王俊皓
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：吉林农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：吉林省自然科学基金国家自然科学基金国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 大豆GmAAP基因的克隆、生物信息学分析及亚细胞定位
- 2019年
- 本研究以大豆Williams 82为实验材料,采用RT-PCR技术克隆到了GmAAP基因,其开放阅读框长度为1440 bp,编码479个氨基酸。生物信息学分析表明,GmAAP蛋白分子量为53.286 kD,理论等电点为8.93,不稳定指数为34.04,属于稳定的蛋白结构;其二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲分别占据47.18%、15.66%、2.71%、34.45%;跨膜区与疏水性分析显示其含有10个跨膜区,且构成跨膜区的氨基酸多为疏水性氨基酸;GmAAP与野生大豆AAP6亲缘关系最为相近,且序列比对的一致性为100%,可能为大豆AAP6基因。构建融合表达载体,利用PEG-Ca2+介导法转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位分析,结果显示GmAAP定位在质膜上。AAP能提高豆科植物对外源氮的吸收与利用率,进而增加种子内贮藏蛋白含量,提升大豆品质。本研究的结果可为GmAAP功能的进一步研究奠定基础,同时也为氮素的高效利用提供候选基因。
- 王俊皓谢五洋徐华祥袁学顺周莹崔喜艳
- 关键词：大豆基因克隆生物信息学分析亚细胞定位
- 植物钙依赖蛋白激酶CDPK基因功能综述被引量：5
- 2017年
- CDPK是一类Ser/Thr型蛋白激酶,存在于植物的各个器官和原生生物中,直接被Ca2+信号激活,通过对底物的调节,调控多个下游支路,将信号放大,从而完成传递信号的作用,广泛参与干旱、盐碱等非生物胁迫。本文对植物钙依赖蛋白激酶CDPK基因功能的研究进行综述。
- 费小钰李红丽王俊皓
- 关键词：信号转导生物学功能
- 大豆GmPM13基因的克隆及原核表达被引量：1
- 2018年
- 通过对大豆(Glycine max)油体钙蛋白(caleosin)基因GmPM13的克隆及原核表达,为今后利用基因工程方法检测转GmPM13基因提供抗体。运用RT-PCR技术克隆得到大豆油体钙蛋白GmPM13基因,构建原核表达载体,命名为p ET-28a-pm13。并转化到Ecdi和Rosetta中,经异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后,SDS-PAGE分析GmPM13蛋白的表达情况。大豆GmPM13基因全长c DNA序列为738 bp,包括一个720 bp的开放阅读框,编码239个氨基酸,油体钙蛋白的分子量为27.1 k Da,诱导表达产物的大小与预计蛋白大小相符。在28℃,1.5 mol·L^(-1)IPTG浓度下,诱导12 h蛋白的表达量最高,占总蛋白的39.25%。
- 王羽李红丽王俊皓李海燕崔喜艳
- 关键词：大豆基因克隆原核表达
