刘金晔
- 作品数：5 被引量：14H指数：1
- 供职机构：内蒙古农业大学动物科学与医学学院更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 停乳链球菌内蒙古分离株MIG基因的克隆和表达
- 停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌，根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列，设计一对引物，采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因，得到一条约1900 bp的...
- 刘金晔
- 关键词：停乳链球菌基因克隆
- 文献传递
- 停乳链球菌内蒙分离株抗原基因MIG的克隆
- 2011年
- 停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌,根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列,设计一对引物,采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因,得到一条1900bp的片段。将其连入PMD-19T载体中,经酶切,PCR及序列测定法进行鉴定。经DNA测序分析,证实与GenBank中停乳链球菌MIG基因(AF354651)序列同源性为95%,具有高度保守性。
- 刘金晔白龙郝永清张爱荣
- 关键词：停乳链球菌克隆
- 牛结核病检疫方法研究进展被引量：13
- 2011年
- 牛结核病主要是由牛分枝杆菌引起的一种慢性消耗性疾病,在许多国家尤其是发展中国家仍然广泛流行,该病不仅给畜牧业造成巨大的经济损失,而且严重威胁着人类的健康。因此,牛结核病的检疫意义重大。细菌学检测、免疫学检测及分子生物学诊断为牛结核病检疫的研究奠定了基础。然而,目前迫切需要研究快速、灵敏、特异的牛结核病诊断方法。牛结核病血清学诊断技术研究一直是研究热点之一,但至今仍存在许多问题。作者就这些诊断检疫方法进展作一简要介绍。
- 刘金晔郝永清
- 关键词：牛结核病
- 停乳链球菌内蒙分离株抗原基因MIG的克隆
- 2011年
- 停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌，根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列，设计一对引物，采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因，得到一条1900bp的片段。将其连入PMD-19T载体中，经酶切，PCR及序列测定法进行鉴定。经DNA测序分析，证实与GenBank中停乳链球菌MIG基因（AF354651）序列同源性为95％，具有高度保守性。
- 刘金晔白龙郝永
- 关键词：停乳链球菌MIG分离株抗原基因GENBANK克隆
- 停乳链球菌内蒙分离株抗原基因MIG的克隆和表达被引量：1
- 2011年
- 停乳链球菌是引起奶牛乳房炎的主要病原菌,根据GenBank中登陆的停乳链球菌表面蛋白MIG基因序列,设计一对引物,采用PCR的方法从临床分离的停乳链球菌内蒙分离株基因组DNA中扩增出MIG基因,得到1条1 900bp的片段。将其连入PMD-19T载体中,经酶切,PCR及序列测定法进行鉴定。结果表明,MIG基因与Gen-Bank中停乳链球菌MIG基因(AF354651)序列的同源性为95%。构建原核表达载体PET-32a(+)-MIG,随后转化到大肠杆菌BL21(DH5a)中表达。表达产物进行SDS-PAGE分析后,表达的重组蛋白大小为89 ku。将纯化的MIG重组蛋白免疫兔,用ELISA检测其血清抗体。用制备出的抗血清与链球菌全菌进行玻片凝集试验,出现凝集颗粒。结果表明MIG重组蛋白具有较强的免疫原性,为停乳链球菌疫苗的研制奠定基础。
- 刘金晔白龙郝永清张爱荣
- 关键词：克隆原核表达抗血清
