吴亚茹 作品数:11 被引量:48 H指数:5 供职机构: 山西医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 山西省回国留学人员科研经费资助项目 山西省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
鸢尾素通过自噬对棕榈酸诱导的INS-1细胞功能和凋亡的影响 被引量:1 2021年 目的:探讨鸢尾素对棕榈酸(palmitic acid,PA)诱导的胰岛β细胞功能和凋亡的影响。方法:培养INS-1细胞,用不同浓度梯度的鸢尾素干预INS-1细胞,根据蛋白结果筛选出最佳鸢尾素干预浓度为1 500 ng/mL。然后将INS-1细胞分为正常组、PA组、PA+1 500 ng/mL鸢尾素组、PA+1 500 ng/mL鸢尾素+雷帕霉素组、PA+1 500 ng/mL鸢尾素+3-MA组。用3.3 mmol/L和16.7 mmol/L的葡萄糖浓度刺激检测干预后胰岛素的分泌水平,Western blot检测自噬相关蛋白p-mTOR、mTOR、p62、LC3Ⅱ、LC3Ⅰ的蛋白水平,用mGFP-GFP-LC3腺病毒转染观察自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果采用SPSS 20.0软件进行统计分析,计量资料以均数±标准差(x±s)表示,多组间差异比较采用单因素方差分析及Turkey HSD检验。结果:(1) PA组LC3Ⅱ/Ⅰ的比值较正常组增高(0.745±0.035 vs. 1.015±0.012,P=0.000),随着鸢尾素干预浓度增加,LC3Ⅱ/Ⅰ的水平较PA组逐渐升高且有统计学意义(I1组1.465±0.028,I2组2.269±0.063,I3组1.858±0.074,I4组2.355±0.074,均P=0.000),鸢尾素浓度为1 500 ng/mL时LC3Ⅱ/Ⅰ的水平最高。(2) PA组INS-1细胞上清液中胰岛素水平在3.3 mmol/L和16.7 mmol/L葡萄糖刺激下较正常组均下降[(0.447±0.067)ng/mL vs.(0.138±0.012)ng/mL,P=0.000;(0.625±0.041)ng/mL vs.(0.245±0.043)ng/mL,P=0.000],鸢尾素干预后胰岛素水平较PA组均升高[(0.138±0.012)ng/mL vs.(0.322±0.041)ng/mL,P=0.001;(0.245±0.043)ng/mL vs.(0.414±0.036)ng/mL,P=0.005]。(3)与正常组相比,PA干预细胞后,自噬体数量增加(2.33±1.53 vs.10.33±1.53,P=0.000),而自噬溶酶体数量无明显变化(2.33±1.53 vs. 3.33±1.53,P=0.939),鸢尾素干预后,自噬体数量和自噬溶酶体数量较PA组均升高(10.33±1.53 vs. 15.67±1.53,P=0.007;3.33±1.53 vs. 12.00±2.00,P=0.001)。(4)与正常组相比,PA干预后细胞凋亡率增加[(11.417±1.297)%vs.(46.507±0.525)%,P=0.000],鸢尾素干预后凋亡率降低[(46.507±0.525)%vs.(33.767±1.083)%,P=0.000]。结� 汪湄湄 刘师伟 段瑞雪 吴亚茹 郭胜慧 卫莹关键词:自噬 棕榈酸 胰岛Β细胞功能 凋亡 医学大数据库的建立与哲学审思 被引量:6 2016年 医疗卫生领域的数据正在呈爆炸式增长,医学与大数据的结合迫在眉睫,为医学发展注入了新的活力。大数据不仅可以预测疾病发生发展,提高早期诊断率,而且能够为患者提供最佳治疗方案,节约医疗成本,同时可以加强慢性病的有效管理,促进疾病转归。此外,大数据技术还引发了医生思维的变革,由传统追求因果性的思维方式转变为更加注重相关性。自主研发的Idata内分泌大数据库正在建立,其不断完善的过程需与哲学思想相结合,旨在实现内分泌代谢性疾病患者资料的有效保存和资源共享,推动整体医学的发展。 刘师伟 段瑞雪 李欣 吴亚茹 安凌王 陈林慧 王媛媛 李乃适 傅葵人脐带间充质干细胞改善2型糖尿病大鼠胰岛素抵抗的作用机制研究 被引量:1 2020年 目的研究旨在评估人脐带间充质干细胞(HUC-MSCs)对2型糖尿病(T2DM)大鼠胰岛素抵抗的治疗作用,并探讨其潜在的分子机制。方法通过高脂高糖饮食10周联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素诱导T2DM大鼠模型,尾静脉输注HUC-MSCs 4周后,测量大鼠空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇等,并进行腹腔葡萄糖耐量试验、腹腔胰岛素耐量试验和高胰岛素-正常血糖钳夹试验,评估各组大鼠胰岛功能及胰岛素抵抗水平,随后通过Western blot检测各组大鼠肝脏脂代谢信号通路腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的蛋白表达水平。结果与T2DM组相比,HUC-MSCs输注可显著降低T2DM大鼠的空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇水平(P<0.01)及腹腔葡萄糖耐量和胰岛素耐量的血糖曲线下面积(P<0.05);高胰岛素-正常血糖钳夹试验发现,HUC-MSCs输注治疗后T2DM大鼠稳态时葡萄糖输注速率较T2DM组明显升高(P<0.01);Western blot实验发现,与T2DM组相比,T2DM+HUC-MSCs组大鼠肝脏组织的p-AMPK/AMPK、p-ACC/ACC蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论人脐带间充质干细胞可能通过激活AMPK/ACC信号通路改善T2DM大鼠的脂质代谢和胰岛素抵抗水平。 郭胜慧 刘师伟 段瑞雪 汪湄湄 吴亚茹 卫莹关键词:2型糖尿病 胰岛素抵抗 人脐带间充质干细胞 Vaspin通过Nrf2/ARE信号通路对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响 目的: 1.探讨Vaspin对高糖高脂培养的INS-1细胞氧化应激水平及细胞分泌能力的影响。 2.探讨Vaspin对高糖高脂培养的INS-1细胞Keap1-Nrf2-ARE信号通路的影响及调节机制。 方法: 培养... 吴亚茹关键词:INS-1细胞 VASPIN 氧化应激 文献传递 丝氨酸蛋白酶抑制剂对棕榈酸诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响及机制 被引量:5 2018年 目的 观察脂肪细胞因子丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)是否通过IRS/PI3K/Akt/Glut信号通路改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗.方法 以棕榈酸(PA)培养3T3-L1脂肪细胞构建胰岛素抵抗模型,分为PA组、PA+ 100 ng/ml Vaspin组、PA+200 ng/ml Vaspin组、PA+400 ng/ml Vaspin组及PA+400 ng/ml Vaspin+Wortmannin(PI3K抑制剂)组.运用2-脱氧-H3-D-葡萄糖掺入法及葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法分别检测细胞葡萄糖摄取和消耗量.以RT-PCR和Westem blot检测胰岛素信号通路中、酪氨酸磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS-1)、Akt、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和Glut-4的mRNA和蛋白表达水平.结果 与PA组相比,随着Vaspin浓度增加,葡萄糖摄取和消耗量逐渐增加(P<0.05),IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平逐渐上升(P<0.05),p-IRS-1/IRS-l、p-Akt/Akt比值逐渐增加,同时Glut-4的mRNA和蛋白表达也相应上调(P<0.05).与400 ng/ml Vaspin干预组相比,PA+400 ng/ml Vaspin+Wortmannin组葡萄糖摄取和消耗量降低,IRS-1和Akt的mRNA和蛋白磷酸化水平下降(P<0.05),p-IRS-1/IRS-1、p-Akt/Akt比值下降,且Glut-4的mRNA和蛋白表达下调(P<0.05).结论 Vaspin通过激活IRS/PI3K/Akt/Glut胰岛素信号通路,改善3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗. 刘师伟 段瑞雪 张佳新 吴亚茹 李欣 郭胜慧 汪湄湄 袁涛 中竹芳 傅葵关键词:VASPIN 胰岛素抵抗 3T3-L1脂肪细胞 维生素D3补充联合规范化降糖方案对初诊2型糖尿病患者胰岛β细胞功能及大血管并发症的影响 被引量:3 2019年 目的检测维生素D3补充联合规范化降糖方案对2型糖尿病(type 2 diabetes,T2DM)患者胰岛β细胞功能及大血管并发症的影响。方法将192例T2DM患者随机分为对照组与观察组各96例,两组均予规范化降糖方案,观察组在此基础上加用维生素D3补充治疗,6个月后比较两组治疗前后体测指标、糖脂代谢指标、胰岛β细胞功能及大血管并发症相关指标。结果治疗6个月后,两组BMI、SBP、TG、FBG、FINS、HbA1c、HOMA-IR较治疗前均降低,HOMA-β升高(P<0.05)。与对照组相比,治疗6个月后观察组血清25(OH)D升高,Vaspin、CRP水平降低(P<0.05),CIMT及其他指标差异无统计学意义,25(OH)D与FBG、FINS、Vaspin、CRP呈负相关,与1PH、ISI呈正相关(P<0.05)。结论维生素D3与T2DM及其大血管并发症密切相关,但尚未发现维生素D3补充可以进一步改善T2DM患者胰岛β细胞功能及其大血管并发症。 刘师伟 刘师伟 段瑞雪 李欣 张佳新 吴亚茹关键词:胰岛细胞功能 大血管病变 VASPIN 2型糖尿病患者血清Asprosin水平及其与代谢指标的相关性研究 被引量:12 2018年 目的:研究2型糖尿病患者血清Asprosin水平变化及其与代谢指标的相关性。方法:收集初诊2型糖尿病患者(type 2diabetes mellitus,T2DM)98例和正常糖耐量人群(normal glucose tolerance,NGT)93例。进一步根据中国超重/肥胖医学营养治疗专家共识(2016年版),以体质量指数(body mass index,BMI)≥28 kg/m2为切点,将上述2组组内分别再分为非肥胖(non-obesity,NOB)和肥胖(obesity,OB)两亚组。测量人体指标、检测相关代谢血生化指标,采用ELISA检测血清Asprosin水平,并通过直线相关性分析、多元线性回归分析对Asprosin水平及其与其他代谢指标的相关性进行统计分析。结果:T2DM组Asprosin水平明显高于NGT组[(352.579±40.742)pg/mL vs.(189.411±32.635)pg/mL,P=0.002]。单因素相关分析显示,T2DM患者血清Asprosin水平与高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)呈负相关(r=-0.447,P=0.000),与空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)、胰岛素抵抗指数(homeostasis model of assessment for insulin resistance index,HOMA-IR)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,HbA1c)呈正相关(r=0.187,r=0.198,r=0.202,r=0.159,均P<0.05)。多元逐步回归分析发现,FBG(β=0.333,P=0.000)、HOMA-IR(β=-0.176,P=0.047)为血清Asprosin的独立影响因素。结论:T2DM组血清Asprosin水平明显高于NGT组,且与FBG、FINS、HOMA-IR、HbA1c呈正相关,与HDL-C呈负相关,其中FBG与HOMA-IR是血清Asprosin水平的独立危险因素。 刘师伟 吴亚茹 段瑞雪 张琦 李欣 张佳新 郭胜慧 汪湄湄关键词:2型糖尿病 肥胖 胰岛素抵抗 Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响 被引量:1 2020年 目的:研究脂肪细胞因子Vaspin对棕榈酸诱导的INS-1细胞自噬水平的影响。方法:培养INS-1细胞,分为正常组:用普通培养基培养24 h;棕榈酸(palmitic acid,PA)组:以0.5 mmol/L PA培养24 h;PA+Vaspin组:先加入320 ng/mL Vaspin预培养2 h,再以0.5 mmol/L PA+320 ng/mL Vaspin共培养24 h;PA+Vaspin+雷帕霉素(rapamycin)组:先以50 nmol/L Rapamycin预培养2 h,再以0.5 mmol/L PA+320 ng/mL Vaspin共培养24 h;PA+Vaspin+3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine,3-MA)组:先以1 mmol/L 3-MA预培养2 h,再以0.5 mmol/L PA+320 ng/mL Vaspin共培养24 h。葡萄糖(3.3 mmol/L和16.7 mmol/L)刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平,Western blot检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、pmTOR、Beclin-1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ及P62蛋白水平,mRFP-GFP-LC3检测自噬流水平,流式细胞仪检测细胞凋亡水平。结果:与正常组相比,PA组INS-1细胞上清液中胰岛素分泌水平在3.3 mmol/L葡萄糖和16.7 mmol/L葡萄糖刺激下均降低[(1.02±0.08)ng/mL vs.(0.54±0.06)ng/mL,P=0.000;(1.15±0.13)ng/mL vs.(0.71±0.05)ng/mL,P=0.000],PA+Vaspin组较PA组升高[(0.76±0.03)ng/mL vs.(0.54±0.06)ng/mL,P=0.001;(0.91±0.04)ng/mL vs.(0.71±0.05)ng/mL,P=0.011];与正常组相比,PA组INS-1细胞p-mTOR与mTOR蛋白比值低(2.04±0.14 vs.1.19±0.09,P=0.000),PA+Vaspin组p-mTOR与mTOR蛋白比值较PA组高(1.51±0.05 vs.1.19±0.09,P=0.005);同时,PA组自噬相关蛋白Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与正常组相比明显增加(0.81±0.07 vs.0.65±0.04,P=0.005;2.35±0.25 vs.1.16±0.11,P=0.000),P62蛋白水平降低(1.04±0.19 vs.0.60±0.08,P=0.000);PA+Vaspin组Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白水平较PA组低(0.58±0.04 vs.0.81±0.07,P=0.001;1.95±0.08 vs.2.35±0.25,P=0.007),P62蛋白增加(0.82±0.03 vs.0.60±0.08,P=0.032);PA组自噬溶酶体数量较正常组多(8.33±1.53 vs.0.33±0.58,P=0.000),Vaspin干预后降低(3.67±1.53 vs.8.33±1.53,P=0.001);同时,PA干预INS-1细胞24 h后细胞凋亡明显增加(7.91±0.50 vs.22.15±2.05,P=0 段瑞雪 刘师伟 常冰梅 吴亚茹 汪湄湄 张佳新 郭胜慧 李欣 张琦关键词:VASPIN 棕榈酸 自噬 胰岛Β细胞功能 Betatrophin与多囊卵巢综合征患者25羟基维生素D3的关系 被引量:6 2017年 目的探讨Betatrophin与多囊卵巢综合征(PCOS)患者的25羟基维生素D3125(OH)D31等代谢指标的关系。方法收集24例PCOS患者及年龄性别匹配的健康对照组20例,测量其身高、体重、腰围、臀围等体测指标,计算体质指数(BMI)和腰臀比。检测25(OH)D3、Cd、空腹血糖、空腹胰岛素等相关代谢血生化指标,计算稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA—IR)值。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清Betatrophin水平,独立样本t检验比较两组之间的差异,直线相关分析研究Betatrophin与体测及生化指标的相关性,多元线性回归分析Betatrophin的影响因素。结果PCOS组Betatrophin水平较健康对照组低[(0.341±0.034)n∥ml比(0.810+0.162)ng/ml,t=4.271,P〈0.001],BMI【(27.691±4.392)kg/m2比(23.310±4.781)kg/m2,t=2.073,P〈O.05]、空腹血糖【(5.950±0.411)mmol/L比(4.883±0.314)mmol/L,t=-2.142,P〈O.051、HOMA-IR[(4.946±0.741)比(3.387±0.397),l=-2.493,P〈0.05】、三酰甘油【(1.510±0.848)mmol/L比(1.037±0.402)mmoPL,t=2.223,P〈O.05】、低密度脂蛋白胆固醇f(3.431±0.479)mmol/L比(2.396±0.435)mmol/L,t=2.433,P〈0.05]较健康对照组高,而高密度脂蛋白胆固醇水平较低『(1.014±0.321)mmol/L比(1.419±0.287)mmol/L,f=2.218,P〈0.051。PCOS患者Betatrophin水平与HOMA—IR(r=0.425,P〈O.05)、25(OH)D3(r=0.577,P〈O.05)和Ca。(r=0.448,P〈0.05)呈正相关,与BMI(r=-0.451.P〈O.05)、三酰甘油(t=0.454,P〈O.05)、LDL.c(t=0.551,P〈0.05)呈负相关。25(OH)D3含量高的组(〉35nmol/L)Betatrophin水平明显高=f:25(OH)D3含量低的组(〈35nmol/L)[(O.539±0.092)nml比(0.199±0.031)n∥ml,f~3.072,P〈O.01]。多元线性回归分析发 刘师伟 李欣 吴亚茹 杜芳 段瑞雪 张佳新 何玉洁 尚慧锋 傅葵关键词:多囊卵巢综合征 胰岛素 Vaspin通过Nrf2/ARE信号通路对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响 被引量:3 2020年 目的:探讨Vaspin对高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激的影响。方法:培养INS-1细胞,分为正常对照组(NC组)、高糖高脂组(HG+PA组)、高糖高脂+80 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V1组)、高糖高脂+160 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V2组)、高糖高脂+320 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V3组)、高糖高脂+640 ng/mL Vaspin组(HG+PA+V4组)。通过DCFH-DA荧光探针染色法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;比色法、酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测氧化应激相关指标;葡萄糖(3.3 mmol/L和16.7 mmol/L)刺激胰岛素分泌实验检测各组胰岛素分泌水平;流式细胞仪检测细胞凋亡水平;Western blot检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)蛋白表达水平。结果:①与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中低糖和高糖刺激后的胰岛素分泌水平均有明显升高(均P<0.05);②与HG+PA组相比,HG+PA+V4组中高糖高脂诱导INS-1细胞中ROS、丙二醛、8-羟基脱氧鸟苷水平明显降低,总抗氧化能力、超氧化物歧化酶水平、谷胱甘肽过氧化物酶水平明显升高(均P<0.05);③流式细胞实验发现,与HG+PA组相比,随着Vaspin浓度增加,高糖高脂干预后INS-1细胞的凋亡水平明显下降(均P<0.05);④Western blot结果表明,胞浆中Nrf2表达水平随着Vaspin浓度的增加呈上升趋势,胞核Nrf2表达水平仅在HG+PA+V4组较HG+PA组升高(0.798±0.080 vs.0.579±0.065,P=0.039)。结论:Vaspin可以通过激活Nrf2/抗氧化反应原件(antioxidant response element,ARE)信号通路,改善高糖高脂诱导的INS-1细胞氧化应激损伤,减少细胞凋亡,增加胰岛素分泌水平。 吴亚茹 刘师伟 段瑞雪 汪湄湄 张佳新 郭胜慧 卫莹 李欣关键词:VASPIN 氧化应激 胰岛细胞功能