余斌
- 作品数：94 被引量：210H指数：8
- 供职机构：浙江省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学文化科学医药卫生更多>>
- 副猪嗜血杆菌CDT三顺反子的表达、组装及生物学活性
- 2024年
- 副猪嗜血杆菌是猪的常见病原菌,以异源三聚体形式分泌到胞外环境的细胞致死性膨胀毒素(CDT)是该菌重要的毒力因子,制备完整的重组CDT对于其功能研究至关重要。本研究构建了可用于同时表达CDT 3个亚基的三顺反子重组质粒,优化了完整毒素三聚体的体外组装及纯化方法,并验证了重组三聚体毒素的生物学活性。结果显示,CDT 3个亚基以CdtA/CdtB/CdtC-his方式组合时,按0.1 g/L等体积混合,在PBS中以尿素浓度梯度透析时组装效果最好。构建的重组三顺反子质粒在大肠杆菌中可以同时表达出比例相当的3个CDT亚基,并且均以包涵体形式存在,经包涵体离心粗纯化后,即可用于重组三聚体CDT的组装。组装的三聚体CDT经亲和层析及分子筛层析纯化,得到高纯度的完整毒素。完整毒素可以引起Marc145细胞体积明显膨胀,且分裂周期停滞于G2/M期的细胞比例显著增加。结果表明,本研究建立了一种简单有效的副猪嗜血杆菌重组CDT完整毒素制备方法,所制备的CDT具有良好的生物学活性。
- 李军星余斌徐丽华苏菲叶十一袁秀芳
- 关键词：副猪嗜血杆菌
- 共表达猪细小病毒VP2蛋白和猪圆环病毒2型Cap蛋白的重组伪狂犬病毒的构建及其鉴定被引量：8
- 2012年
- 为研制猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)和猪圆环病毒2型(PCV2)3联苗,本研究将PPV VP2基因和PCV2 Cap基因通过口蹄疫病毒2A基因串联得到VP2-2A-Cap(V2C)基因,将其插入pEP-CMV-in转移载体构建pEP-V2C-in重组表达质粒,再通过Red/ET两步重组法在大肠杆菌中构建了pPRV-V2C-ΔgE和pPRV-ΔgE突变体,该突变体用磷酸钙法转染BHK-21细胞获得重组病毒rPRV-V2C-ΔgE和rPRV-ΔgE。Western blot分析表明rPRV-V2C-ΔgE能够在BHK-21细胞内表达融合蛋白VP2-2A-Cap,而且目的蛋白能够被2A蛋白裂解为64 ku和28 ku两个片段。重组病毒生长曲线和噬斑大小测定结果显示rPRV-V2C-ΔgE在BHK-21细胞中的增殖滴度与亲本株rPRV无显著差异,表明外源基因的插入不影响rPRV的增殖。本研究为PRV、PPV和PCV2 3联重组活载体疫苗的研制奠定了基础。
- 邓晓辉陈柳叶伟成李军星崔尚金余斌云涛崔言顺孙元仇华吉张帅张存
- 关键词：细菌人工染色体猪细小病毒猪圆环病毒2型
- 猪繁殖与呼吸综合征二价重组腺病毒疫苗及其制备方法
- 本发明公开了猪繁殖与呼吸综合征二价重组腺病毒疫苗及其制备方法，属于生物疫苗制备技术领域。该疫苗可通过在PRRSV GP5和M蛋白之间插入一具有自我裂解的FMDV 2A基因相连接，构建成GP5－2A－M融合蛋白基因，并与腺...
- 刘光清云涛倪征余斌陈柳华炯钢李双茂
- 文献传递
- 鉴别基因I型与II型鸭呼肠孤病毒的引物及方法
- 本发明公开了一种鉴别基因I型与II型鸭呼肠孤病毒的引物及方法。所述引物包括引物对1和引物对2，引物对1为：上游引物：5’-CTGACGCTTTTGAAGTCCACT-3’，下游引物：5’-AACACTGTATCCTGGA...
- 云涛张存华炯钢叶伟成余斌陈柳倪征
- 文献传递
- 鸭Ⅰ型肝炎病毒研究进展
- 鸭Ⅰ型肝炎病毒(Duck Hepatitis Virus typeⅠ,DHV-Ⅰ)是引发雏鸭的一种高度致死性病毒性传染病的病原。该病的特征是发病急、病程短、死亡率高。临床症状以痉挛、抽搐和角弓反张等神经症状为主要特征,病...
- 倪征云涛余斌陈柳华炯钢李双茂
- 关键词：基因组RNA病毒分类病原生物学
- 文献传递
- 一种重组Mh-DnaK蛋白及其在检测猪源嗜血支原体中的应用
- 本发明公开一种重组Mh‑DnaK蛋白及其在检测猪源嗜血支原体中的应用。本发明首先公开了氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的重组Mh‑DnaK蛋白。本发明进一步公开了以上述重组Mh‑DnaK蛋白作为包被抗原的酶标板的猪...
- 付媛石团员孙洪超袁秀芳王德前徐丽华李军星苏菲余斌闫文朝齐萌李天恩刘鑫邓金华
- 抗猪γ-干扰素单克隆抗体的制备及定量抗原捕获ELISA检测方法的初步建立
- γ-干扰素（IFN-γ）是机体内具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节功能的重要细胞因子。γ-干扰素主要由激活的T细胞、激活的NK细胞和巨噬细胞产生。研究表明，内源性IFN-γ水平的高低在很大程度上可以反映机体的细胞免疫状态，对样...
- 余斌
- 关键词：猪Γ干扰素单克隆抗体卵黄抗体疫苗免疫
- 文献传递
- 副猪嗜血杆菌comC基因遗传进化及其与菌株血清型和潜在毒力基因的相关性分析被引量：2
- 2020年
- 为探索副猪嗜血杆菌菌株分类与其临床致病力之间的关系,研究对2009-2017年分离的148个菌株进行comC基因测序以及遗传进化分析,同时探讨部分潜在毒力基因、血清型以及临床致病力等与基于comC基因的菌株遗传进化的相关性。基于comC基因的进化树分析显示,副猪嗜血杆菌形成2个相对独立的分支,在分支Ⅰ中又形成2个亚群Ⅰ-A和Ⅰ-B。4个潜在毒力基因在comC进化树各分支中的分布模式具有明显差异,Ⅰ-A分支中hsdS、hsdR及ompP2基因检出频率较高,而fhuA基因检出频率较低;Ⅰ-B分支中fhuA及ompP2检出频率较高,而hsdS、hsdR检出频率较低;分支Ⅱ中只有ompP2检出频率较高,fhuA、hsdS和hsdR的检出频率都较低。血清型分布在各分支中也有明显差别,血清4,5,12,13,14型主要分布于分支Ⅰ中;而血清1,2,7型主要分布于分支Ⅱ中。系统感染分离菌株在3个分支中分布较均匀,但93.8%的心包液分离菌株位于分支Ⅰ中,且主要位于Ⅰ-A分支。因此,comC进化树各分支中潜在毒力基因和血清型的分布有明显差异,表明基于comC基因的遗传进化分析对副猪嗜血杆菌临床分离株具有良好的区分效果,但系统感染分离株与基于comC基因的遗传进化没有明显的相关性。本研究为探索副猪嗜血杆菌的分类方法及其与致病力的关系提供新的信息。
- 李军星徐丽华苏菲余斌袁秀芳
- 关键词：副猪嗜血杆菌遗传进化血清型毒力基因
- 新时代高校巡察工作理念和路径创新研究被引量：1
- 2023年
- 巡视巡察是深化全面从严治党、完善权力运行监督制约机制、提升治理能力现代化水平的重要举措。高校巡察要树牢政治巡察、政治业务深度融合、人民至上价值理念,提高政治站位,落实立德树人根本任务,增强监督效能,优化工作机制,强化成果运用,以高质量巡察持续推动学校事业高质量发展。
- 余斌
- 表达鸭坦布苏病毒E蛋白的重组鸭瘟病毒及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种表达鸭坦布苏病毒E蛋白的重组鸭瘟病毒及其构建方法和应用，该重组鸭瘟病毒的基因组中插入有鸭坦布苏病毒E蛋白基因，所述鸭坦布苏病毒E蛋白基因的核苷酸序列如SEQ？ID？NO.9所示。所述构建方法包括：(1)将...
- 陈柳张存倪征叶伟成余斌云涛华炯钢
- 文献传递
