李冠杰 作品数:79 被引量:260 H指数:10 供职机构: 河南省科学院 更多>> 发文基金: 河南省科技攻关计划 河南省重大公益性科研项目 河南省基础与前沿技术研究计划项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 轻工技术与工程 环境科学与工程 更多>>
高效降解有机磷农药真菌的分离鉴定及其特性研究 被引量:5 2011年 从有机磷农药严重污染的土壤中分离筛选出有机磷农药高效广谱降解真菌,并对其进行鉴定及降解特性研究。通过有机磷农药驯化培养、形态学和生理生化特性及其18SrDNA序列分析等试验对其进行初步鉴定,研究外界因素初始pH、培养温度、氧化乐果初始浓度等对降解菌的生长量和降解能力的影响。通过驯化分离筛选等过程从污染土壤中筛选到2株可以在高浓度氧化乐果环境下生长的真菌J4和J6,它们经生理生化和18SrDNA序列测定初步鉴定均为黑曲霉(Aspergillusniger)。研究发现,J4和J6菌株在氧化乐果初始浓度1000mg/L,pH值分别为6.5和6.0,温度分别为30℃和28℃,摇床转速160r/min条件下,培养5天后降解菌可达到最佳生长量和降解能力,降解率可分别达77.83%和70.81%,耐受氧化乐果的最大浓度均为5000mg/L,其生长量和降解能力具有正比例相关性变化趋势;并进一步研究发现,曲霉J4和J6还具有广谱降解有机磷农药的特性。 王继雯 甄静 谢宝恩 刘莹莹 李冠杰 周伏忠 陈国参关键词:有机磷农药 氧化乐果 驯化 曲霉 降解 一株无机磷细菌的分离、鉴定及其溶磷能力分析 被引量:4 2011年 从根系土壤分离纯化出降解无机磷的细菌8株,通过平板法进行初筛,根据水解圈直径和菌落直径比值大小筛选到水解圈直径和菌落直径比值较大的菌株3株,进一步通过液体摇瓶培养复筛出1株分解无机磷能力最强的菌株PC-2,该菌株经形态特征、生理生化特性16 S rDNA序列测定等一系列试验鉴定为地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis),同时对其解磷量与发酵液pH值的关系进行了初步研究,其解磷能力达57.5 mg/L,并且研究发现其不同时间的解磷量与发酵液pH值之间虽然存在着显著的相关性,但两者不成正比例相关关系. 王继雯 谢宝恩 甄静 刘莹莹 李冠杰关键词:溶磷能力 PH 黑曲霉变种产α-半乳糖苷酶菌株的筛选及发酵条件优化 2021年 试验研究黑曲霉变种产α-半乳糖苷酶菌株的筛选及发酵条件优化。黑曲霉菌株MX-H通过紫外诱变和传代培养后,得到一株能够变种产α-半乳糖苷酶较稳定的菌株MX-H1,并优化了MX-H1的产酶培养基。18S rDNA鉴定结果表明,菌株MX-H1被鉴定为黑曲霉(Aspergillus niger)。结果显示,最佳优化条件为碳源15 g/L蔗糖、氮源10 g/L牛肉膏、产酶诱导物0.5 g/L棉籽糖、初始pH值6.0、培养温度为30℃、培养基装样量30 mL/250 mL、摇床180 r/min、培养96 h。在最佳优化条件下,发酵液中产α-半乳糖苷酶酶活力达到4.95 U/mL。试验为α-半乳糖苷酶的工业化生产提供参考依据。 马焕 马焕 徐宏光 王雪妍 王雪妍 岳丹丹 郭文阳 李冠杰 李冠杰关键词:Α-半乳糖苷酶 菌株筛选 发酵条件 固氮芽孢杆菌C_2菌剂施用量对小麦生长和土壤速效养分的影响 被引量:1 2017年 为探索固氮芽孢杆菌C_2菌剂的施用剂量对小麦生长和土壤速效养分的影响,得出C_2菌剂最佳施用剂量,通过盆栽试验,设计C_2菌剂0.5、1.0、2.0、3.0、4.0 g/kg的不同施用剂量处理,20 d后取土样,测定土壤的有机质、有效磷、有效钾、全氮含量以及小麦的出芽率,同时测量小麦株高和主根长。结果表明,固氮芽孢杆菌C_2菌剂的施用剂量在0.5~4.0 g/kg之间时,与对照组相比各剂量组的主根长明显增加,差异极显著,但小麦的出芽率、株高在各剂量处理组之间差异均不显著;施用剂量在1.0~4.0 g/kg时,与不接菌对照组相比,土壤有效磷、全氮含量极显著增加,对速效钾含量影响不大。施用固氮芽孢杆菌C_2菌剂在一定施用剂量范围内能明显提高小麦主根长,增加土壤的有效磷、全氮的含量,但对小麦出芽率和株高影响很小。综合考虑,C_2菌剂对小麦的最佳施用剂量为1.0~2.0 g/kg,可为下一步大田试验提供科学依据。 王继雯 刘莹莹 刘莉 岳丹丹 赵俊杰 赵俊杰 李冠杰 甄静 巩涛 杨文玲 慕琦关键词:菌剂 盆栽试验 施用剂量 小麦生长 黑曲霉有机磷农药降解酶的纯化及其性质 被引量:3 2012年 采用细胞破碎、硫酸铵分级沉淀和Sephadex G-75凝胶过滤的方法,对黑曲霉(Aspergillus niger)J6产生的有机磷农药降解酶进行分离和纯化,并对其酶学性质进行研究。结果显示:黑曲霉J6有机磷农药降解酶定位在细胞膜上,其分子量为66 000。该降解酶最适pH值为7.0,最适反应温度为70℃,Fe3+、Cu2+、Li+、Zn2+、Mg2+、NaN3、EDTA、SDS、PSMF对该降解酶有不同程度的激活作用,而Mn2+对其有轻微的抑制作用,Ca2+和Triton对其有强烈的抑制作用。 王继雯 甄静 谢宝恩 刘莹莹 李冠杰 周伏忠 陈国参关键词:黑曲霉 酶学性质 一种高产吲哚乙酸巴西固氮螺菌R的发酵培养基及其应用 本发明涉及高产吲哚乙酸巴西固氮螺菌R的发酵培养基及其应用,可有效解决高产吲哚乙酸巴西固氮螺菌R的发酵培养基,提高吲哚乙酸产出的问题,方法是,由以下重量百分比计的:果糖0.1~1%、氮源0.5~2%、NaCL 0.1~1.... 王继雯 岳丹丹 刘莉 赵俊杰 李冠杰 陈国参 慕琦 胡宜亮 巩涛 杨文玲 甄静文献传递 黑曲霉J6解钾条件优化 2024年 [目的]探索黑曲霉J6对钾矿粉的最佳解钾条件。[方法]以查氏培养基为基础,测定黑曲霉J6对钾矿粉的解钾量,通过单因素试验和正交试验对黑曲霉J6的解钾发酵条件进行了优化。[结果]黑曲霉J6解钾最佳培养基为2%可溶性淀粉、0.5%豆粕、0.003%FeSO_(4)、0.008%ZnSO_(4);其解钾的最佳培养条件为培养基初始pH 8.5、培养温度32℃、培养时间28 d、接种量2.5%。[结论]该研究为有效利用微生物转化低品位矿物钾技术和生物钾肥的生产提供了参考。 岳丹丹 王雪妍 杨文玲 张宗源 周留柱 李冠杰 王继雯关键词:黑曲霉 含钾矿物 黑曲霉J6有机磷农药降解酶固定化条件的研究 被引量:4 2014年 为了制备有机磷农药水体或土壤污染修复剂,对黑曲霉J6有机磷农药降解酶的粗酶液固定化条件进行优化研究,首先制备黑曲霉J6有机磷农药降解酶的粗酶液,然后分别对海藻酸钠和CaCL2浓度以及固定化时间等固定化条件进行优化,得出其粗酶液的最佳包埋条件。研究结果表明其粗酶液最佳固定化条件为:2%海藻酸钠,4%CaCl2,包酶量20%,(其中蛋白含量为0.15 mg/mL),固定化时间4 h,在最佳条件下固定化粗酶液成球较易,比较规则,弹性好,强度较高,并且相对酶活最高。本研究成功地对黑曲霉J6有机磷农药降解酶的粗酶液的固定化条件进行了优化研究,得出了最佳包埋条件。 王继雯 刘莹莹 李冠杰 甄静 杨文玲 岳丹丹 慕琦 谢宝恩 贾彬 陈国参关键词:有机磷农药 降解酶 固定化条件 黑曲霉 pVLT-EGFP载体构建及其在巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)的表达研究 2015年 为了研究巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)在植物体内的定殖,利用酶切连接的方法,以增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)基因与表达载体p VLT-33为基本元件,构建了重组表达载体p VLT-EGFP,电转巴西固氮螺菌R7细胞,并利用实时荧光定量PCR(q PCR)研究了不同温度、不同时间EGFP m RNA的表达情况。酶切及测序结果表明,成功构建了p VLT-EGFP载体,并在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白表达;q PCR结果显示:30℃,诱导9 h EGFP基因的表达水平最高。本研究成功构建了重组表达载体p VLT-EGFP,为实现p VLT-EGFP的可控表达及研究固氮菌在植物体内的定殖规律及促生长机理提供了一种有效的途径。 巩涛 王继雯 杨文玲 甄静 刘莹莹 李冠杰 刘莉 岳丹丹 陈国参关键词:巴西固氮螺菌 一株有机磷农药高效降解菌的筛选及酶学性质研究 被引量:6 2013年 为了从有机磷农药严重污染的土壤中分离筛选出一株有机磷农药高效降解菌,并对其进行鉴定及其酶学性质研究。通过有机磷农药驯化培养、形态学和生理生化特性及其16SrDNA序列分析等试验对其进行了初步鉴定,并初步研究了pH值、温度、底物及金属离子等外界因素对其粗酶液酶学性质的影响。分离筛选出一株有机磷农药高效降解菌J7-4,经形态学和生理生化特性及其16SrDNA序列分析等试验,初步将其鉴定为施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzeri),其降解酶为胞内酶,该酶最适pH为9.0,最适反应温度为45℃;最适底物为甲基对硫磷,并且该酶具有广谱降解特性;Mg2+、Ca2+等金属离子对其有不同程度的激活作用,Co2+、Cr3+对该酶有轻微的抑制作用,而Mn2+、Fe3+、Zn2+、Al3+、Hg+、Cd2+、Ba2+、Ag+对该酶有强烈的抑制作用。成功地从有机磷农药严重污染的土壤中分离筛选出了一株有机磷农药高效降解菌J7-4,并对其降解酶的性质进行了初步研究。 王继雯 甄静 刘莹莹 李冠杰 慕琦 贾彬 谢宝恩 周伏忠 陈国参关键词:有机磷农药 降解 施氏假单胞菌 酶学性质