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张大为: 作品数：41 被引量：57H指数：4; 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>; 发文基金：南京医科大学科技发展基金江苏省自然科学基金国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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EB病毒潜伏膜蛋白1胞外区融合蛋白的表达及其在血清学检测中的应用: 鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma，NPC)是鼻咽上皮来源的恶性肿瘤，在我国南方具有很高的发病率，对NPC的血清学和组织活检及EB病毒(Epstein－Barr Virus,EBV)的基因表达检测都...; 张大为; 关键词：血清学组织活检 EB病毒; 文献传递

人源抗鼻咽癌LMP1胞外区抗体Fab-丝裂霉素C免疫毒素的制备及其靶向治疗的实验研究: 陈仁杰朱进冯振卿张大为; 鼻咽癌是来源于鼻咽上皮的高度恶性肿瘤，肿瘤进展极易侵犯颅底等重要结构，并较早发生颈部淋巴结转移和远处转移。鼻咽癌表现为种族和地区分布的特点，是中国十大高发恶性肿瘤之一，其发病率为20/100，000，已引发严重健康问题。...; 关键词：; 关键词：鼻咽癌

第三代LMP1 CAR-T细胞的制备方法及其应用: 本发明利用基因工程技术，以具有高亲和力的全人源抗LMP1 Fab为模板，构建靶向LMP1的嵌合抗原受体的胞外区LMP1 scFv段。重组LMP1 CAR的胞外区LMP1 scFv段与信号肽CD8α、跨膜区CD8<Sup>...; 陈仁杰冯振卿朱进唐奇陈渊张舒张大为; 文献传递

第三代LMP2A CAR-T细胞的制备方法及其应用: 本发明利用基因工程技术，以具有高亲和力的全人源抗LMP2A Fab为模板，构建靶向LMP2A的嵌合抗原受体的胞外区LMP2A scFv段。重组LMP2A CAR的胞外区LMP2A scFv段与信号肽CD8α、跨膜区CD8...; 陈仁杰冯振卿朱进唐奇陈渊张舒张大为; 文献传递

人源抗Met基因工程抗体scFv的改造与特性分析: 2009年; 目的:将已制备的抗Met单链抗体基因与人IgGFc基因片段融合,表达有活性的融合蛋白分子,以增强单链抗体的可溶性。方法:从人淋巴细胞提取总RNA,经RT-PCR扩增并制备人IgG的Fc基因片段,并克隆于已构建好的pBAD-scFv原核表达载体中,转化大肠杆菌Top10,经阿拉伯糖诱导表达融合蛋白scFv-Fc。所表达的可溶性蛋白经亲和层析纯化、SDS-PAGE、Westernblot分析鉴定,并用ELISA检测抗体效价。结果:序列分析表明重组质粒pBAD-scFv-Fc基因序列正确;SDS-PAGE分析表明,scFv-Fc融合蛋白分子量为60ku,且为可溶性蛋白;该蛋白经过His亲和层析纯化、ELISA检测,结果表明,该融合蛋白能够与抗原分子Met特异性结合。结论:改造后的抗体融合蛋白scFv-Fc能与人Met特异性结合,增加了抗体蛋白溶解度,有利于抗体的大量制备。; 熊林张爱霞李芸茜张大为曹伯良朱进唐荣才; 关键词：MET 基因工程抗体融合蛋白

EB病毒潜伏膜蛋白1胞外区融合蛋白的表达及纯化被引量：14: 2008年; 目的:在大肠杆菌中表达EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)胞外肽段与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合蛋白,并用该融合表达蛋白检测EB病毒相关鼻咽癌(NPC)患者血清中的特异性抗体。方法:用BamHⅠ和EcoRⅠ将含LMP1胞外区重组基因的质粒pMD18-LMP1双酶切后,克隆到pGEX-4T-2中。重组质粒经酶切鉴定、核酸序列分析后转化大肠杆菌BL21(DE3),以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达融合蛋白,表达的蛋白经谷胱甘肽S-转移酶柱亲和层析纯化,纯化的蛋白经Westernblot法检测鉴定。结果:重组表达质粒经酶切鉴定为阳性,核酸序列分析正确。SDS-PAGE和Western blot结果显示表达的重组蛋白分子质量约为32.2ku,此抗原能够与鼻咽癌患者血清中抗体特异性结合。结论:成功获得了LMP1胞外区重组基因表达的蛋白,并证明原核表达的LMP1胞外肽段保持了原有的抗原性,能够与EBV相关鼻咽癌患者血清中的抗体特异性结合。; 张大为朱进陈仁杰冯振卿; 关键词：EB病毒 LMP1 胞外区重组基因

αB-crystallin在喉癌组织中的表达及临床意义: 2016年; 目的探讨αB-crystallin基因在喉癌组织中的表达及其与喉癌的关系。方法收集2008年3月~2014年10月南京医科大学第二附属医院及皖南医学院弋矶山医院手术切除的喉癌标本54例及13例癌旁正常黏膜标本,采用实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测8例喉癌组织及其癌旁正常组织中αB-crystallin基因的表达,免疫组化法检测54例癌组织及13例癌旁正常组织中αB-crystallin蛋白的表达,比较不同组织中αB-crystallin阳性表达率。结果喉癌组织中的αB-crystallin m RNA表达量及αB-crystallin蛋白阳性表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有高度统计学意义（P〈0.01）;不同TMN分期及淋巴结转移情况的喉癌组织中αB-crystallin蛋白的阳性表达率比较差异有统计学意义（P〈0.05）,不同性别、年龄、肿瘤分型及分化程度的喉癌组织中αBcrystallin蛋白的阳性表达率比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论αB-crystallin基因的高表达与喉癌发生发展及转移有关,可能为喉癌患者的预后提供一个潜在的风险评估指标。; 熊林毛圆马俊张大为朱进陈仁杰; 关键词：实时荧光定量PCR 喉癌免疫组化

人源抗EB病毒潜伏膜蛋白1特异性基因工程抗体Fab的筛选与特性被引量：1: 2012年; 目的:应用噬菌体展示技术制备抗EB病毒编码的潜伏膜蛋白1(latert membrare protern 1,LMP1)特异性、高亲和力的全人抗体Fab片段。方法:利用稳定转染表达LMP1的SUNE-1细胞及原核表达的LMP1胞外区蛋白作为抗原对大容量人源Fab抗体库进行差减筛选及固相筛选,经过5轮细胞筛选和3轮固相筛选,随机挑选30个克隆经酶联免疫吸附法鉴定,阳性克隆进行可溶性表达,用LMP1阳性表达的人鼻咽癌细胞株HNE2/LMP1鉴定抗LMP1抗体Fab的结合活性。结果:Western blot、免疫荧光结果显示,从大容量人源Fab抗体库中筛选出1株抗LMP1抗体Fab,细胞ELISA、荧光激活细胞分类术、免疫荧光分析、免疫组化检测结果显示Fab与人鼻咽癌细胞表面LMP1分子有较好的结合活性。结论:从人源Fab抗体库中筛选的Fab抗体能够与鼻咽癌细胞表面LMP1分子特异性结合,为研制用于EBV相关肿瘤如鼻咽癌生物治疗的靶向药物,提供了候选分子。; 毛圆张大为曹清唐小军林红陈仁杰徐凛峰冯振卿; 关键词：噬菌体抗体库 EB病毒潜伏膜蛋白1 靶向治疗

一种具有治疗作用的肌电检查针: 本发明公开了一种具有治疗作用的肌电检查针，包括针体和针柄，针体一端固接在针柄端部，针体包括外套针管、同心圆针电极和注射针管，同心圆针电极和注射针管设于外套针管内，所述同心圆针电极包括针管和针芯，所述针管为参考电极，针芯为...; 李亮史兆春张大为何川

一种人源抗鼻咽癌LMP1胞外区抗体及其应用: 本发明属于基因工程领域和免疫靶向诊疗领域，公开了一种人源抗鼻咽癌LMP1胞外区抗体及其应用。该抗体的轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，该抗体能与人类鼻咽癌...; 陈仁杰张大为朱进冯振卿