孙强
- 作品数：24 被引量：73H指数：5
- 供职机构：华东师范大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 脑部特异表达SV40Tag转基因动物模型的建立被引量：4
- 2007年
- 将猿猴病毒抗原蛋白(SV40Tag)片段克隆进脑部特异表达载体pMM279中,通过显微注射法制作转基因小鼠。采用PCR和Southern blotting检测目的基因整合,并通过RT-PCR检测目的基因的表达。结果表明:共出生29只仔鼠,经PCR检测出3只阳性,Southern blotting检测出2只阳性。RT-PCR检测到SV40Tag仅在前脑部皮层和海马表达。成功获得的脑部特异表达SV40Tag转基因小鼠模型,为SV40Tag的致病机制及脑肿瘤的治疗等研究提供工具。
- 冯洁孙强邢华高诚李厚达
- 关键词：脑肿瘤转基因
- 恒河猴和食蟹猴血液蛋白遗传多样性分析被引量：1
- 2009年
- 以碳酸酐酶、腺苷脱氨酶、转铁蛋白、维生素D结合蛋白、血浆酯酶、碱性磷酸酶、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶、红细胞酯酶为血液蛋白标记,对恒河猴指明亚种(120只)和食蟹猴柬埔寨亚种(120只)2个群体的遗传多态性进行遗传检测。结果表明:恒河猴和食蟹猴的多态性位点百分数、等位基因数和平均杂合度分别为0.625、2.80、0.549 0和0.750、2.83、0.378 9。恒河猴群体具有高度的遗传多态性,食蟹猴群体具有中等的遗传多态性。Hardy-Weinberg平衡状态检验表明,2个群体均未明显偏离Hardy-Weinberg平衡。
- 金宇娟杨文婷董娟李玉琴李厚达杨森富孙强
- 关键词：恒河猴食蟹猴血液蛋白遗传多态性
- 激肽释放酶转基因大鼠模型的建立被引量：3
- 2007年
- 目的建立KLK1转基因大鼠模型。方法腹腔注射PMSG-HCG（150-150IU/kg）超排不同周龄（4-8周）SD大鼠比较超排效果的差异，以可用于注射胚胎数作为评判标准确定最佳超排周龄。构建pBC-klk1转基因构件，经酶切、纯化后通过显微注射方法导入SD大鼠受精卵原核并移植到同期受孕的SD受体母鼠输卵管内。出生后仔鼠用PCR和Southern方法检测鼠尾DNA鉴定基因型，通过RT-PCR和免疫组化方法检测klk1基因表达。结果4-8周SD大鼠超排后分别获得受精卵14±14.8、30±15.2、13.3±13.7、13±14.7、8±5.7，5周龄大鼠超排效果最好，与其他周龄大鼠相比有显差异，P〈0.05；显微注射1538枚卵，移植685（44.53%）枚卵于31只受体输卵管中，12（12/31，38.7%）只怀孕，共产仔62只，经PCR检测获得6只阳性鼠，Southern检测3只阳性。对Southern检测阳性转基因大鼠子代进行RT-PCR检测和免疫组化分析证明klk1基因在肾脏、胰腺和乳腺内表达。结论成功建立klk1基因表达的转基因大鼠模型，该模型是高血压病研究的理想动物模型。
- 郑志红杨葳周生来王维董婉维李兆阳孙强张梅英李华王禄增
- 关键词：转基因高血压
- Tet-on系统诱导表达c-myc转基因小鼠的建立被引量：6
- 2007年
- 从Hela细胞RNA中通过RT-PCR扩增出c-myc基因的cDNA,将c-myc cDNA克隆入Tet-on系统的反应元件pTRE2载体,与含有Tet-on系统的调控元件pBC-rtTA基因混合显微注射到FVB小鼠受精卵的雄原核中,共注射603枚卵,将注射后存活的263枚卵移植到21只假孕母鼠输卵管内,有17只怀孕,共产仔59只。PCR和Southern blotting检测有2只双基因阳性公鼠和1只c-myc单基因阳性公鼠。3只公鼠的F1代PCR检测表明,其携带的c-myc外源基因均具有遗传性。
- 吴红张成香郑逸梅金宇娟孙强李厚达
- 关键词：C-MYC转基因小鼠
- 卵母细胞核移植中去核技术的探讨被引量：6
- 2001年
- 目的 :了解卵母细胞进行去核手术时其去核方法的可靠性。方法 :通过 2步法对 175 6枚卵母细胞进行去核操作。结果 :存活 12 46枚 ,存活率 71 1% ,将存活卵子进行固定、染色后观察 ,去核完全的卵母细胞有 10 70枚 ,去核率为85 9% ,总去核率为 6 1 0 %。结论 :此法去核有一定可靠性。细胞核的定位是手术成功的关键 ,固定针、去核针。
- 杨红李厚达顾惠心孙强陈露李莉张静
- 关键词：卵母细胞去核
- 人免疫重建SCID小鼠的研究被引量：3
- 1997年
- ４２只不渗漏ＳＣＩＤ小鼠分别腹腔注射经冷冻、复苏的胎肝或胎肝加胎胸腺细胞，每鼠２×１０７活细胞，建立人胎肝细胞ＳＣＩＤ小鼠模型Ⅰ和Ⅱ，研究人免疫系统。用人肝癌细胞（ＨＨＣＣ）免疫，ＳＣＩＤ鼠出现初始免疫答应，血清人ＩｇＧ平均滴度分别达到５１３．０±８４．２ｎｇ／ｍｌ和７１９．７±２０１．６ｎｇ／ｍｌ，ＩｇＧ峰值分别出现在免疫重建后１０～１２和１０～１４周，特异性抗ＨＨＣＣ抗体滴度分别达到１∶７０．４±３５．０５和１∶２９４．４±１６８．５２，免疫重建后７～８周龄，ＡＢＣ法免疫组化染色，免疫鼠模型肝、脾中可检出标记人的ＣＤ３＋、ＣＤ２０＋Ｔ和Ｂ淋巴细胞克隆和细胞岛。流式细胞仪检测了抗原免疫组和模型组外周血、脾脏、肝脏的人ＣＤ３＋、ＣＤ４＋、ＣＤ８＋、ＣＤ１９＋、ＣＤ２０＋标记的淋巴细胞数，其中标记ＣＤ２０＋淋巴细胞平均值外周血３．１２±３．０３％、脾脏１．４±０．２０％、肝脏２．３２±１．４９％。而无抗原免疫的模型组在肝脏仅有微量或检测不到人标记淋巴细胞。
- 李厚达邓忠彬徐向明薛整风李劲松孙强隋延仿蒋建利
- 关键词：SCID小鼠免疫重建CD20CD3^+鼠模型抗原免疫
- 高校教师CAVI、ABI与身体成分相关性研究——以上海师范大学为例
- 研究目的：本研究选取上海师范大学20-59周岁484名教师作为试验对象，根据年龄段进行分组共有232名青年教师和252名中年教师，并采用Inbody3.0人体身体成分测量仪和日本福田VS-1000血管动脉硬化测试仪进行试...
- 孙强
- 关键词：高校教师身体成分血管弹性踝臂指数
- 文献传递
- 共刺激分子配体B7-DC基因真核表达载体和转基因细胞的构建
- 2006年
- 目的:克隆小鼠B7-DC基因,并构建含该基因的真核表达载体pEF6/-B7-DC-V5His,证明该基因在CHO细胞中的表达方式,为建立B7-DC的转基因小鼠打下基础。方法:从小鼠胸腺中抽提总RNA为模板,通过RT-PCR技术,扩增出B7-DC编码区片段。按常规方法克隆进pEF6V5His载体中,重组质粒经鉴定后采用脂质体法转染CHO细胞,48小时后进行间接免疫荧光实验,72小时后用blasticidin进行筛选,挑选出能稳定表达B7-DC的细胞株。结果:已成功克隆小鼠B7-DC基因并构建了用于表达B7-DC基因的真核表达载体,经间接免疫荧光实验(IFA)证明,该基因在CHO细胞中得到表达。经Western blot检测表明筛选出的转基因细胞稳定表达了B7-DC基因。结论:构建了用于表达B7-DC基因的真核表达载体pEF6/-B7-DC-V5His,并能在CHO细胞中稳定表达目的基因,为该基因功能的后续研究奠定了基础。
- 岳挺孙强章蓉曹慧刘进董娟李厚达
- 关键词：共刺激分子真核表达
- SPF级实验动物饲料灭菌方法的比较研究
- 通过对动物饲料进行多种灭菌方法的处理,用常规的检测方法对SPF小鼠和大鼠饲料进行细菌和霉菌总数检测,为寻找最佳灭菌方法提供参考依据。试验结果表明:未经消毒处理的饲料微生物学质量严重超标,不可用于饲养SPF级以上的动物;用...
- 周敏潘甜美黄小琼邹红霞杨东孙强
- 关键词：灭菌方法
- 文献传递
- 两种含SV40T不同区段的基因构建及其转基因小鼠的建立被引量：1
- 2005年
- 目的 为解决SV4 0T转基因小鼠高发瘤难保种的问题 ,构建了两种含有SV4 0T不同区段的外源基因 :Rb结合域点突变的SV4 0T基因 (SV4 0T DRb)和无p5 3结合域的SV4 0T基因 (SV4 0T Dp5 3)。方法 利用分子生物学的基因克隆手段 ,将改造的SV4 0T基因片段克隆测序 ,最终将这两个改造后的基因克隆进乳腺特异性的真核表达载体p2 0 5C3中 ,运用雄原核显微注射法制备转基因小鼠。结果 利用PCR方法检测出 6只双阳性转基因 (同时检测到SV4 0T DRb和SV4 0T Dp5 3两种基因 )小鼠 ,为避免检测结果中假阳性的发生 ,应用Southern blot方法检测出 1只双阳性转基因小鼠。结论 本试验的结果证明 ,构建的两种含SV4 0T不同区段的策略是成功的 ,其建立的阳性转基因小鼠确实是弱化了SV4 0T转基因小鼠高发瘤的特性。
- 谢夏阳滕勇孙强徐平孙怀昌李厚达
- 关键词：转基因小鼠PCR肿瘤模型DNA肿瘤病毒
