陈筝
- 作品数：5 被引量：66H指数：3
- 供职机构：中国预防医学科学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 我国云南德宏地区HIV感染者HIV毒株膜蛋白基因的序列测定和分析被引量：57
- 1994年
- １９９０年和１９９３年，从云南瑞丽县感染ＨＩＶ的静脉注射毒品者中采血，分离白细胞，用ＰＣＲ方法扩增ＨＩＶ１膜蛋白基因（ｅｎｖ）并克隆。核苷酸序列分析由手工和ＡＢＩ公司ＤＮＡ序列分析仪进行。将云南瑞丽ＨＩＶ毒株的ｅｎｖＶ３－Ｖ５区序列与国际各亚型同源序列作比较，９０年和９３年ＨＩＶ毒株与Ｂ亚型的同源性均为最高。这表明云南瑞丽流行的ＨＩＶ毒株属国际Ｂ亚型。经分析发现，在９０年的１０个毒株的序列中，有８个是典型的Ｂ亚型序列，即Ｖ３环顶端的四肽是ＧＰＧＲ，占８０％；而在９３年的毒株中，该型序列只见于２１个样品中的１２个，比例下降到５７％。与此同时，Ｖ３环顶端四肽为ＧＰＧＱ的Ｂ亚型中的泰国基因型序列，则由９０年的１０％（１／１０）上升到９３年的２９％（６／２１）。进一步分析编码ＧＰＧＲ最末一个精氨酸密码子发现，ＣＧＡ与ＡＧＡ比例由９０年的１：７上升到９３年的５：７。由于ＣＧＡ比ＡＧＡ更接近编码谷氨酰胺（Ｑ）密码子ＣＡＡ，这种以ＧＰＧＱ为特征的泰国基因型Ｂ亚型毒株，在该地区还可能进一步增高。这些数据提示，当地流行的ＨＩＶ毒株Ｖ３环顶端的四肽在过去几年中由ＧＰＧＲ向ＧＰＧＱ漂移，其原因尚不清楚。
- 邵一鸣赵全壁王斌陈筝苏玲曾毅赵尚德张家鹏段一娟
- 关键词：艾滋病毒毒株膜蛋白基因
- 套式聚合酶链反应在HIV-1检测中的应用被引量：3
- 1993年
- 根据HIV-1 gag.pol和env基因序列设计了套式聚合酶链反应(nesled polymerasechain reaction,nPCR)引物。将外周血单个核细胞裂解液先用外侧引物扩增,其产物再经内侧引物扩增,直接走凝胶电泳判定结果。nPCR的敏感性。较常规PCR高100～1000倍,可检测到0.5fg质粒DNA和50μ1HIV-1感染者外周血样中的HIV基因。用本法检测63名HIV-1感染者全为阳性,而61名健康人和可疑者均为阴性,后者经追踪检测抗体排除了HIV-1感染。实验证明,nPCR是一种敏感性极高、特异性很强、操作简便易行的HIV-1基因检测技术。它已经在早期诊断和外周血病毒含量检测中发挥了重要作用,而且有着更广阔的应用前景。
- 邵一鸣陈筝王斌曾毅赵尚德张作儒
- 关键词：套式聚合酶链反应艾滋病毒
- 从四名免疫缺陷病毒（HIV）感染者分离HIV被引量：3
- 1994年
- 为４名ＨＩＶ感染者（３名援外劳工、１名涉外人员）采血，分离外周血单个核细胞（ＰＭＣ），分别与正常供血者ＰＭＣ和Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞（传代人Ｔ细胞）共培养分离ＨＩＶ。以逆转录酶测定（ＲＴ）为检测终点，再经ＨＩＶ１－Ｐ２４抗原ＥＬＩＳＡ和ＨＩＶ１Ｐｏｌ和Ｅｎｖ基因引物聚合酶链反应（ＰＣＲ）证实并鉴定分离株及型别。共培养后５～６周，ＲＴ值有一高峰，７～８周后下降。ＨＩＶ１─Ｐ２４ＥＬＩＳＡ结果与ＲＴ结果大致相同，但不完全一致，ＲＣＲ可验证ＲＴ结果。比较ＰＭＣ和Ｊｕｒｋａｔ－ｔａｔ细胞，ＰＭＣ用于分离ＨＩＶ更为敏感。ＨＩＶ阳性的共培养细胞上清液可感染新细胞，但只能传至５代，其病毒容易丢失。目前正在改变共培养条件，用更敏感的方法提高病毒滴度。
- 赵永森邵一鸣陈筝赵全壁曾毅张作儒赵鸿如
- 关键词：艾滋病毒
- 云南瑞丽静脉药瘾人群HIV1感染者毒株env基因V3区序列测定研究被引量：4
- 1998年
- 为了解云南瑞丽静脉药瘾人群HIV1感染者毒株的分子流行病学特征 ,运用套式聚合酶链反应 (nestedPCR)对来自云南静脉药瘾人群的 16株HIV1env基因V3区进行扩增 ,并对扩增片段进行DNA序列测定和分析。结果显示 ,与本地区共享序列相比 ,16株HIV1膜蛋白V3区氨基酸序列的株间变异为 0 %～ 2 3% ,平均为 7%。HIV1云南株膜蛋白V3区氨基酸共享序列与HIV1SF2株及美欧株共享序列同源性在 90 %以上 ,而与海地、日本及非洲等地的代表毒株同源性较低。结果表明 ,在进化上这16株HIV1毒株间有非常密切的关系。这一地区的流行毒株在这一时期以美欧株、HIV1SF2株及其衍生株为主。
- 王斌鲁晓晴路永波邵一鸣陈筝赵全壁曾毅
- 关键词：静脉药瘾者分子流行病学HIV1
- 云南瑞丽长期静脉吸毒人群人免疫缺陷病毒1型感染者毒株env V3区序列测定
- 1996年
- 人免疫缺陷病毒1型(HIV-1)gp120 V3区与HIV的免疫中和、免疫逃避、感染细胞间的融合及病毒的细胞嗜性等有密切关系。不同毒株间的V3区氨基酸变异可达50%以上。
- 王斌邵一鸣陈筝赵全壁苏玲韩峰曾毅
- 关键词：人免疫缺陷病毒HIV-1V3
