周光
- 作品数：65 被引量：654H指数：14
- 供职机构：中国人民解放军总医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京市自然科学基金解放军总医院科技创新苗圃基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- 铜绿假单胞菌mexA基因原核表达载体的构建被引量：3
- 2010年
- 目的构建mexA基因的原核载体,为进一步表达MexA蛋白奠定基础。方法从临床分离多重耐药的铜绿假单胞菌抽提DNA,经PCR扩增出mexA1基因与PUC18克隆载体连接,PCR、酶切及测序鉴定,再以PUC/mexA1质粒为模板PCR扩增mexA目的基因,克隆至质粒pQE30中,构建表达质粒pQE30/mexA,构建的表达质粒pQE30/mexA转化大肠杆菌M15,培养后提取纯化重组质粒pQE30/mexA酶切鉴定。结果获得长约1.5 kbPCR mexA1产物,酶切结果显示所构建的重组质粒PUC/mexA1已成功地克隆了mexA1(1.5 kb)基因,序列分析结果与PAO1/mexA1序列相同,构建的表达质粒pQE30/mexA酶切鉴定,与插入pQE30的目的基因mexA(1.2 kb)片段相符。结论含mexA(1.2 kb)基因的原核表达载体构建成功,为进一步表达MexA蛋白奠定了基础。
- 程小平沈定霞罗燕萍周光陈荣权秋宁
- 关键词：铜绿假单胞菌
- 不同环境下军人肠道大肠埃希菌耐药性分析被引量：1
- 2014年
- 目的了解不同环境下军人正常肠道大肠埃希菌(ECO)分布及其耐药性,评估健康青壮年肠道耐药ECO的携带情况。方法采集2013年11月南方某连队152名军人正常粪便,对分离的128株ECO采用VITEK MS进行菌株鉴定,参照CLSI 2013版推荐的微量肉汤稀释法进行药敏试验,应用WHONET5.6和EXCEL软件分析细菌分布和耐药性。结果 152人中共分离出128株ECO占84.2%,其中59名海上工作人员分离到47株ECO占79.7%,产超广谱β-内酰胺酶ECO(ESBLs-ECO)5株占10.6%;63名陆地警卫人员分离到57株ECO占90.5%,ESBLs-ECO 5株占8.8%;30名炊事员分离到24株ECO占80.0%,ESBLs-ECO 8株占33.3%;海上工作人员、陆地警卫人员和陆地炊事员3组之间ESBLs-ECO阳性率差异有统计学意义;所有菌株对哌拉西林/他唑巴坦、头孢吡肟、亚胺培南和美罗培南均敏感。结论长期暴露在食品加工环境中的工作人员,有更多机会接触到通过食物链传播的耐药菌,因此,畜牧业的抗菌药物使用应得到更加严格控制。
- 张樱周光杨继勇张有江王蕊叶丽艳郭玲罗燕萍
- 关键词：军人大肠埃希菌耐药性
- 用含3－氨基苯酚硼酸的纸片检测细菌AmpC酶的方法
- 本发明公开了属于生物细菌的检测技术范围的一种用含3-氨基苯酚硼酸的纸片检测细菌AmpC酶的方法。主要是利用硼酸能抑制AmpC酶的原理，先配制APB溶液，并在不加3-氨基苯酚硼酸(APB)的CAZ，CTX和FOX纸片上添加...
- 沈定霞罗燕萍张有江徐雅萍周光
- 文献传递
- 铜绿假单胞菌mexA基因的克隆及其序列分析被引量：1
- 2010年
- 目的克隆铜绿假单胞菌临床菌株mexA基因并进行序列分析。方法从临床分离多重耐药的铜绿假单胞菌抽提DNA,经PCR扩增出mexA基因与PUC18克隆载体连接,对重组质粒进行测序验证。结果成功地克隆了mexA基因,重组质粒(PUC/mexA)经测序与Genebank检索的mexA基因序列进行对比证实为99.9%同源。结论所构建的铜绿假单胞菌临床菌株mexA基因克隆适于进一步的克隆表达。
- 程小平沈定霞罗燕萍周光陈荣权秋宁
- 关键词：铜绿假单胞菌克隆
- 普罗布考联合他汀对冠心病患者氧化低密度脂蛋白胆固醇和高敏C反应蛋白的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察急性冠脉综合征(ACS)患者普罗布考联合他汀治疗组和单纯他汀组对氧化低密度脂蛋白(Ox-LDL)和高敏C反应蛋白(Hs-CRP)水平的影响。方法选取2009年1月-2010年6月在我院心内科住院确诊急性冠脉综合征患者住院期间随机分为联合组和单纯组,两组均常规使用硝酸脂和抗血小板药物,联合组普罗布考0.75mg/d,2次/d;阿托伐他汀20mg/d,每晚1次。单纯组他汀用量及用法同联合组。随访3个月后测定Ox-LDL和Hs-CRP的表达,并进行两者的相关性分析。结果治疗后联合组的Ox-LDL和Hs-CRP较单纯他汀组含量明显降低,分别为(409.3±42.1)μg/L比(487.2±65.2)μg/L,P<0.01;(3.28±1.11)mg/L比(3.93±1.76)mg/L,P<0.01。联合组和单纯治疗组患者血清Ox-LDL和Hs-CRP均呈显著正相关(r=0.773,P<0.01;r=0.724,P<0.01)。结论两组冠心病患者中Ox-LDL和Hs-CRP均存在较高的正相关,普罗布考联合他汀较单纯他汀治疗更能降低Ox-LDL和CRP的表达,提示普罗布考能够发挥较强大的抗动脉粥样硬化作用。
- 赵明任艺虹周光
- 关键词：他汀急性冠脉综合征C反应蛋白
- R/S-普萘洛尔的手性吸收动力学研究
- 2013年
- 目的:采用蛋白质组学研究策略,研究R/S-普萘洛尔(Propranolol,PRO)的手性吸收动力学特征,建立其差异蛋白质图谱。方法:体外培养Caco-2细胞并使之在培养瓶底部融合达80%以上;将含160μmol/L的R-PRO和S-PRO的细胞培养液分别加入到培养瓶中,在培养箱中静置培养4 h;吸弃药液,用刮除法收集培养瓶中的Caco-2细胞,细胞全蛋白提取液裂解并收集Caco-2细胞全蛋白,Bradford法蛋白定量;取100μg全蛋白进行双向电泳,建立R-PRO和S-PRO的差异蛋白质图谱;对差异蛋白进行质谱鉴定和生物信息学检索,根据蛋白功能探讨R/S-普萘洛尔的手性吸收动力学特征。结果:R-PRO和S-PRO的蛋白质图谱差异不明显,对其中的明显差异蛋白质点进行质谱检测,成功鉴定到8个蛋白,分别为:GRP78、GRP75、HSP7C、HSP71、Cytokeratin 8、PIP5K、Ran、Prohibition,经生物物信息学检索,这些蛋白的功能主要涉及细胞的应急反应、能量代谢、生长繁殖等,与药物的主动吸收无直接相关。结论:成功建立了R-PRO和S-PRO的差异蛋白质图谱;R-PRO和S-PRO在蛋白质组学方面虽然存在差异,但这些蛋白与药物的主动吸收无直接相关,推测两药在体外的吸收转运无手性差异,与其它方法的研究结果一致。此外,研究中发现的差异蛋白提示,R-PRO和S-PRO在对细胞的新陈代谢方面有差异,可能与两者在体内的系统清除率的差异相关,这有待进一步研究证实。
- 毛小琴贾雄飞邱峰张渊周光
- 关键词：普萘洛尔手性吸收动力学蛋白质组学
- 左氧氟沙星和美洛培南体外诱导铜绿假单胞菌耐药的外排机制研究被引量：5
- 2007年
- 目的:研究左氧氟沙星和美洛培南对铜绿假单胞菌耐药的诱导作用及诱导耐药的外排机制。方法:多步诱导法对3株铜绿假单胞菌进行诱导耐药试验,对诱导出的菌株用微量肉汤稀释法测定加与不加外排泵抑制剂(苯丙氨酸-精氨酸-!萘酰胺)的最小抑菌浓度(MIC)的变化,PCR法检测外排泵基因oprM和mexB,并扩增mexR基因进行DNA测序。结果:3株菌均诱导出稳定的耐左氧氟沙星和美洛培南的耐药株,MIC值与原菌比较分别增加了16倍～64倍和2倍～16倍,加外排泵抑制剂后左氧氟沙星的MIC值降低了4倍～8倍;3株菌诱导前后均扩增出外排泵基因oprM和mexB,mexR测序结果与GenBankU23763比较,核苷酸序列第222位(C→T),氨基酸序列(CTG→TTG)均为LEU,为无义突变,核苷酸序列第436位插入1bp(A)移码框。结论:左氧氟沙星和美洛培南可诱导铜绿假单胞菌产生获得性耐药,其耐药机制与主动外排相关。
- 曹敬荣沈定霞白立彦宋海英周光
- 关键词：铜绿假单胞菌主动外排左氧氟沙星美洛培南
- 大肠埃希菌质粒介导CMY-2型AmpC酶基因的研究被引量：5
- 2007年
- 目的研究大肠埃希菌质粒介导的 AmpC 酶及其基因类型。方法利用3-氨基苯酚硼酸对 AmpC B内酰胺酶(AmpC 酶)的抑制作用检测表型 AmpC 酶,琼脂稀释法测定细菌的 MIC。通过接合试验分析质粒携带 ampC 基因的转移,用基因芯片技术和 PCR 测定 ampC 基因,将序列测定结果用 EMBOSS 软件进行分析,并用肠杆菌基因间重复序列(Enterbacterial repetitive intergenicconsensus,ERIC)分型确定所分析菌株的分子来源。结果对头孢西丁不敏感的74株临床分离大肠埃希菌中,AmpC 酶阳性33株,基因芯片技术从8株菌及它们对应的8株接合子细菌中测出 CIT 组AmpC 酶基因。用 CMY 型 AmpC 酶基因特异引物进行 PCR 可确定这些 CIT 组 AmpC 酶基因为 CMY型。序列比较分析结果为 CMY-2型 ampC 基因,GenBank 登录号为 DQ823449。抗菌药物对多数接合子细菌在接合前、后的 MIC 值相似,处于中介或耐药。然而亚胺培南对所有8株大肠埃希菌和它们的接合子细菌的 MIC 值为0.5或0.25μg/ml。ERIC 分型提示2株菌具有相同分子来源,其余6株菌的分子来源不同。结论从北京解放军总医院患者送检标本分离的大肠埃希菌中发现质粒介导的CMY-2型 AmpC 酶。
- 沈定霞罗燕萍曹敬荣宋阳周光
- 关键词：大肠埃希菌质粒
- 混合逆转录聚合酶链反应快速诊断六种呼吸道病毒
- 呼吸道病毒是急性呼吸道感染的重要病原体,主要包括流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒及鼻病毒、腺病毒等.由呼吸道病毒引起的急性呼吸道感染包括支气管炎、肺炎、中耳炎等,是幼儿、年老体弱者及免疫功能低下者冬春季节发病及死亡的...
- 沈定霞陈荣周光
- 关键词：呼吸道病毒
- 文献传递
- 我院铜绿假单胞菌感染的分布与耐药性分析被引量：4
- 2007年
- 目的:调查我院临床分离铜绿假单胞菌的分布以及时临床常用抗菌药的耐药性变化。方法:药物敏感性试验采用纸片扩散法。数据用WHONET 5.3软件分析。结果:2003～2005年,我院从临床标本中共分离得到铜绿假单胞菌1320株,其中有907株来自痰液及咽拭子(68.7%),105株源于分泌物(11.3%),57株来自尿液(4.3%)。标本主要来源于呼吸科、外科监护室、等科室。铜绿假单胞菌时左氧氟沙星、头孢哌酮/舒巴坦钠、亚胺培南等的耐药性三年间有不同程度的增加,环丙沙星、头孢他啶、阿米卡星对临床分离的铜绿假单胞菌仍有较好的抗菌活性,头孢吡肟保持着较高的敏感率。结论:铜绿假单胞菌对临床常用抗菌药耐药率高且多重耐药菌较为普遍,合理使用抗菌药非常重要。
- 陈海滨周光孙艳谭次娥
- 关键词：铜绿假单胞菌抗菌药耐药性
