乔松林
- 作品数：133 被引量：250H指数：7
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- 发文基金：国家自然科学基金国家生猪现代产业技术体系建设项目河南省农业科学院科研发展专项资金项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 一种非洲猪瘟病毒核酸免提取三重荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒
- 本发明涉及一种核酸免提取的非洲猪瘟病毒B646L、MGF505‑2R和CD2v三基因荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒，属于分子检测技术领域。本发明针对非洲猪瘟病毒的B646L、MGF505‑2R和CD2v基因分别设...
- 郭振华邢广旭陈鑫鑫王方雨李睿乔松林郭军庆张改平
- 一种CD163突变体及其应用
- 本发明公开了一种CD163突变体及其应用，该CD163突变体是氨基酸序列第534位由谷氨酸E变为赖氨酸K。本发明通过不同种属CD163氨基酸序列比对，选取第534位氨基酸进行定点突变(谷氨酸E突变为赖氨酸K，即E534K...
- 张改平李睿马红芳乔松林陈鑫鑫郭振华赵东李学伍
- 一种PEDV S-RBD线性B细胞表位及两株特异性识别单克隆抗体和应用
- 本发明公开了一种PEDV S‑RBD线性B细胞表位及两株特异性识别单克隆抗体和应用，所述B细胞表位的氨基酸序列为：TIDLFGYP。利用纯化后PEDV S‑RBD重组蛋白免疫BALB/c小鼠，获得单克隆抗体；利用IPMA...
- 李睿张改平孙彦刚乔松林陈鑫鑫郭振华赵东李学伍
- 基于二聚体核衣壳蛋白的猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体iELISA检测方法建立
- 2024年
- 为制备稳定性好、免疫反应性佳的核衣壳蛋白(Nucleocapsid protein,N),设计表达二聚体N蛋白(N-dimer),并基于该蛋白质建立猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)抗体间接酶联免疫吸附试验(Indirect enzyme-linked immunosorbent assay,iELISA)检测方法。首先选取当前PRRSV国内优势毒株NADC30-like N蛋白基因序列,通过(GGGGS)3linker将N蛋白基因序列串联,经密码子优化合成后构建N-dimer重组表达载体。利用原核表达系统进行诱导表达,并通过镍离子螯合亲和层析法进行纯化。Western-blot分析其与PRRSV阳性和阴性血清的反应性;冻融法比较N-dimer与单体N蛋白(N-monomer)的沉淀析出情况;ELISA法比较N-dimer与N-monomer的免疫反应性。以N-dimer作为包被抗原建立PRRSV抗体iELISA检测方法,对该方法的反应条件进行优化,验证其特异性、敏感性、重复性,并应用于临床血清样品检测。结果表明,在16℃、0.2 mmol/L异丙基硫代半乳糖苷条件下诱导16 h,N-dimer获得大量可溶性表达。Western-blot结果表明,N-dimer能够与PRRSV阳性血清发生特异性反应;相较于N-monomer,N-dimer能够稳定保存,并且免疫反应性更佳。成功建立了基于N-dimer的PRRSV抗体iELISA检测方法,且该方法具有良好的特异性、灵敏性、重复性;与商业试剂盒结果进行比较,其阳性符合率为96.88%,总符合率为96.86%,符合率高。综上,成功制备了稳定性好、免疫反应性佳的N-dimer,并基于N-dimer建立了PRRSV抗体iELISA检测方法。
- 赵啸乔松林孙亚宁钱祁昇李睿张改平
- 关键词：核衣壳蛋白二聚体间接ELISA
- 酶联免疫吸附技术在规模化猪场的应用
- 2016年
- 血清学检测在疫苗免疫效果评估、疫病诊断监测、猪群健康评估等方面发挥着重要的作用,其中酶联免疫吸附试验(ELISA)检测技术因其具有操作简便、快速敏感和易于标准化等优点,使其得到快速发展和广泛应用。目前ELISA检测技术在养猪生产中已得到广泛的认可,但如何采集合适的样本数量、如何从检测结果分析出需要的信息等,依然是困扰大多数从业者的问题。文章通过结合实际的临床检测案例,希望可以为该技术在规模化猪场的应用提供参考。
- 郭振华乔松林
- 关键词：血清学检测ELISA
- 法氏囊B细胞λ轻链基因编码蛋白在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2007年
- 为获得鸡λ轻链基因的表达蛋白,采用聚合酶链反应从鸡法氏囊B细胞cDNA文库中扩增出分泌表达蛋白的编码基因;用限制性内切酶消化后,插入克隆载体pUC19中。经PCR鉴定与序列测定证实后,以亚克隆法构建于原核表达载体PET43a的相应酶切位点。经过基因序列测定、BamHⅠ和HindⅢ双酶切鉴定证实克隆载体正确插入载体PET43a。转化宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导、SDS-PAGE分析表明目的蛋白得到表达;且能与His-Taq单抗相结合。
- 宋海涛张红王丽段艳华乔松林李学伍赵光辉张改平
- 关键词：传染性法氏囊基因蛋白
- 小鼠FcγRⅢ线性配体结合表位
- 本发明涉及小鼠mFcγRIII线性配体结合表位，该表位的氨基酸序列为Cys Ser Phe PheHis Asn Glu Lys Ser Val Arg Tyr His。本发明以化学合成多肽分析鉴定小鼠FcγRIII的线...
- 张改平张利娜席俊郭军庆苗现伟赵东乔松林杨艳艳郅玉宝刘运超王方雨王丽邓瑞广
- 鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库的构建及鉴定被引量：3
- 2008年
- 为构建鸡胚成纤维细胞cDNA真核表达文库并对文库质量进行鉴定,从鸡胚成纤维细胞中直接提取mRNA,用紫外分光光度计测定含量。经电泳确定mRNA的质量,反转录合成第一、二链cDNA,经苯酚氯仿抽提后与EcoRⅠ接头连接,经NotⅠ酶切后用spin column除去小于500 bp的cDNA片段,与经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切的真核表达质粒连接,连接产物电转化感受态细胞,测定文库的容量大小并通过colony PCR鉴定插入cDNA片段的大小。构建成含8.8×105个重组子的鸡胚成纤维细胞cDNA文库,重组子中平均插入外源片段长度大于1.0 kb的约占85.7%。从结果看构建的文库合格,适合用于筛选目的cDNA克隆。
- 张改平朱礼倩杨艳艳赵绪永乔松林张红王丽李清州王选年
- 关键词：鸡胚成纤维细胞CDNA表达文库
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒细胞受体研究进展被引量：4
- 2010年
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)的病原,对PRRSV细胞受体的研究将有助于揭示PRRSV的感染途径、复制过程、致病机理和疫病预防及控制等一系列问题,细胞受体的研究已经成为目前PRRSV研究中的重要领域。论文从硫酸乙酰肝素受体、唾液酸黏附素受体、CD163分子、波形蛋白等方面综述了PRRSV细胞受体研究进展。
- 李清州达龙珠鲍登克陈海燕杨春英刘毓霞乔松林
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒硫酸乙酰肝素波形蛋白
- 非洲猪瘟病毒野毒感染与基因缺失毒株双重荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒
- 本发明涉及一种非洲猪瘟病毒野毒感染与基因缺失毒株双重荧光定量PCR检测组合物、方法及试剂盒。采用TaqMan探针荧光定量检测法，建立了针对B646L基因和MGF505‑2R基因的双重荧光定量PCR检测方法，可以有效区分野...
- 张改平郭振华金前跃孙亚宁李青梅杨继飞王方雨乔松林郭军庆
