蔡杰
- 作品数：21 被引量：34H指数：3
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- 南京地区血小板固定捐献者HLA和HPA基因资料库的建立及库容评估分析被引量：7
- 2023年
- 目的探讨南京地区血小板固定捐献者HLA-A、-B和HPA-1~6w、10w、15、21w基因多态性分布特点并进行血小板固定捐献者基因资料库库容评估分析。方法采用荧光定量PCR法对南京地区1059例血小板固定捐献者血液样本进行HLA-A、-B位点和HPA-1~6w、10w、15、21w基因分型,计算等位基因频率、HLA单体型频率、HPA组合型频率,并以此为数据基础,评估库容水平。结果1059例血小板固定捐献者中共检出HLA-A位点等位基因15个,频率较高的有A*02、A*11、A*24、A*33、A*30;检出HLA-B位点等位基因29个,频率较高的有B*15、B*40、B*13、B*46、B*51、B*58;观察到HLA-A-B单体型共269种,频率>0.01的有22种,其中频率最高的为A*02-B*15和A*30-B*13。HPA-1~6w、10w、15、21w中HPA-1,2,4,5,6w,21w系统以aa基因型为主,HPA-1,4,5,6w,21w均未检出bb纯合子;其中HPA-3和HPA-15具有高杂合度;共检出59种HPA组合,其中频率最高的组合为1aa-2aa-3ab-4aa-5aa-6aa-10aa-15ab-21aa。在本地区所建立的1059人的基因资料库中,约88.97%的患者能在本库中找到≥1名HLA-A,-B抗原匹配供者。经计算推导得到当血小板供者数为213人时,95%的患者可以找到至少1名HPA-1~6w、10w、15、21w相合的供者。结论南京地区血小板固定捐献者HLA和HPA基因型分布具有本地区独特的多态性,本研究所建立的1059人的基因资料库基本可以满足本地区血小板输注无效患者寻找HLA和HPA相合供者的需求。
- 张钰叶盛芮雪蔡杰傅强何成涛
- 关键词：血小板HLAHPA基因多态性
- 短串联重复序列亲子鉴定技术用于细胞融合的检测被引量：1
- 2016年
- 目的尝试将基于短串联重复序列（STR）技术的亲子鉴定技术应用于科研中融合细胞的检测和确认，评价其可行性。方法用20％聚乙醇-6000（PEG）进行人骨髓瘤细胞株和健康人外周血单个核细胞（PBMC）进行融合，经次黄嘌呤、氨基蝶呤和胸腺嘧啶脱氧核苷（HAT）筛选亚克隆。通过细胞形态、DNA含量、STR等位基因信息等对融合细胞进行检测。结果融合后细胞形态较原骨髓瘤细胞株稍大，增殖周期未发生显著变化，融合后细胞DNA含量呈两倍增加，STR检测融合细胞包含原亲本细胞遗传信息。结论DNA亲子鉴定技术可用于融合细胞的检测和确认，其方法可靠易行。
- 杨永林陆玉婷蔡杰许纪玲傅强蔡旭兵
- 关键词：串联重复序列血型鉴定和交叉配血细胞融合
- RhD和HBsAg双表达载体的构建与表达研究被引量：1
- 2016年
- 人类Rh血型系统是临床上最重要的血型系统之一,是人类红细胞血型系统最具有多态性的血型系统。到目前为止已发现了至少49种不同抗原,其中与临床相关的主要抗原为D、C、E、c和e等5种。Rh血型抗原定位于人类1号染色体短臂1p34.3-lp36.1,分别编码2个非糖基化的疏水性跨膜蛋白质RhD和RhCE。
- 许纪玲蔡杰陆玉婷蔡旭兵杨永林
- 关键词：血型系统红细胞血型血型抗原RHD抗原抗体抗原活性
- 大容量样本病毒浓缩HCV核酸检测方案的研究被引量：3
- 2014年
- 目的对大容量样本中丙型肝炎病毒(HCV)进行浓缩提取,采用自行设计引物进行实时HCV荧光定量检测,验证病毒浓缩的效率以及病毒浓缩对检测的影响。方法采用PEG法高速离心进行病毒浓缩,一步法逆转录荧光定量PCR验证病毒浓缩效果。结果该方案用于HCV RNA检测,能得到良好的扩增曲线,不同病毒载量样本病毒浓缩的效率均在70%以上。结论大容量样本HCV病毒浓缩可提高病毒荧光PCR检测的灵敏度。
- 蔡杰许纪玲陆玉婷杨永林蔡旭兵
- 关键词：丙型肝炎病毒核酸检测荧光定量
- HBV血液大样本浓缩核酸检测方案研究被引量：3
- 2014年
- 目的采用实时荧光定量检测方法,验证病毒浓缩的效率以及病毒浓缩对检测的影响。方法模拟48人份样本混和后浓缩提取HBV DNA,聚乙二醇沉淀法进行病毒浓缩,进行HBV DNA实时荧光定量PCR检测,并分析浓缩效率及检测水平。结果 10 mL样本中HBV病毒浓缩的效率近90%,病毒检测水平优于100 copies/mL。结论大样本混样后病毒浓缩效率理想,能有效提高病毒的检出度及血液安全并降低检测成本。
- 周静宇蔡杰许纪玲
- 关键词：乙型肝炎病毒核酸检测
- ABO^(*)B.01 等位基因 c.3G>C 突变所致亚型的鉴定与分子生物学机制研究
- 2025年
- 目的对1例血型血清学检测正反定型不符的标本进行基因分型,并对其进行家系调查分析及分子生物学机制研究。方法采用血型血清学方法鉴定先证者及其家系成员ABO血型;采用Sanger和单分子实时测序法(single molecule real-time sequencing,SMRT)对先证者及其家系标本进行ABO基因的1~7外显子测序分析;采用DeepTMHMM对突变前后的蛋白质进行跨膜区预测与分析。结果先证者及其母亲为Bw表型,其外公为ABw表型,其他家系成员血型结果正反定型相符;ABO基因测序结果显示先证者及其母亲、外公的B基因第1外显子存在c.3 G>C新变异,导致翻译起始位点后移;DeepTMHMM分析结果显示翻译起始位点后移改变了蛋白拓扑结构。结论ABO基因第1外显子c.3 G>C突变导致翻译起始位点后移,使得蛋白拓扑结构从α-跨膜区变为球形信号肽,降低了酶的活性,产生Bw血清学表型。
- 张钰蔡杰凌亚亭张璐李萌傅强何成涛
- 关键词：家系调查DNA测序
- 南京地区血小板定期捐献者HLA-Ⅰ类抗原表位多态性分析
- 2024年
- 目的探讨南京地区血小板定期捐献者HLA-Ⅰ类抗原表位的分布特点,并建立血小板定期捐献者HLA表位资料库。方法采用Sanger法对南京地区649例血小板定期捐献者血液样本进行HLA高分辨率分型,利用HLA Eplet Registry网站分析HLA高分辨率分型结果对应的HLA抗原表位多态性,采用直接计数法计算等位基因频率、HLA单体型频率和HLA抗原表位频率。结果在649例血小板定期捐献者中,共检出38个HLA-A等位基因,对应36个HLA-A表位,频率较高的有79GT、144K和138MI;检出73个HLA-B等位基因,对应35个HLA-B表位,频率较高的有131S、69TNT和80N;共检出64种HLA-Ⅰ类抗原表位,频率较高的有79GT、131S和144K。结论南京地区血小板定期捐献者HLA抗原表位分布具有本地区独特的多态性特点。基于HLA抗原表位分布特点建立的表位匹配策略,可以扩大可供选择的供者范围,降低血小板输注无效的发生率。
- 张钰何成涛蔡杰吕蕾张璐何晓露杜海林傅强张春
- 关键词：血小板输注无效人类白细胞抗原表位多态性
- 一个能特异性识别HBsAg多个抗原表位的单克隆抗体及其应用
- 本发明属于基因工程领域，涉及一个能特异性识别HBsAg多个抗原表位的单克隆抗体及其应用。一株杂交瘤细胞，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2014年9月16日，保藏编号为CCTCC？NO:C2014151。一种能够...
- 杨永林蔡杰许纪玲汪林娣蔡旭兵
- 文献传递
- 一例B(A)血型的血清学及分子生物学鉴定被引量：3
- 2020年
- 目的对1例血型血清学正反定型不符的标本进行ABO血型鉴定。方法运用血型血清学方法鉴定标本ABO血型;用PCR-序列特异性引物(SSP)基因定型和ABO基因直接测序的方法确定该标本的基因型。结果血型血清学检测结果表现为B(A)亚型的特点;PCR-SSP分型结果定为B(A)04/O1型;测序发现标本ABO基因的第6和第7外显子存在变异:第6外显子存在261delG、297A>G;第7外显子存在526C>G、640A>G、657C>T、703G>A、796C>A、803G>C、930G>A,判断该样本血型为B(A)04/O01血型。结论该血型血清学初步鉴定为B(A)的标本用PCR-SSP法和ABO基因直接测序法确认为B(A)04/O01型。
- 张钰李炜华蔡杰杜海林何晓露傅强戴宇东何成涛
- 关键词：血型血清学DNA测序
- HEV保护性抗体的制备与功能研究被引量：1
- 2017年
- 目的研究基于戊型肝炎病毒中和表位(p179)的小鼠单克隆抗体的HEV中和保护作用。方法构建含HEV中和表位p179基因的真核表达质粒venus-179,以尾静脉注射方法对BALB/c小鼠实施基因免疫,ELISA法检测免疫后小鼠血清中抗体应答水平,通过单克隆抗体的方法制备HEV抗体,通过C3A细胞株人HEV细胞感染模型,采用RT-PCR法检测中和试验后保护性抗体的中和活性。结果成功制备了6株针对戊型肝炎病毒中和表位(p179)的抗体,其中抗体株2G8F9能有效中和HEV病毒,证实其产生的特异性抗体能够有效阻断HEV感染易感细胞C3A,具有中和HEV的活性。结论戊型肝炎病毒中和表位(p179)的基因疫苗venus-179免疫小鼠制备的单克隆抗体具有中和作用的免疫应答。
- 许纪玲蔡杰何苗杨永林
- 关键词：戊型肝炎病毒基因免疫中和表位
