方珊
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
- 供职机构：华东理工大学生物工程学院生物反应器工程国家重点实验室更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 新型脂肪酶基因的克隆与表达被引量：3
- 2013年
- 目的通过同源比对筛选黑曲霉中新型活性脂肪酶。方法抽提黑曲霉基因组,依据从烟曲霉中获得的高活性脂肪酶基因序列,NCBI网站序列比对后搜索到与烟曲霉af1-1同源性较高的黑曲霉脂肪酶基因序列an1-1,设计引物进行PCR扩增,产物胶回收后连接至PMD18T载体,测序验证正确后将目的序列连接至表达载体PET28a,转化Escherichia coli BL21(DE3)中表达和测定活性。结果克隆了一种来源于黑曲霉新型脂肪酶基因an1-1,15℃表达条件下主要为可溶性表达,对C4底物(对硝基苯酚丁酸酯)活性达2365 U/L。结论同源序列比对能有效提高筛选效率,并从黑曲霉中筛选到一种新的脂肪酶基因,在大肠杆菌中可高表达并具有生物学活性。
- 方珊刘浩浩李华林赵艳华杨剑冰赵健
- 关键词：黑曲霉活性
