刘晓光
- 作品数:67 被引量:30H指数:3
- 供职机构:天津科技大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家高技术研究发展计划天津市应用基础与前沿技术研究计划更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学化学工程医药卫生更多>>
- 一种高效制备11α-羟基孕酮的重组雷斯青霉菌及其应用
- 本发明提供了一种高效制备11α‑羟基孕酮的重组雷斯青霉菌及其应用,属于基因工程和酶工程技术领域;本发明运用农杆菌介导转化的技术手段,将编码赭曲霉的甾体C11α‑羟化酶突变体CYP68J5mL491F的基因定点整合取代雷斯...
- 刘晓光杨滨瑞路福平毛淑红
- 一种甾体16β-羟化酶CYP65重组酵母菌的构建及其应用
- 本发明专利提供了一种表达甾体16β‑羟化酶CYP65的重组酵母菌,它能够高效转化甾体底物4‑AD,进而高效制备C16β‑OH‑4‑AD。具体涉及利用基因工程技术构建了两个敲除载体,并根据同源重组的原理定向敲除了酵母NS1...
- 刘晓光贾曦路福平
- 新型隐球菌vps41Δ氮源饥饿反应的数字基因表达谱分析
- 2015年
- VPS41基因在新型隐球菌的饥饿反应、巨噬细胞中存活以及致病性等过程中起关键作用.为了进一步研究VPS41介导的饥饿反应信号通路相关基因,利用数字基因表达谱技术检测了在氮源饥饿条件下隐球菌野生型菌株KN99α与饥饿反应缺陷菌株vps41Δ呈显著差异表达的基因.结果表明:在氮源饥饿条件下野生型与vps41Δ中呈显著表达差异的基因共有241个,其中vps41Δ中表达上调的基因有176个,表达下调的基因有65个.差异表达的基因主要涉及细胞的形态结构形成、细胞循环、次级代谢产物合成、能量代谢等生物过程.以上结果为迅速克隆鉴定隐球菌VPS41饥饿信号通路的其他关键基因奠定了基础.
- 刘晓光李伟伟叶狄
- 关键词:新型隐球菌差异表达基因
- 高温α-淀粉酶在黄姜皂苷元提取中的应用研究
- 本研究对高温α-淀粉酶在黄姜皂苷元提取过程中的作用进行了简单分析,确定了高温α-淀粉酶作用的最适条件为:pH5,温度90℃,高温α-淀粉酶的用量为25U/g,反应时间为60min.在该条件下高温α-淀粉酶对黄姜中淀粉的水...
- 肖华李玉别松涛刘晓光路福平
- 关键词:高温Α-淀粉酶高效液相色谱法
- 一种β-葡萄糖苷酶产生菌及利用该菌转化制备京尼平的方法
- 本发明涉及了一种利用体外微生物发酵法模拟体内肠道微生物转化的方式对京尼平苷进行有效的转化而生成京尼平,即利用本实验室筛选保藏的β-葡萄糖苷酶的高产菌发酵中药栀子,通过单因素实验优化,确定微生物转化得到产物京尼平的最佳条件...
- 李玉荆玮刘逸寒刘晓光王稳航路福平
- 一种新月弯孢霉在C14α-羟基化中的应用
- 本发明属于生物技术和甾体药物转化技术领域,特别涉及一种新月弯孢霉CICC40301在C14α‑羟基化中的应用。新月弯孢霉(Curvularia lunata)在工业上用于C11β羟化,本发明首次发现具有C14α羟基化能力...
- 刘晓光李慧杰李改贾龙刚王正祥路福平金鹏毛淑红
- 碱性木聚糖酶产生菌的筛选、XynG1-3基因克隆表达及酶学性质研究被引量:7
- 2012年
- 从造纸厂周边碱性土壤中分离、筛选到一株产碱性木聚糖酶的细菌G1-3,根据形态和生理、生化特性并结合16SrDNA序列分析,鉴定菌株G1-3为短小芽孢杆菌,命名为Bacillus pumilusG1-3。利用克隆表达载体pET-22b(+),实现了Bacillus pumilusG1-3碱性木聚糖酶基因XynG1-3在E.coliBL21中的表达。经氨基酸序列分析,木聚糖酶XynG1-3属于GH11家族的小分子木聚糖酶。重组木聚糖酶XynG1-3经镍离子亲和层析一步纯化后,获得凝胶电泳条带单一的蛋白样品,经SDS-PAGE检测其分子量为24 kD。对酶学性质进行分析,重组酶XynG1-3最适作用温度为55℃,最适作用pH为8.0;该酶在60℃保温1 h,残余酶活保持为原来的56%,pH作用范围较广,在pH10.0下保存1 h,残余酶活仍能保持75%,为耐碱性木聚糖酶。
- 郑宏臣刘逸寒刘晓光韩杨王建玲路福平
- 关键词:短小芽孢杆菌碱性木聚糖酶酶学性质
- 雷斯青霉NADPH-细胞色素P450还原酶基因的克隆及生物信息学分析被引量:1
- 2016年
- 工业上利用丝状真菌雷斯青霉(Penicillium raistrickii)转化生产高效避孕药孕二烯酮的关键中间体15α–羟基左旋乙基甾烯双酮.已知参与雷斯青霉甾体转化反应的关键酶为P450羟化酶,该羟化酶体系由细胞色素P450羟化酶和NADPH–细胞色素P450还原酶(CPR)组成,但有关其15α–羟基化反应的分子基础尚不清楚.根据转录组测序数据库,通过RT-PCR扩增克隆了一个雷斯青霉NADPH-细胞色素P450还原酶基因.该基因的开放阅读框为2,082,bp,编码694个氨基酸的多肽链,预测的蛋白相对分子质量为7.63×104,具有CPR蛋白的典型结构域(FMN结合域、FAD和NADPH结合域).NCBI BLAST结果显示雷斯青霉CPR与意大利青霉(P.,italicum)NADPH–细胞色素P450还原酶具有较高的同源性,一致性为93%.
- 贾龙刚姜海琪郭凯许喆刘晓光路福平
- 关键词:RT-PCR
- 一种15α-羟化酶及其制备方法和应用
- 本发明属于酶的基因工程技术领域,具体涉及一种15α‑羟化酶及其制备方法和应用。所述突变体是借助易错PCR和定点突变的方法对目标基因进行突变,筛选获得的,突变体K<Sub>cat</Sub>值为原始15α‑羟化酶的2.5倍...
- 刘晓光路福平王正祥田康明郭凯
- sn-2位为二十二碳六烯酸的磷脂酰丝氨酸的制备方法
- 本发明涉及一种利用高活力磷脂酶A<Sub>2</Sub>和高活力磷脂酶D催化制备sn-2位为二十二碳六烯酸的磷脂酰丝氨酸(2-DHA-PS)的方法。通过重叠PCR技术实现定向进化,获得高活力磷脂酶A<Sub>2</Sub...
- 路福平刘逸寒张涛刘晓光王正祥王春霞王建玲