优化反应条件,确定阴性、阳性临界值,建立猪肺炎支原体抗体间接ELISA检测方法,并对方法的敏感性、稳定性、特异性进行评价。结果显示,p46重组蛋白分子质量大小为48.0 ku,纯度在90%以上,特异性和反应性良好。建立的间接ELISA检测方法最优检测条件为:抗原包被浓度为5μg/mL,采用本实验室封闭液37℃封闭120 min,待检血清1∶50稀释,37℃孵育30 min,二抗稀释度为1∶10000,37℃孵育30 min,TMB室温显色20 min。结果判定标准为:OD 450>0.2887为阳性,OD 450<0.2487为阴性,0.2487≤OD 450≤0.2887为可疑。建立的基于猪肺炎支原体p46蛋白的猪肺炎支原体抗体间接ELISA检测方法具有良好的敏感性、特异性及稳定性,与IDEXX的间接ELISA检测试剂盒检测的阴性、阳性血清符合率分别为100%、93.3%,研究结果为猪肺炎支原体抗体检测和免疫评价提供了技术支持。
- 许世萱孙亚宁邢云瑞杨苏珍郭军庆乔松林陈鑫鑫张改平
- 关键词:猪肺炎支原体间接酶联免疫吸附试验
- 猪细胞因子信号传导抑制因子1蛋白的表达纯化与多克隆抗体制备被引量:2
- 2019年
- 为制备猪细胞因子信号传导抑制因子1(SOCS1)的多克隆抗体,采用RT-PCR扩增猪SOCS1基因序列,将其克隆至原核表达载体pET-28a(+),构建重组表达载体pET28a-pSOCS1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,在不同温度、IPTG浓度、诱导时间等条件下进行表达,确定最佳表达条件,并对重组蛋白pSOCS1进行纯化。以表达的重组蛋白pSOCS1免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,经4次免疫,间接ELISA测得抗体效价达到1∶51 200。Western-blot和间接免疫荧光试验结果表明,该多克隆抗体可与pSOCS1重组蛋白和经HEK293T细胞过表达的pSOCS1蛋白发生特异性反应,证明pSOCS1重组蛋白免疫原性良好。本研究为后续制备单克隆抗体、研究猪SOCS1相关作用机制奠定了基础。
- 夏爽飞陈鑫鑫乔松林柴书军罗雪刚谢莎张改平
- 关键词:生物信息学分析多克隆抗体
- 一种提高猪繁殖与呼吸综合征病毒体外培养感染量的方法及其应用
- 本发明涉及提供一种提高猪繁殖与呼吸综合征病毒体外培养感染量的方法及其应用,在MARC‑145细胞或PAMs体外培养PRRSV过程中添加胰蛋白酶或弹性蛋白酶,所述胰蛋白酶的浓度为100μg/mL~200μg/mL;弹性蛋白...
- 李睿张改平侯婕乔松林陈鑫鑫郭振华赵东李学伍