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李娜: 作品数：74 被引量：57H指数：4; 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>; 发文基金：云南省联合支持国家计划项目国家科技支撑计划国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>

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一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法: 本发明涉及一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法，属于培育清洁级实验动物技术领域。该方法包括体外寄生虫净化、肠道蠕虫净化、沙门氏菌和志贺氏菌净化、弓形虫筛选、疱疹病毒筛选等步骤。本发明方法简单，利用药物净化与和...; 孙晓梅罕园园匡德宣王文广李娜陆彩霞仝品芬代解杰

一种树鼩Ⅱ型糖尿病快速的造模方法: 本发明涉及一种树鼩Ⅱ型糖尿病快速的造模方法，该方法是选用树鼩，采用高脂高糖饲料喂养12‑15天，自由取食，自由饮水；在喂养第7‑9天时，利用链脲佐菌素对树鼩给药，剂量为90‑110mg/kg；所述的高脂高糖饲料包括按照重...; 代解杰邱敏罕园园陆彩霞孙晓梅王文广李娜仝品芬郝佩琪

呼肠孤病毒感染的树鼩中三类CD分子及IFN-γ表达变化及特征被引量：1: 2018年; 目的探讨树鼩呼肠孤病毒激起机体免疫变化的特征,为树鼩的病毒防范提供理论基础。方法选取40~50日龄的树鼩分为三组(MRV1/TS/2011病毒株、MRV3/TS/2013病毒株和空白对照),通过灌胃后,采集第1、8、14、21、28天尾静脉血样,RT-PCR检测病毒载量、流式细胞术检测CD4/CD8/CD19、ELISA检测IFN-γ。结果感染第14天,MRV1/TS/2011和MRV3/TS/2013组的树鼩病毒载量、CD_4^+及CD19+细胞数量达峰值,其中经MRV1/TS/2011感染后第1天CD_4^+就有较高表达且数值与对照组相比差异有显著性,CD_8^+细胞数量及IFN-γ表达量在感染后第21天达到峰值。CD_4^+经MRV1/TS/2011感染后表达量更高,CD_8^+经MRV3/TS/2013感染后表达量更高。结论初步得出MRV1/TS/2011及MRV3/TS/2013感染机体后,随病毒载量变化,CD4/CD8/CD19及IFN-γ产生的变化规律:MRV1/TS/2011感染前期主要激起机体体液免疫,CD_4^+细胞发挥主要作用;MRV3/TS/2013可能主要影响机体细胞免疫,体液免疫只在病毒表达量显著升高及感染后期发挥作用,CD_8^+细胞和IFN-γ通过细胞免疫参与抗病毒反应。CD_4^+细胞可能对1型呼肠孤病毒更敏感,而CD19细胞+可能对3型呼肠孤病毒更敏感。对树鼩呼肠孤病毒的感染特征研究和树鼩本身的病毒防范有一定指导意义。; 袁圆王璇张志成李娜王文广匡德宣代解杰; 关键词：免疫应答 CD分子

一种帕金森病树鼩模型的构建方法: 本发明涉及一种帕金森病树鼩模型的构建方法，属于动物模型构建技术领域。该方法是将A53T突变型α‑synuclein‑EGFP腺相关病毒载体给药至树鼩左脑黑质，从而建立帕金森病树鼩模型。在病毒载体给药3个月时，通过行为学实...; 陆彩霞陈柳王文广代解杰李娜仝品芬孙晓梅丁相荣

树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养被引量：4: 2019年; 目的建立适用于树鼩肺成纤维细胞的分离、鉴定和传代培养方法。方法分别采用组织块贴壁培养法和胰酶消化法,分离培养新生树鼩肺成纤维细胞,通过倒置显微镜观察细胞生长情况,用波形蛋白(Vimentin)对分离的成纤维细胞进行免疫荧光鉴定;传代培养并开展冻存复苏实验,采用MTS法绘制细胞生长曲线,以人胚肺二倍体成纤维细胞(KMB-17)作对照。结果通过组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可获取树鼩肺成纤维细胞,细胞主要呈现梭形,波形蛋白免疫荧光鉴定普遍呈阳性,与KMB-17一致。树鼩肺成纤维细胞可连续传代4～5次,经冻存复苏后细胞仍能保持活力,以5×10~4细胞/mL的密度传代,细胞可在3 d左右进入对数生长期。结论组织块贴壁培养法和胰酶消化法均可有效获取树鼩的肺成纤维细胞,可为肺部相关疾病的体外研究提供实验材料。; 王文广匡德宣陆彩霞罕园园李娜仝品芬孙晓梅代解杰; 关键词：树鼩肺成纤维细胞传代培养

树鼩睾丸间质细胞的分离培养及寨卡病毒感染特性的研究: 2022年; 目的建立树鼩原代睾丸间质细胞分离培养方法,探究寨卡病毒(Zika virus,Zikv)对该细胞的感染特性,为Zikv感染导致的睾丸损伤及不育提供研究基础。方法3月龄的雄性树鼩0.4 mL 3%戊巴比妥钠麻醉处死后采集睾丸,采用IV胶原酶和胰蛋白酶联合消化法获得单细胞悬液,通过percoll密度梯度离心结合差异贴壁法对细胞进行纯化,3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSD)对细胞荧光染色鉴定,ELISA检测细胞分泌睾酮的能力;用Zikv感染树鼩睾丸间质细胞,并用对寨卡病毒易感的非洲绿猴肾细胞(Vero)作为对比参照,测定感染不同时间点的细胞及其培养上清液中病毒载量,镜下观察细胞病变,ELISA检测睾酮含量。结果分离培养的睾丸间质细胞经3β-HSD鉴定阳性率高达98%以上,且增殖迅速,能够连续分泌睾酮,第4代睾丸间质细胞在0~24 h和24~48 h睾酮分泌量分别为1.253 ng/mL和1.163 ng/mL;用Zikv感染树鼩睾丸间质细胞,6 h内病毒拷贝数可达2.15×10^(5) copies/mL,且感染48 h后基本丧失睾酮分泌能力,感染第3天可见明显的细胞病变。结论成功建立树鼩睾丸间质细胞的分离培养方法,Zikv可感染树鼩睾丸间质细胞并能导致该细胞睾酮分泌功能缺失,为Zikv入侵生殖系统机制研究提供基础。; 邓伟金亮子奎秀莹王文广李娜仝品芬代解杰; 关键词：树鼩睾丸间质细胞 3Β-HSD 睾酮水平

一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法: 本发明涉及一种通过药物净化和筛选法培育清洁级实验树鼩的方法，属于培育清洁级实验动物技术领域。该方法包括体外寄生虫净化、肠道蠕虫净化、沙门氏菌和志贺氏菌净化、弓形虫筛选、疱疹病毒筛选等步骤。本发明方法简单，利用药物净化与和...; 孙晓梅罕园园匡德宣王文广李娜陆彩霞仝品芬代解杰

CA16感染树鼩肺成纤维细胞模型的建立及其受体SCARB2的表达: 2019年; 目的探讨建立CA16感染树鼩肺成纤维细胞(tree shrew lung fibroblasts,TSLF)实验模型的可行性。方法用肠道病毒CA16感染TSLF,以人肺成纤维细胞(KMB-17)作对照,镜下观察细胞病变情况,间接免疫荧光实验观察病毒蛋白和感染相关受体SCARB2蛋白的表达情况,探针法实时荧光定量PCR检测病毒载量,以β-Actin作内参染料法实时荧光定量PCR检测受体SCARB2基因的相对表达量,结合基因序列比对,分析其与感染的相关性。结果 CA16感染TSLF,可引起明显的细胞病变,免疫荧光实验可见病毒和受体SCARB2蛋白,以100TCID50/10^5 cells的比例感染TSLF可在48 h左右病毒载量达到最高,SCARB2基因有与感染相关的高表达,而其基因序列也与人有较高同源性。结论 CA16可感染TSLF,树鼩SCARB2可参与感染。; 王文广匡德宣李娜陆彩霞罕园园仝品芬孙晓梅代解杰; 关键词：CA16

树鼩尾静脉注射单人操作方法与经验被引量：1: 2018年; 目的介绍树鼩清醒状态下尾静脉注射的单人操作方法与经验,提高尾静脉注射给药成功率。方法采用帆布手套套取和文件夹夹紧手套的方法固定树鼩,左手固定树鼩尾巴,右手持1 m L一次性注射器注射药物。结果本方法操作简单、经济实用、固定效果好、动物依从性好、给药成功率高。结论本方法与其他的尾静脉注射方法比较,有明显的优势。可单人操作,简便快速,省时省力;实验成本低,使用效果好,物美价廉;显著提高了树鼩尾静脉注射给药的成功率。; 何永旺李娟黄俭周一卿赵祥月杨根梦李桢李娜曾晓锋; 关键词：树鼩尾静脉注射实验动物

一种树鼩睾丸间质细胞的分离培养方法及其应用: 本发明涉及一种树鼩睾丸间质细胞的分离培养方法及其应用，该方法包括分离、纯化。本发明成功建立树鼩睾丸间质细胞的分离培养方法，确定了寨卡病毒（Zika virus，Zikv）对树鼩睾丸间质细胞的易感性和病毒增殖特性，为Zik...; 代解杰邓伟罕园园王文广陆彩霞李娜孙晓梅仝品芬

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