贺钰磊
- 作品数：17 被引量：99H指数：7
- 供职机构：中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省卫生厅中医药科研基金国家教育部博士点基金更多>>
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- HMGB1基因沉默对阿霉素诱导K562／A02细胞凋亡增敏作用的研究被引量：7
- 2008年
- 目的探讨高迁移率族蛋白1（HMGB1）基因沉默对白血病细胞耐药逆转的作用。方法将HMGB1基因特异性干扰RNA（HMGB1 siRNA）导入K562／A02细胞中，通过Western blot和RT—PCR方法检测HMGB1基因在转染前后的表达；WST8法检测阿霉素（ADM）对转染前后K562／A02细胞的半数抑制浓度（IC50）；流式细胞术检测凋亡细胞百分率；Western blot检测线粒体促凋亡蛋白Smac／DIABLO的释放：采用caspase活性定量检测试剂盒分析caspase-3的活性。结果①与未经处理的K562／A02细胞组相比，转染HMGB1 siRNA的K562／A02细胞组HMGB1 mRNA和蛋白水平分别下降86％和71％；②HMGB1基因沉默使K562／A02细胞对ADM的药物敏感性增强，其IC50值从转染前的（4．83±0.08）μg／ml降低到（1．33±0．10）μg／ml，并在ADM浓度为1μg／ml和5μg／ml时，细胞凋亡百分率分别增加27％、32％；③HMGB1基因沉默可促进ADM所致Smac／DIABLO从线粒体向胞浆释放。并增加caspase-3的活性。结论HMGB1基因沉默能明显增加K562／A02细胞对ADM的敏感性，逆转K562／A02细胞对ADM耐药。
- 谢岷康睿俞燕朱珊贺钰磊许望琼唐道林曹励之
- 关键词：细胞凋亡
- HMGB1基因沉默对阿霉素诱导K562/A02细胞凋亡增敏作用的研究
- 目的探讨高迁移率族蛋白1（HMGB1）基因沉默对白血病细胞耐药逆转的作用。方法将HMGB1基因特异性干扰RNA（HMGB1 siRNA）导入K562/A02细胞中,通过Western blot和RT-PCR法检测HMGB...
- 谢岷俞燕朱珊贺钰磊许望琼曹励之
- 关键词：细胞凋亡基因沉默HMGB1K562/A02阿霉素增敏作用
- 文献传递
- 加味补肝汤对实验性糖尿病大鼠坐骨神经NGF表达的影响被引量：18
- 2007年
- 目的研究加味补肝汤对实验性糖尿病大鼠周围神经病变的防治作用。方法以链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病模型。分别于治疗后4周、8周2个时间点处死大鼠,应用化学比色法测定血清中丙二醛(MDA)的含量;用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)半定量检测坐骨神经中神经生长因子(NGF)蛋白和mRNA的表达。结果①模型组4周、8周大鼠血清中MDA水平明显高于同期正常对照组(P<0.01),随病程的延长模型组大鼠血清中MDA水平逐渐增加,与同期模型组相比,加味补肝汤能降低血清中MDA水平;②免疫组化及RT-PCR检测显示:在4周、8周模型组坐骨神经中NGF的表达较同期正常对照组明显降低(P<0.01),经加味补肝汤和牛磺酸干预后其表达均较同期模型组明显增强(P<0.05),而加味补肝汤优于牛磺酸,在8周时两组比较差异显著(P<0.05)。结论加味补肝汤对实验性糖尿病大鼠周围神经病变具有一定的防治作用。
- 叶仁群陈泽奇李玉红贺钰磊林国彬谢嘉嘉
- 关键词：加味补肝汤实验性糖尿病坐骨神经神经生长因子
- 高迁移率族蛋白1对阿霉素诱导的白血病K562细胞凋亡的影响被引量：9
- 2008年
- 背景与目的:高迁移率族蛋白1(high mobility group box1,HMGB1)作为核DNA结合蛋白参与稳定染色质结构与功能和基因转录调控。近年研究发现,细胞内外HMGB1与多种肿瘤(例如,乳腺癌、结肠癌、黑素瘤)增殖和转移有密切关系,在多种实体瘤组织和未成熟细胞中表达丰富。本研究的目的是探讨转染HMGB1基因对阿霉素(adriamycin,ADM)诱导的白血病K562细胞凋亡的影响,旨在进一步阐明HMGB1在儿童白血病中的分子作用机制。方法:将HMGB1基因真核表达载体pcDNA3.1-HMGB1转染至K562细胞,构建HMGB1基因高表达的K562细胞。Western blot和RT-PCR(reverse transcription-polymerase chain raction)法检测基因转染前后K562细胞中HMGB1蛋白及mRNA的表达水平;WST8法检测ADM对转染前后细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测和计算凋亡细胞百分率;Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2的蛋白表达;采用Caspase活性定量检测试剂盒分析Caspase-3和Caspase-9的活性。结果:与转染空载体的K562细胞相比,转染HMGB1基因的K562细胞HMGB1 mRNA表达水平增加85%,蛋白表达水平增加56%。HMGB1基因过表达降低了K562细胞对ADM的药物敏感性,使ADM的IC50从转染前的(0.06±0.00)μg/mL增加到(3.46±0.06)μg/mL,并在ADM浓度为1μg/mL时凋亡细胞百分率下降31%。HMGB1基因过表达抑制了ADM所致K562细胞Bcl-2蛋白表达水平下降。ADM处理细胞12h和24h后,转染HMGB1基因的K562细胞的Caspase-3和Caspase-9活化明显受到抑制(1.55±0.06vs.2.55±0.06,1.86±0.10vs.2.85±0.06;1.40±0.08vs.2.03±0.05,1.55±0.06vs.2.22±0.05,P值均≤0.05)。结论:HMGB1高表达可通过调节Bcl-2蛋白水平和Caspase-3及Caspase-9活性来抑制阿霉素诱导的白血病K562细胞凋亡。
- 俞燕谢岷贺钰磊许望琼朱珊曹励之
- 关键词：HMGB1白血病K562细胞阿霉素基因重组
- 牛磺酸对糖尿病大鼠周围神经病变的保护作用被引量：11
- 2006年
- 目的研究牛磺酸对糖尿病大鼠坐骨神经结构、功能以及神经生长因子mRNA表达的影响。方法54只雄性Wistar大鼠随机分为模型组、牛磺酸组和正常对照组,每组各18只。大鼠于禁食12h后,一次性腹腔注射1%链脲佐菌素诱导制备糖尿病大鼠模型;72h后尾静脉采血测定血糖水平,>16.7mmol/L者纳入实验。模型制备后第8周末于光学显微镜和电子显微镜下观察坐骨神经形态改变。同时行逆转录聚合酶链反应半定量分析神经生长因子mRNA含量;化学比色法检测血清丙二醛含量;采用MS302多媒体生物信号系统分别记录模型制备后第4周、8周时大鼠坐骨神经运动神经传导速度。结果(1)与模型组相比,牛磺酸对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠的体质量和血糖水平无明显改善(P>0.05)。(2)与正常对照组相比,模型组和牛磺酸组大鼠在注射链脲佐菌素后第8周血清丙二醛水平明显升高(均P<0.01),但牛磺酸组低于模型组(P<0.01)。(3)与正常对照组相比,模型组大鼠坐骨神经运动神经传导速度在制模后第4周、8周明显减慢(均P<0.01);同期牛磺酸组与模型组间差异亦有显著性意义(均P<0.05)。(4)病理观察显示,模型组和牛磺酸组大鼠在注射链脲佐菌素后第8周均表现为明显的损伤反应,但牛磺酸组病变程度较轻。(5)与正常对照组相比,注射链脲佐菌素后第8周模型组大鼠神经生长因子mRNA表达水平显著下降(P<0.01),牛磺酸组表达水平高于模型组(P<0.01)。结论牛磺酸对糖尿病周围神经病变的防治作用不是直接通过降低血糖水平,而可能是通过有效清除自由基,减轻脂质过氧化,上调神经生长因子mRNA表达而改善神经损伤实现的。
- 叶仁群陈泽奇贺钰磊李玉红
- 关键词：糖尿病神经病变牛磺酸
- 加味补肝汤对糖尿病大鼠背根节细胞凋亡的影响被引量：5
- 2008年
- 目的观察加味补肝汤对糖尿病大鼠背根节细胞凋亡的影响,探讨其神经保护作用机制。方法以链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)诱发糖尿病模型。分别给药后4、8周处死大鼠,应用化学比色法测定血清中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;用免疫组织化学法和脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法分别检测背根节细胞活化半胱天冬酶-3(Caspase-3)的蛋白表达以及细胞凋亡。结果(1)造模后4周、8周模型组大鼠血清中MDA水平明显高于同一时间点正常组,差异具有统计学意义(P<0.01),而GSH水平明显低于同一时间点正常组,差异具有统计学意义(P<0.01)。随病程的延长大鼠血清中MDA水平逐渐增加,而GSH水平逐渐降低。与同一时间点模型组相比,加味补肝汤能降低血清中MDA水平,提高GSH水平,差异具有统计学意义(均P<0.05);(2)在正常组大鼠背根节细胞中未见活化的Caspase-3的蛋白表达和细胞凋亡,模型组大鼠上述表达均增加,加味补肝汤干预后其表达均较同一时间点模型组表达明显减少,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论加味补肝汤抑制Caspase-3的活化,减少细胞凋亡,可能与调节机体内的氧化应激状态有关,具有良好的抗氧化作用,从而达到神经保护作用。
- 叶仁群陈泽奇熊丽丽李玉红贺钰磊林国彬凌江红申定珠
- 关键词：加味补肝汤糖尿病背根节细胞凋亡熟地白芍
- WAVE1在K562白血病细胞侵袭中的作用及机制研究
- WASP家族富含脯氨酸同源蛋白1(WASP-family verprolinhomologous protein1，WAVE1)为近年来发现的新型肌动蛋白调节蛋白，在肌动蛋白聚合和细胞骨架重排中发挥重要作用。近年研究发现...
- 贺钰磊
- 关键词：白血病WAVE1细胞侵袭基质金属蛋白酶2K562细胞系肿瘤侵袭
- 儿童急性髓细胞性白血病WAVE1基因对耐药相关基因表达影响的研究被引量：2
- 2010年
- 目的探讨儿童急性髓细胞性白血病（AML）中WASP家族Verprolin同源蛋白1（WAVEl）基因参与P糖蛋白（P—gP）、多药耐药相关蛋白1（MRP1）、肺耐药相关蛋白（LRP）、乳腺癌耐药蛋白（BCRP）表达和调控的机制。方法将52例患儿依据是否在随访期内持续缓解（CCR）分为难治／复发组和缓解组，应用实时定量PCR（RQ-PCR）法和蛋白印迹（Western blot）分别检测52例AML患儿治疗前及疾病发展过程中骨髓单个核细胞（BMMCs）中WAVE1、P—gP、MRP1、LRP及BCRP蛋白和基因mRNA的表达水平。将PCDNA3．1-WAVEl真核表达质粒转染HL60细胞构建WAVEl高表达HL-60细胞，将WAVEl基因的特异性小片段干扰RNA（WAVEl siRNA）转染HL60／ADR构建WAVE1低表达HL60／ADR细胞；Western blot和RQ—PCR法检测基因转染前后白血病细胞系grAVE1、MRP1及BCRP蛋白及基因的表达水平。结果①复发／难治组病例的WAVE1及耐药相关基因水平明显高于缓解组患儿WAVE1基因表达水平（P〈0．05）；②同一患儿初治及复发时的WAVE1基因水平明显高于缓解期表达水平（P〈0．05）；③与HL60细胞相比较，HL60／ADR细胞WAVE1mRNA及蛋白表达水平增加3．53倍及95％；④转染WAVE1后HL60细胞系MRP1 mRNA和蛋白表达水平分别增加16．54倍、129％，BCRPmRNA和蛋白表达水平分别增加4．93倍及96％，而转染WAVE1 siRNA的HL60／ADR细胞MRP1 mRNA和蛋白的表达水平为干扰前的0．11倍及43％，BCRPmRNA和蛋白的表达水平为转染前的0．14倍及71％。结论WAVE1与儿童AML的病程及预后相关，参与了髓系白血病细胞多药耐药的形成并可影响MRP及BCRP1等多个重要的耐药相关基因的表达和作用。
- 杨明华赵明一贺钰磊汪敏慧王卓谢岷吴秀山曹励之
- 188例急性淋巴细胞性白血病患儿的疗效及预后分析被引量：6
- 2008年
- 目的对中南大学湘雅医院、广西医科大学第一附属医院急性淋巴细胞白血病（ALL）患儿的治疗结果及影响无事件生存率（EFS）的因素进行分析。方法所有病例均采用中华医学会儿科学分会血液学组1998年第二次修正的小儿ALL诊疗建议（简称荣成方案）化疗，采用Kaplan-Meier方法评估依从治疗的188例患儿EFS，组间患儿EFS差异用Log-rank检验，用COX比例风险模型分析独立因素对EFS的影响。结果374例接受诱导治疗儿童的完全缓解（CR）率为93．6％（354例），全程依从治疗的188例ALL的5年EFS为（68．1±5．6）％，标危、高危组5年EFS分别为（75．2±6．0）％、（47．6±11．6）％；总复发率为10．6％，复发的中位时间为13个月；188例患儿中共有29例死亡，死亡率15．4％；化疗相关死亡13例（7．0％）。危险度分组、t（9；22）／bcr-abl融合基因和白细胞计数为独立的不良预后因素。结论两家医院通过荣成方案治疗儿童ALL的总EFS接近70％，需要进行更加详细的危险因素评估和分组，降低治疗相关死亡率，提高儿童ALL治疗的依从性，以进一步提高EFS。
- 杨明华贾文广曹励之贺钰磊廖宁陈国力罗建明许望琼杨静
- 关键词：无病生存
- 牛磺酸抑制糖尿病大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡被引量：6
- 2007年
- 目的观察牛磺酸对糖尿病大鼠坐骨神经雪旺细胞凋亡的影响,探讨其神经保护作用机制。方法用链脲佐菌素(STZ)诱发糖尿病模型。牛磺酸治疗8周后应用化学比色法测定坐骨神经组织中丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量;用免疫组化法、RT-PCR和TUNEL法检测坐骨神经中活化的caspase-3蛋白和mRNA表达,以及雪旺细胞凋亡的情况。结果牛磺酸能降低坐骨神经中MDA水平,提高GSH水平(均P<0.05)。在正常鼠坐骨神经中,未见活化的caspase-3蛋白表达和细胞凋亡;Caspase-3 mRNA有极少量表达。模型对照组上述表达均增加,牛磺酸干预后其表达均较模型组表达明显减少(P<0.05)。结论牛磺酸抑制caspase-3 mRNA的转录与caspase-3的活化,减少细胞凋亡,与调节机体内的氧化应激状态有关,从而达到神经保护作用。
- 叶仁群陈泽奇林国彬李玉红贺钰磊凌江红申定珠
- 关键词：牛磺酸糖尿病周围神经病变细胞凋亡
