林仲翔
- 作品数:40 被引量:122H指数:7
- 供职机构:北京大学肿瘤医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域:医药卫生生物学更多>>
- 转移相关分子链Actin-CD44-MMP-2在乳腺癌转移实验中的改变被引量:1
- 2011年
- 目的研究乳腺癌转移相关的分子机制及抑制体内外转移的作用和机制。方法选择高、低转移性乳腺癌细胞系BICR-H1和MCF-7,用明胶底物非变性电泳分析法、Western blot和免疫荧光染色等方法,观察肌动蛋白、CD44和基质金属蛋白酶2分子链(ACM)成员分子的定性与定位关系。利用荧光标记肿瘤鸡胚尿囊膜(CAM)模型,血管内注射顺铂或MMP-2 C末端PEX融合蛋白,利用荧光显微镜直接观察鸡胚肺转移抑制情况与癌细胞的ACM水平。结果高转移的BICR-H1细胞ACM分子链呈高表达,分子定位相互关联。低转移性的MCF-7细胞呈低表达或无表达。体外实验中,顺铂和PEX分别抑制了CD44和MMP-2的表达。体内实验中,5~30μg顺铂能够抑制BICR-H1和MCF-7肿瘤的体内生长,呈剂量依赖性。30μg顺铂使乳腺癌BICR-H1细胞体内转移克隆数下降到(8±6)个[对照组为(30±15)个],而同剂量PEX可以完全抑制其体内转移。结论 ACM分子链表达与乳腺癌的转移性密切相关。顺铂和PEX分别通过封闭ACM分子链的环节,使CD44或MMP-2表达抑制,从而抑制乳腺癌细胞的体内外生长和转移。
- 赵威韩海勃林仲翔张志谦
- 关键词:乳腺癌肌动蛋白CD44MMP-2
- 三磷酸腺苷对胃癌细胞Na~+-K~+-三磷酸腺苷酶活性和c-myc基因表达的影被引量:6
- 1995年
- 三磷酸腺苷对胃癌细胞Na ̄+-K ̄+-三磷酸腺苷酶活性和c-myc基因表达的影响吕桂芝,林仲翔,孟松娘,高燕,周立新,徐光炜三磷酸腺苷(ATP)对多种癌细胞的增殖均具有明显的抑制作用[1],本实验应用电镜细胞化学和免疫细胞化学方法证实了ATP抑制人胃...
- 吕桂芝林仲翔孟松娘高燕周立新徐光炜
- 关键词:三磷酸腺苷酶C-MYC基因表达
- ATP抑制人胃腺癌(MGC-803)细胞增殖的机理研究(简报)被引量:6
- 1994年
- ATP已是临床治疗心血管疾病的常用药,目前国内外对ATP的抗癌作用也十分重视。我们曾报道过ATP对人胃癌细胞(SGC-7901、MGC-803)增殖的抑制效应,Rapaport和Fang等也相继报道ATP对小鼠结肠移植癌及人前列腺癌的增殖有抑制作用,但对ATP抗癌作用的机理除了报道膜上嘌呤受体的改变和cAMP第二信使调节作用外,其他方面未见报道。本实验研究了ATP抑制MGC-803细胞增殖与细胞周期时相分布、间隙连接通讯功能、c-Ha-ras基因表达之间的关系,为临床应用ATP治疗癌症提供了实验依据。
- 吕桂芝林仲翔张志谦周立新徐光炜
- 关键词:腺苷三磷酸胃肿瘤抗癌药药理
- 整合素在ATP对巨噬细胞活化过程中信号调节作用的研究
- 活化的巨噬细胞在机体免疫体系中发挥重要作用,研究巨噬细胞的活化对了解巨噬细胞生理功能和提高机体的免疫水平有重要理论意义和应用价值。我们曾证实过ATP对小鼠腹腔巨噬细胞有明显的促吞噬功能的作用。吞噬功能依赖于巨噬细胞的活化...
- 吕桂芝林仲翔
- 关键词:巨噬细胞活化小鼠腹腔巨噬细胞信号调节整合素ATP
- 文献传递
- MMP_2和MMP_9在损伤血管中的原位表达被引量:4
- 1998年
- 目的探讨基质金属蛋白酶在血管损伤后的改变及可能作用。方法在大鼠胸主动脉球囊损伤的模型上,应用原位杂交的方法,观察了MMP2、MMP9在血管损伤后不同时间的表达情况。结果MMP2在球囊损伤后第三天开始表达,第7天达高峰,第14天未见表达,MMP9从第3天开始表达,并一直持续到14天,但第14天只有新生内膜部位有少量表达。结论MMP2、MMP9在血管损伤后,异常表达,可能与平滑肌细胞迁移、新生内膜形成及血管重塑有关。
- 吴永全汪丽蕙胡大一张晓菲张文军林仲翔
- 关键词:细胞外基质再狭窄血管成形术
- α-catenin/GST融合蛋白的原核表达及其多克隆抗体制备被引量:2
- 2001年
- 目的 制备α catenin多克隆抗体 ,为深入研究其功能和探讨其与肿瘤等疾病的相关性提供工具。方法 PCR扩增编码人α cateninC 端 45 5个氨基酸的DNA片段 ,DNA重组入原核表达质粒pGEX 4T 3,转化大肠杆菌JM10 9菌株 ,异丙基 β D硫代半乳糖苷 (IPTG)诱导产生GST α catenin融合蛋白。GST Sepharose亲和层析纯化可溶性融合蛋白 ,免疫新西兰白兔 ,制备抗血清。通过ELISA、免疫荧光细胞化学和SP免疫组织化学法鉴定血清特异性和效价。 结果 成功地构建了pGEX 4T 3 α Cat表达载体 ,转化JM10 9后可高效表达融合蛋白GST α catenin(α Cat)。免疫兔产生的α Cat多抗可特异检测人体组织和细胞中α Cat表达及定位情况。 结论 α catenin抗体效价高 ,特异性强 ,适合免疫组织化学。
- 马忠良王冰晶林仲翔林本耀张志谦
- 关键词:Α-CATENIN融合蛋白多克隆抗体GST
- 三磷酸腺苷对人横纹肌肉瘤细胞系诱导分化作用的研究被引量:2
- 1996年
- 为了探讨三磷酸腺苷(ATP)对人横纹肌肉瘤细胞增殖和分化的影响,用ATP作用于人横纹肌肉瘤细胞亚系(RDL6)细胞,观察到ATP可抑制RDL6细胞的增殖,使其生长速度明显减慢,作用第5d时增殖抑制率为81%,流式光度术检测;观察到ATP作用的RDL6细胞S期的细胞数明显增多,说明细胞停滞在S期,用罗氏黄荧光染料传输法证实,ATP有恢复RDL6细胞间隙连接通讯功能的作用。用免疫荧光细胞化学方法观察到经ATP处理后的RDL6细胞间隙连接蛋白基因的表达明显增强。用肌专一蛋白荧光染色法也证明了ATP促进RDL6细胞的肌专一蛋白表达;出现肌丝肌管的分化。这些结果表明ATP不仅抑制人横纹肌肉瘤细胞的增殖,而且诱导其分化,是有效的促分化性抗癌药物。本文讨论了增殖分化偶联与间隙连接蛋白基因(connexin43。
- 吕桂芝林仲翔
- 关键词:腺苷三磷酸人横纹肌肉瘤
- 横纹肌肉瘤逆转分化细胞模型研究被引量:1
- 1995年
- 作者观察到人横纹肌肉瘤RD系细胞的恶性表型明显,细胞增殖快、增殖与分化的关系异常、肌分化阻断、细胞通讯功能缺陷、间隙连接基因Cx43转录抑制。用单细胞克隆分离技术和Cx4-3cDNA转染方法获得RD细胞亚系,从中选出表型差别明显的RDL6、RDL3和RDL6/C-4三个亚系进行生物学特性分析比较。结果表明三个亚系在细胞增殖速度、增殖与分化偶联关系、肌分化程度、cx43基因功能性表达和原癌基因c-myc、Ha-ras、c-met表达方面有明显差别,可以作为研究RD逆转分化的细胞模型。作者对RD逆转分化的阶段性标志、意义及有关检查方法的应用价值进行了讨论。
- 林仲翔张志谦韩亚玲
- 关键词:横纹肌肉瘤肿瘤细胞细胞分化肉瘤
- 胃癌钙粘蛋白亚型变异表达与连接素下调相关的观察
- 目的:钙粘蛋白是实体组织主要的细胞粘合分子,不同亚型钙牯蛋白的表达调节着细胞粘合、识别和迁徙,决定组织类型的发育与维持。细胞间隙连接通讯(GJIC)及间隙连接基因(Cx)的功能表达有赖于钙粘蛋白对细胞粘合与识别的调节,二...
- 李金平张志谦宁涛柯杨林仲翔
- 关键词:钙粘蛋白胃癌细胞
- 文献传递
- 高转移人肺癌表型去恶化研究─一细胞通讯、细胞骨架和癌基因、抑癌基因的相关变化被引量:16
- 1994年
- 高转移人肺巨细胞癌PG细胞恶性表型明显。以人胚肺细胞为对照,荧光染料标记示踪法表明,PG的间隙连接通讯功能缺陷;免疫荧光染色显示微管解聚;荧光鬼笔环肽染色显示微丝网架破坏。分子杂交结果表明,PG细胞有c-mycDNA扩增和c-Ha-ras、c-myc基因高表达,抑癌基因P53mRNA水平低于正常。用钙调蛋白拮抗剂CDZ(100~200nmol/L)和中药L2(3~13mg/ml)分别处理PG,细胞增殖受到抑制,表型向正常分化,细胞通讯功能再现,微管网架恢复。但只有L2能促进微丝骨架恢复,抑制软琼脂内的集落形成,并使c-myc扩增减弱和mRNA水平下降,P53表达升高。
- 张志谦林仲翔吕有勇刘叙仪吴秉铨
- 关键词:致癌基因细胞骨架