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- AdipoRon对糖尿病小鼠睾丸GRP78、CHOP、Caspase-12和GSDMD表达的影响
- 2024年
- 目的观察脂联素受体激动剂AdipoRon对糖尿病小鼠睾丸组织中内质网应激及细胞焦亡表达水平的影响,初步探讨AdipoRon保护糖尿病小鼠睾丸的作用机制。方法8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为对照组(NC组)、糖尿病组(DM组)、AdipoRon治疗组(ADI组)。采用链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制备糖尿病小鼠模型。造模成功后,ADI组给予AdipoRon灌胃(20 mg/kg),NC组和DM组分别给予相同剂量的生理盐水灌胃。药物干预治疗8周后,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测空腹血糖、胰岛素、睾酮、卵泡刺激素及黄体生成素,测量睾丸质量并计算睾丸指数,检测精子数量及活动度,HE染色观察睾丸组织形态变化。荧光定量PCR法测定睾丸组织中内质网应激指标(GRP78、CHOP、Caspase-12)和焦亡相关蛋白(GSDMD)mRNA表达量。结果与NC组相比,DM组小鼠睾丸生精小管数目减少,生精细胞数量减少且排列疏松,血清胰岛素、睾酮、黄体生成素、卵泡刺激素、精子活动率、精子数量水平均显著降低(P<0.05),空腹血糖和睾丸质量指数明显上调(P<0.05),且睾丸组织中GRP78、CHOP、Caspase-12、GSDMD的mRNA表达水平均显著升高(P<0.05)。与DM组相比,ADI组小鼠睾丸病理损伤有所减轻,血清胰岛素、睾酮、黄体生成素、体质量、精子活动率及精子数量水平显著升高(P<0.05),血糖、睾丸指数及睾丸组织中GRP78、CHOP、Caspase-12、GSDMD的mRNA表达水平显著降低(P<0.05)。结论AdipoRon可能通过调控内质网应激及细胞焦亡对糖尿病小鼠睾丸组织产生保护作用。
- 张新渝郭志新
- 关键词：糖尿病睾丸内质网应激
- 血清ApoB/ApoA1、Caspase-12水平与急性胰腺炎并发感染性胰腺坏死的关系
- 2024年
- 目的探讨血清载脂蛋白B/载脂蛋白A1(ApoB/ApoA1)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶12(Caspase-12)与急性胰腺炎(AP)并发感染性胰腺坏死(IPN)的关系。方法选取IPN患者82例(IPN组),同期选择单纯AP患者82例(单纯AP组),另选取健康体检志愿者82名(对照组)。用免疫比浊法检测血清ApoA1、ApoB,并计算ApoB/ApoA1值,酶联免疫吸附法检测Caspase-12。收集AP患者临床资料,用多因素Logistic回归分析AP并发IPN的影响因素;用受试者工作特征曲线及曲线下面积评价血清ApoB/ApoA1、Caspase-12水平对AP并发IPN的诊断价值。结果IPN组血清ApoB/ApoA1、Caspase-12水平高于单纯AP组、对照组(P均<0.05),单纯AP组血清ApoB/ApoA1、Caspase-12水平高于对照组(P均<0.05)。IPN组病情严重程度、脂肪酶、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)高于单纯AP组(P均<0.05)。病情严重程度加重和CRP、PCT、ApoB/ApoA1、Caspase-12升高为AP并发IPN的独立危险因素(P均<0.05)。血清ApoB/ApoA1、Caspase-12水平联合诊断的曲线下面积为0.888,大于血清ApoB/ApoA1、Caspase-12水平单独诊断的0.788、0.795(P均<0.05)。结论血清ApoB/ApoA1、Caspase-12水平升高是AP患者AP并发IPN的独立危险因素,血清ApoB/ApoA1、Caspase-12联合对AP并发IPN具有较高的诊断价值。
- 杨建龙段超勤华婷琰
- 关键词：急性胰腺炎感染性胰腺坏死
- 基于GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路探讨艾灸预防急性胃黏膜损伤的机制
- 2023年
- 目的基于葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/半胱氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路探讨艾灸预防急性胃黏膜损伤的机制。方法将52只健康SD大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组,每组13只。正常组、模型组大鼠只固定不进行处理;艾灸预处理组大鼠选取足三里穴、中脘穴进行艾灸,每次20 min,1次/d,连续灸7 d;针刺预处理组大鼠选穴和治疗时间同艾灸预处理组。预处理结束后,对模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组大鼠进行无水乙醇结合阿司匹林混悬液灌胃7 d建立急性胃黏膜损伤模型。实验结束后,HE染色观察各组大鼠胃组织病理形态,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)水平,免疫组织化学法检测胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP蛋白表达情况。结果模型组大鼠胃组织上皮细胞结构破坏,炎症细胞浸润,胃黏膜组织损伤明显;艾灸预处理组和针刺预处理组大鼠胃组织病理损伤较轻。与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显升高(P均<0.05),血清IL-10水平明显降低(P<0.05),胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP呈强阳性表达,可见大量棕黄色颗粒;艾灸预处理组和针刺预处理组大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1β水平均明显低于模型组(P均<0.05),血清IL-10水平均明显高于模型组(P均<0.05),胃组织中GRP78、Caspase-12、CHOP呈弱阳性表达,可见少量棕黄色颗粒,且艾灸预处理组上述各项变化均较针刺预处理组明显。结论艾灸预处理对急性胃黏膜损伤具有保护作用,分析与其调节GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路,抑制内质网应激,调节促炎及抑炎因子表达有关。
- 韦芳霍新慧周知然兰永利阿力米热·阿布都热西提
- 关键词：艾灸预处理胃黏膜损伤
- 艾灸对实验性RA家兔滑膜NLRP3炎性小体、Caspase-12表达的影响被引量：3
- 2023年
- 目的观察艾灸对实验性类风湿性关节炎(Rheumatoid arthritis,RA)家兔滑膜组织中NLRP3炎性小体、Caspase-12表达的影响,探索艾灸对RA家兔抗炎作用的机制。方法将24只日本大耳白兔根据体质量和性别随机分为3组:对照组、模型组、艾灸组。将弗氏完全佐剂(Freund's complete adjuvant,FCA)按照同等剂量(0.5 mL·kg^(-1))注射到各组(模型组、艾灸组)实验动物双侧后膝关节腔内,对照组各动物于该位置处注入同等体积的生理盐水用作对照。对艾灸组家兔双侧“肾俞”、“足三里”穴进行无瘢痕艾灸,每天每穴5壮,连续治疗6天,休息1天,为1个疗程,共治疗3个疗程。光镜下观察家兔膝关节滑膜样本的组织形态学改变,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法检测家兔膝关节滑膜组织中NLRP3、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶1(Caspase-1)、Caspase-12的mRNA表达,酶联免疫吸附测定法(Enzyme-linked immuno sorbent assay,ELISA)检测实验动物滑膜液中IL-1β(白细胞介素1β)的含量变化。结果相较于对照组,模型组滑膜的炎性细胞浸润程度、滑膜组织增生程度、纤维组织增生程度、巨噬细胞增生程度等病理改变及病理评分增加(P<0.05),NLRP3、Caspase-1 mRNA的表达升高(P<0.05),Caspase-12 mRNA的表达显著下降(P<0.01),IL-1β的表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,艾灸组滑膜病变程度以及病理评分均有所减少(P<0.05),NLRP3、Caspase-1 mRNA的表达下降(P<0.05),Caspase-12 mRNA的表达显著上升(P<0.01),IL-1β的表达降低(P<0.05)。结论艾灸对RA家兔膝关节滑膜炎症病理过程具有明显的抑制作用;艾灸“肾俞”、“足三里”穴可上调Caspase-12表达进而抑制NLRP3炎性小体,可能是艾灸减轻RA炎症反应的机制之一。
- 路晓清刘华辉陈俊席东来王燚杨慎峭周海燕马文彬吴菲杨馨
- 关键词：艾灸NLRP3CASPASE-12
- 逍遥散对抑郁大鼠大脑皮层PERK、Caspase-12mRNA表达的影响被引量：3
- 2023年
- 目的:观察抑郁大鼠大脑皮层蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)mRNA表达水平,探讨逍遥散治疗抑郁症的相关分子机制。方法:将48只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、逍遥散组、氟西汀组,每组12只。采用慢性束缚应激(CIS)方法制备抑郁大鼠模型,造模前30min给予相应药物灌胃治疗,持续21d。通过观察大鼠体质量、糖水消耗实验、旷场实验观察逍遥散对抑郁大鼠行为学改变的影响。常规HE染色法观察大鼠大脑皮层病理形态的改变。实时荧光定量PCR法检测各组大鼠大脑皮层内质网应激(ERS)信号分子PERK和Caspase-12 mRNA表达水平,酶联免疫法检测大鼠血清C反应蛋白(CRP)和核因子κB(NF-κB)的含量。结果:与模型组比较,逍遥散组可有效减轻抑郁大鼠的抑郁样行为;使抑郁大鼠糖水消耗量与旷场实验中大鼠的直立次数、水平穿格数、修饰次数增加(P<0.01);改善抑郁大鼠大脑皮层病理结构;使大脑皮层PERK、Caspase-12 mRNA表达水平显著降低(P<0.01);血清CRP和NF-κB含量显著降低(P<0.01)。结论:逍遥散能改善慢性束缚应激大鼠抑郁状态,其机制可能与降低抑郁大鼠大脑皮层PERK、Caspase-12 mRNA表达水平,抑制ERS,进而保护大脑皮层组织细胞,发挥治疗抑郁症的作用。
- 冯向欣何佩宜陈聪侯雅静潘秋霞陈家旭
- 关键词：逍遥散核因子ΚB
- 黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关Bax和Caspase-12的影响被引量：4
- 2023年
- 目的:研究黄芪桂枝五物汤加减对糖尿病大鼠坐骨神经细胞凋亡相关B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)和胱天蛋白酶-12(Caspase-12)蛋白与mRNA表达的影响,以探究黄芪桂枝五物汤加减治疗糖尿病周围神经病变的作用机制。方法:选用动物实验方法进行研究,将60只雄性SD大鼠通过高糖高脂饲料喂养联合链尿佐菌素(STZ)腹腔注射诱导成糖尿病大鼠动物模型,连续3 d随机血糖≥16.7 mmol·L^(-1)者为糖尿病大鼠造模成功,将48只造模成功的糖尿病大鼠随机分为模型组、α-硫辛酸组(0.026 8 g·kg^(-1)·d^(-1))、中药高、低剂量组(2.5、1.25 g·kg^(-1)·d^(-1)),每组各12只,并设正常组10只。监测大鼠体质量和随机血糖水平;干预16周末通过Key point肌电采集系统检测大鼠坐骨神经传导速度;分别通过蛋白免疫印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测大鼠坐骨神经中Bax和Caspase-12蛋白与mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量显著下降(P<0.01),随机血糖水平显著升高(P<0.01);干预16周,与模型组比较,中药高剂量组大鼠体质量明显升高(P<0.05),其他给药组体质量变化差异无统计学意义;各给药组随机血糖水平均显著降低(P<0.01)。与正常组比较,干预16周,模型组大鼠运动和感觉神经传导速度显著降低(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠运动和感觉神经传导速度均明显升高(P<0.05,P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12蛋白表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12蛋白表达均显著降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠坐骨神经Bax和Caspase-12 mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,α-硫辛酸组、中药高剂量组大鼠坐骨神经Bax mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01),中药低剂量组坐骨神经Bax mRNA表达降低有下降趋势;各给药组大鼠坐骨神经Caspase-12 mRNA�
- 张岩龙泓竹王曦鹏曹伟芳吴丽丽刘铜华周静鑫
- 关键词：黄芪桂枝五物汤加减
- 针灸预处理对急性胃黏膜损伤大鼠GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路的影响
- 2023年
- 目的:探讨针灸预处理对急性胃黏膜损伤大鼠葡萄糖调节蛋白78(GRP78)/半胱氨酸蛋白水解酶-12(Caspase-12)/CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)信号通路的影响。方法:将52只大鼠随机分为正常组、模型组、艾灸预处理组、针刺预处理组,每组13只。正常组、模型组仅固定不作处理;对针刺预处理组大鼠行针刺处理;对艾灸预处理组大鼠行足三里穴、中脘穴艾灸,20 min/次,1次/d,连续灸7 d。对模型组、针刺预处理组、艾灸预处理组大鼠进行无水乙醇结合阿司匹林混悬液灌胃建立急性胃黏膜损伤模型。观察大鼠一般情况及胃黏膜损伤组织病理学变化;酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测大鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、环氧化酶-2(COX-2)浓度;免疫组织化学法检测大鼠GRP78、Caspase-12、CHOP水平。结果:模型组大鼠可见上皮细胞结构破坏不完整,胃黏膜组织损伤明显,胃黏膜损伤指数(UI)评分显著高于正常组(P<0.05);与模型组比较,针刺预处理组、艾灸预处理组大鼠UI指数评分显著降低(均P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠血清TNF-α、IL-6、COX-2浓度显著升高(均P<0.05);与模型组比较,针刺预处理组、艾灸预处理组大鼠血清TNF-α、IL-6、COX-2浓度显著降低(均P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠GRP78、Caspase-12、CHOP呈强阳性表达,可见大量棕黄色颗粒,针刺预处理组、艾灸预处理组大鼠GRP78、Caspase-12、CHOP结果阳性细胞数量减少,呈弱阳性,可见少量棕黄色颗粒。结论:针灸预处理可减轻急性胃黏膜损伤大鼠炎症反应,其作用机制可能是通过抑制内质网应激,基于GRP78/Caspase-12/CHOP信号通路预防大鼠胃黏膜损伤。
- 霍新慧周知然韦芳李盼兰永利
- 关键词：胃黏膜损伤针刺预处理艾灸预处理
- 电针对脑缺血再灌注大鼠内质网应激IRE1α/TRAF2/ASK1/Caspase-12通路的影响研究
- 2023年
- 目的:观察电针“百会”“内关”对脑缺血再灌注损伤(CIRI)大鼠缺血侧大脑皮质凋亡相关蛋白IRE1α、TRAF2、ASK1及Caspase-12的影响,初步探讨电针治疗脑缺血再灌注凋亡损伤的作用机制。方法:60只雄性SD大鼠,随机分为假手术组(A组)、模型组(B组)、针刺组(C组)和依达拉奉组(D组),每组15只。选用改良线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞(MCAO)模型;LONGA 5级神经功能评分法评估大鼠神经功能情况;苏木素-伊红(HE)染色法观察大鼠缺血侧大脑皮质病理形态学变化;原位末端转移酶标记法(TUNEL)检测大鼠神经元细胞凋亡率;蛋白免疫印迹法(WB)检测大鼠大脑皮质IRE1α、TRAF2、ASK1及Caspase-12蛋白表达情况。结果:与假手术组比较,模型组大鼠神经功能评分,细胞凋亡率以及IRE1α、TRAF2、ASK1及Caspase-12蛋白表达量均明显增加,差异具有统计学意义(P<0.01),大脑皮质组织结构紊乱,细胞萎缩坏死;与模型组比较,针刺组和依达拉奉组神经功能缺损评分以及IRE1α、TRAF2、ASK1和Caspase-12蛋白表达量均明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01),且细胞凋亡率降低,差异具有统计学意义(P<0.01或P<0.05),大脑皮质细胞病理状况比模型组减轻,萎缩坏死细胞变少;与依达拉奉组比较,针刺组大鼠各项指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:电针能抑制CIRI大鼠脑组织细胞凋亡,促进神经功能恢复,作用机制可能与电针下调IRE1α/TRAF2/ASK1/Caspase-12通路蛋白有关。
- 聂妍琦傅旖灵刘孜琦陆梦郁洁雷晓明
- 关键词：脑缺血再灌注
- 枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3、αB-crystallin表达的影响被引量：9
- 2022年
- 目的观察枸杞子-丹参对rd10小鼠视网膜Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3、α晶状体球蛋白B(αB-crystallin)表达的影响,探讨枸杞子-丹参治疗视网膜色素变性的作用机制。方法40只rd10小鼠随机分为空白组、对照组、枸杞子组、丹参组、杞参组,每组8只,分别予生理盐水、维生素A溶液、枸杞子超微配方颗粒溶液、丹参超微配方颗粒溶液、枸杞子+丹参超微配方颗粒溶液灌胃,另取8只C57小鼠作为野生组,灌胃等体积生理盐水,灌胃剂量20 mL/kg,每日1次,连续28 d。TUNEL染色观察小鼠视网膜形态及感光细胞凋亡情况,RT-qPCR检测小鼠视网膜组织Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3、αB-crystallin mRNA表达,免疫组化和免疫荧光检测Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3、αB-crystallin蛋白表达。结果野生组小鼠视网膜各层结构排列正常,视网膜外层未见凋亡细胞;空白组小鼠视网膜结构不清晰,视网膜外层可见凋亡细胞;对照组、枸杞子组、丹参组小鼠视网膜结构欠清晰,视网膜色素上皮细胞不连续,视网膜外层可见少量凋亡细胞;杞参组小鼠视网膜结构清晰,视网膜外层凋亡细胞数量少于空白组。与空白组、对照组、枸杞子组和丹参组比较,杞参组小鼠视网膜组织Caspase-8、Caspase-12、Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05);与空白组、对照组和枸杞子组比较,杞参组小鼠视网膜组织αB-crystallin mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论枸杞子-丹参可抑制rd10小鼠视网膜细胞凋亡,维持视网膜正常结构,从而保护视功能。
- 蒋鹏飞欧晨彭俊姚震田野杨毅敬宋厚盼徐剑彭清华
- 关键词：枸杞子丹参小鼠
- 补虚活血法对rd10小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2成熟体表达的影响被引量：2
- 2022年
- 目的:观察补虚活血法对rd10小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2成熟体表达的影响。方法:将40只rd10小鼠随机分为5组:空白组(0.9%氯化钠溶液)、对照组(维生素A溶剂)、枸杞组(枸杞子中药配方颗粒溶液)、丹参组(丹参中药配方颗粒溶液)、杞参组(枸杞子加丹参中药配方颗粒溶液),每组8只;8只C57小鼠为野生组(0.9%氯化钠溶液)。给药28 d后,HE染色观察各组小鼠视网膜形态,Western Blot法检测各组小鼠视网膜Caspase-12前体、Caspase-2成熟体表达情况。结果:空白组小鼠视网膜各层结构紊乱萎缩变薄,视细胞萎缩变性;杞参组小鼠视网膜厚度高于空白组,视网膜色素上皮细胞连续可见,视网膜感光细胞核数量多于空白组。各组rd10小鼠视网膜组织中Caspase-12前体、Caspase-2成熟体蛋白相对表达量高于野生组(P<0.05),杞参组小鼠视网膜组织中Caspase-12前体、Caspase-2成熟体蛋白相对表达量低于空白组、对照组(P<0.05)。结论:补虚活血法可以降低rd10小鼠视网膜凋亡因子Caspase-12前体、Caspase-2成熟体的表达,保护视网膜正常功能结构。
- 蒋鹏飞欧晨彭俊彭俊田野杨毅敬宋厚盼宋厚盼
- 关键词：视网膜色素变性枸杞子视网膜
