何飞
- 作品数：41 被引量：152H指数：8
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- 发文基金：国家高技术研究发展计划军队医药卫生科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学哲学宗教更多>>
- 体外人牙髓细胞的连续培养被引量：14
- 2002年
- 目的 探讨体外连续培养过程中人恒牙牙髓细胞向成牙本质样细胞分化的可行性。方法 采用细胞连续培养、酶动力学法、透射电镜观察、免疫组化等方法 ,对体外人牙髓细胞在连续培养过程中的生物学特性进行研究。结果 部分人牙髓细胞在体外可以出现复层生长 ,形成细胞结节 ,并可进一步钙化 ;与成牙本质细胞相似 ,它们具有高碱性磷酸酶活性 ,可合成Ⅰ型胶原 ,其超微结构有许多与成牙本质细胞相似的特征 ,胞间基质中可见膜被基质小泡 ,某些基质小泡内含针状晶体。结论 体外连续培养的人牙髓细胞可向成牙本质细胞分化 ,此过程可作为研究体内牙髓损伤修复细胞增殖。
- 何飞谭颖徽杨峥嵘
- 关键词：牙髓细胞成牙本质细胞细胞分化细胞培养牙髓损伤
- 人Delta-like 1蛋白的表达及其对动员外周血CD34^+细胞的扩增作用被引量：1
- 2010年
- 构建pET32a(+)-hDll1DSL原核表达载体,表达、纯化hDll1DSL蛋白,观察其对动员外周血CD34+细胞的体外扩增作用。克隆hDll1DSL,构建pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导蛋白表达,镍珠亲合层析纯化蛋白。RBP-j报告基因实验及Notch下游分子Hes1检测证实hDll1DSL活性。磁珠分选动员外周血CD34+细胞,加入hDll1DSL或联合SCF、FL、TPO孵育一周,观察体外扩增作用。结果表明:成功克隆hDll1DSL,并构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体。在大肠杆菌BL21成功表达Trx-hDll1DSL融合蛋白,经镍珠亲合层析纯化蛋白,成功获得高纯度的Trx-hDll1DSL融合蛋白。配体活性实验显示,可溶性的Trx-hDll1DSL蛋白可以激活RBP-j报告基因,并且能上调Notch下游分子Hes1的表达,证明其能够激活Notch信号通路。此外,Trx-hDll1DSL融合蛋白与SCF、FL及TPO联用,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用。我们成功构建了pET32a(+)-hDll1DSL重组表达载体,表达、纯化了具有生物学活性的Trx-hDll1DSL融合蛋白,具有协同刺激CD34+细胞体外扩增的作用,为造血干/祖细胞体外扩增体系的优化研究奠定了基础。
- 刘强郑瑾何飞李国辉黄斯勇郝淼旺梁英民
- 关键词：外周血CD34+细胞扩增作用细胞体外原核表达载体
- 小鼠CXCR4基因启动子的克隆和报告基因载体构建被引量：2
- 2009年
- 目的:克隆小鼠CXCR4基因启动子,并建立CX-CR4报告基因系统。方法:设计合成PCR引物,从小鼠基因组DNA中扩增并克隆小鼠CXCR4基因的启动子区。序列测定确认后,用克隆的启动子片段构建CXCR4荧光素酶报告基因载体pGL-CXCR4。转染细胞,用双报告基因系统检测报告基因载体的活性。结果:成功扩增了小鼠CXCR4基因的启动子区。克隆入质粒载体后经DNA序列测定证实了其序列。通过转染细胞和荧光素酶分析,证实所构建的报告基因可以反映CXCR4启动子的活性。结论:成功扩增、克隆了小鼠CXCR4基因启动子,并成功建立起其报告基因系统,为后续的研究奠定了基础。
- 王莉何飞王耀春
- 关键词：CXCR4基因启动子报告基因
- Notch信号对小鼠肝纤维化作用的研究
- 肝硬化是世界范围的疾病,严重威胁人们的身体健康。肝纤维化是许多慢性肝病发展至肝硬化的必经阶段。硬化的肝脏能否转归正常目前还不清楚,但近来研究表明通过有效治疗,纤维化肝脏能够恢复正常,因此肝纤维化阶段是治疗的关键阶段。肝纤...
- 何飞
- 关键词：NOTCH微小RNA基质金属蛋白酶
- 文献传递
- 临床医学专业口腔科学教学改革的实践与体会被引量：2
- 2008年
- 全面素质教育的观念和科学的人才质量观．改变了传统的教育思想。强调学生主动性和创造性的调动和发挥、强调学生综合能力的培养，素质教育已成为医学教育中的重要内容。
为了学生个人素质和人才综合培养发展能适应时代的需要，为了提高口腔科学的教学效果。本课题组在总结以往的教学经验基础上，自2004年起。对临床医学专业学生的口腔科学教学内容及教学方法进行改革探讨：2006年在学校和医院两级医学教学研究项目资助下，全面投入教学实践．经过两年的实践检验，效果显著。
- 裘松波张萍周燕何飞
- 关键词：临床医学专业口腔科学教学改革全面素质教育人才质量观医学专业学生
- Notch_2-Delta在体外人牙髓细胞分化中的表达及调控被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨Notch信号在体外牙髓细胞向成牙本质样细胞分化过程中的作用。方法 人牙髓细胞体外连续培养 ,采用免疫组化染色及Westernblot方法对该过程中人牙髓细胞Notch2 _Delta的表达及rhBMP_2对Delta表达的影响进行定性及半定量研究。结果 体外牙髓细胞增殖、分化过程中有Notch2 _Delta的表达 ,随细胞增殖、分化状态的不同 ,二者表达的部位及表达强度发生变化 ,外源性rhBMP_2在牙髓细胞结节形成后期可上调Delta的表达。结论 Notch信号途径参与了体外牙髓细胞向成牙本质样细胞分化过程 ,其介导的细胞间相互作用可能是控制牙髓细胞对信号分子反应性的机制。
- 何飞谭颖徽杨峥嵘
- 关键词：NOTCH2人牙髓细胞细胞分化
- 重组小鼠凝血因子Ⅶ-pPIC9K表达载体的构建及其在毕赤酵母中的表达
- 2005年
- 目的:构建去除凝血功能,但保留TF亲和力的rmFⅦ-pPIC9K表达载体并用毕赤酵母表达目的蛋白。方法:通过RT-PCR自小鼠肝脏获得FⅦcDNA,对其进行定点突变后连入pPIC9K质粒,电击转化Gs115酵母细胞,经G418筛选、BMGY/BMMY小量摇瓶培养表达目的蛋白,并进行初步的凝血、结合活性鉴定。结果:成功构建了3种rmFⅦ-pPIC9K表达载体(M1:LCmFⅦ-pHC9K;M2:K341AmFⅦ-pPIC9K;M3:QEAmFⅦ-pPIC9K),并通过酵母表达获得相应蛋白,经初步活性鉴定其中两种符合设计目的。结论:毕赤酵母表达rmFⅦ蛋白,为抗肿瘤血管药物的研究、肿瘤的分子靶向性治疗奠定了基础。
- 杨峥嵘何飞王蒙粟永萍程天民
- 关键词：毕赤酵母定点突变
- Delta1基因对人牙髓干细胞增殖、分化的影响
- 本研究拟在分离鉴定人牙髓干细胞的基础上，采用逆转录病毒基因转导技术，将Notch配体—Delta1基因导入该细胞，探讨Delta1基因对DPSCs增殖、分化的影响，并对此基因转导细胞作为组织工程种子细胞的可行性进行初步探...
- 何飞
- 关键词：牙髓干细胞细胞增殖逆转录病毒NOTCH信号信号转导
- 文献传递
- bFGF-PLA-Ns对体外培养成骨细胞增殖、分化及矿化的影响被引量：9
- 2007年
- 目的观察制备的碱性成纤维生长因子聚乳酸纳米微球缓释系统(bFGF-PLA-Ns)对体外培养的兔成骨细胞的增殖、分化和矿化能力的影响。方法体外培养兔成骨细胞并鉴定,将bFGF-PLA-Ns和第4代成骨细胞一起培养,碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测细胞ALP活性,茜素红染色方法观察矿化结节的形成,并与单纯bFGF和空白组的作用进行比较。结果bFGF-PLA-Ns具有良好的生物活性,能显著促进兔成骨细胞的分化和矿化,其效应高于单纯施加bFGF和空白组的效应。结论制备的bFGF-PLA-Ns比单纯的bFGF对体外培养的成骨细胞有更为显著的生物学效应,在骨创伤的治疗中有良好的前景。
- 张纲亓连军谭颖徽卢来春裘松波何飞
- 关键词：BFGF纳米微球成骨细胞
- 短期职业暴露对个体心理健康影响的初步研究被引量：2
- 2008年
- 目的:通过评估短期职业暴露前后人员的心理健康状况,探讨短期职业暴露对个体心理健康的影响特点,为职业暴露引发的心理问题提供心理干预依据.方法:运用症状自评量表(SCL-90),焦虑自评量表(SAS),抑郁自评量表(SDS)和状态-特质焦虑问卷(STAI),比较25名职业暴露人员暴露前和暴露后(暴露1wk)的心理健康状况.结果:SCL-90各项得分均高于职业暴露后,其中躯体化、强迫、人际关系、抑郁、偏执、精神病性、阳性项目数、总分均达到统计学显著水平(P<0.05),但焦虑、敌对和恐怖等因子未达到统计学显著水平(P>0.05).暴露前,SDS抑郁指数得分0.49±0.05,SAS得分55.16±5.25,S-AI得分2.02±0.28;暴露后,SDS抑郁指数得分0.47±0.06,SAS得分39.64±5.45,S-AI得分1.52±0.26.暴露前SDS,SAS和S-AI得分均显著高于暴露后的水平.结论:短期职业暴露前的心理健康水平较暴露后差,提示对该职业暴露个体在暴露前的专业教育和心理教育非常必要,同时暴露期间的心理干预不容忽视.
- 李皎皎杨业兵陈波艳何飞刘旭峰
- 关键词：精神卫生心理测定学
