何培英
- 作品数:56 被引量:231H指数:9
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- PDE5基因siRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP的影响被引量:3
- 2006年
- 目的:观察PDE5基因小干扰RNA(siRNA)对人阴茎海绵体平滑肌细胞环磷酸鸟苷(cGMP)的影响,为阴茎勃起功能障碍(ED)的基因治疗提供实验依据。方法:使用美国Amb ion公司提供的设计软件设计并合成人PDE5基因的siRNA序列,合成3对PDE5 siRNA和1对阴性对照siRNA,转染人阴茎海绵体平滑肌细胞,同时设定空白转染组为对照组。以酶联免疫法分别检测转染后不同时间(24、48、72、96 h)点海绵体平滑肌细胞内cGMP浓度变化,观察PDE5 siRNA对海绵体平滑肌细胞内cGMP的影响。结果:siRNA1、siRNA2和siRNA3转染后人阴茎海绵体平滑肌细胞cGMP水平显著高于阴性对照siRNA组和空白对照组(P<0.05),在转染后72 h最为显著,siRNA1、siRNA2、siRNA3、阴性对照siRNA和空白对照组cGMP测定值分别为:5.89±0.19、3.52±0.16、2.88±0.08、0.72±0.12、0.60±0.16 pmol/m l,siRNA1组明显高于siRNA2、siRNA3组(P<0.05)。结论:体外化学合成的PDE5 siRNA能有效地增加海绵体平滑肌细胞内cGMP的水平,不同序列siRNA增加cGMP水平的能力不同,为ED的基因治疗提供了新思路。
- 陈国强白文俊王晓峰刘士军何培英侯树坤
- 关键词:勃起功能障碍基因沉默环磷酸鸟苷
- 原发性高血压和动脉硬化性脑梗死及腔隙性脑梗死患者的HLA-DQA1遗传易感性被引量:13
- 2001年
- 目的 探讨原发性高血压 (EH)、动脉粥样硬化性血栓性脑梗死 (ABI)及腔隙性脑梗死(LS)患者HLA DQA1位点的基因分型及其遗传易感性。方法 采用PCR SSP方法对EH、ABI及LS共15 5例患者和正常对照 6 4人进行HLA DQA1位点的基因分型和遗传易感性分析。结果 EH、ABI及LS组的HLA DQA1 0 30 1基因频率均明显高于正常对照组 ,分别为 33 6 5 3 8对 17 96 88,36 5 85 4对17 96 88,33 0 6 45对 17 96 88(P <0 0 1) ,而HLA DQA1 0 10 3基因频率却明显低于正常对照组 (P <0 0 5或P <0 0 1)。结论 HLA DQA1 0 30 1等位基因可能与EH、ABI及LS的遗传易感性相关 ,而HLA DQA1 0 10 3等位基因可能与其保护性相关。
- 沈乃莹闫征何培英金宇安
- 关键词:原发性高血压动脉硬化性脑梗死腔隙性脑梗死遗传易感性HLA-DQA1
- 他克莫司对人黑素瘤细胞增殖、黑素合成及SCF/c-kit信号传导通路的影响
- 目的:探讨他克莫司对人黑素瘤细胞增殖、黑素合成的影响,以及对色素生成至关重要的干细胞因子(stem cell factor,SCF)/c-kit信号传导通路的影响。方法:体外HaCaT细胞(正常人永生化角质形成
- 杜娟樊春红何培英张建中
- 关键词:人黑素瘤细胞他克莫司黑素合成信号传导通路
- 文献传递
- 绝经后妇女护骨素基因启动子区T950C基因多态性与骨密度的关系研究被引量:3
- 2010年
- 目的探讨绝经后妇女护骨素(OPG)基因启动子区T950C基因多态性与骨密度的关系。方法应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法,测定随机选取的50例绝经后骨质疏松妇女和50例绝经后非骨质疏松妇女,OPG基因T950C的基因型;采用双能X线吸收法分别测定腰椎(L1-4)和股骨颈、髋部的骨密度。结果在绝经后妇女中发现TT、TC、CC三种基因型,各基因型的分布频率分别为:TT,27%;TC,51%;CC,22%,符合Hardy-Weinberg定律。骨质疏松组与非骨质疏松组之间OPG基因型分布频率的差异无显著性(P>0.05)。比较各基因型的骨密度,绝经后妇女三种基因型之间无差异(P>0.05)。结论护骨素基因启动子区T950C基因多态性与绝经后妇女的骨密度关系不密切,可能不能作为绝经后妇女是否发生骨质疏松的遗传标志。
- 刘杰苗懿德张育军何培英宝辉褚林李卫张庆文苏琳
- 关键词:护骨素基因多态性骨密度
- 体外培养正常人黑素细胞内皮素A受体mRNA表达的研究被引量:2
- 2003年
- 目的 探讨正常人黑素细胞中是否存在内皮素-1的高选择性A受体(ETA-R)的mRNA表达。方法 采用体外黑素细胞培养技术和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正常人黑素细胞ETA-R的mRNA表达情况。结果 正常人黑素细胞有ETA-R的mRNA表达,凝胶电泳显示有特异性条带,以分子量标记电泳条带作为参照,cDNA产物片段长度约为400 bp。结论 内皮素-1可能是通过与其高选择性ETA-R结合而发挥其对黑素细胞的促增殖作用。
- 杜娟徐前喜何培英闫征张建中朱铁君
- 关键词:体外培养正常人黑素细胞内皮素A受体内皮缩血管肽血管收缩
- PI3K抑制剂对体外培养的眼底血管内皮细胞的作用被引量:4
- 2007年
- 目的观察PI3K激酶抑制剂LY294002对体外培养的视网膜脉络膜血管内皮细胞增生和迁移抑制以及诱导凋亡的作用。方法四唑盐(MTT)比色法检查对照组和LY294002干预组干预72h后RF/6A细胞增生的抑制,Transwell分析法检查不同浓度的LY294002对VEGF诱导的RF/6A细胞迁移的抑制效果,流式细胞仪检测细胞的凋亡。结果LY294002以浓度依赖性方式抑制VEGF诱导的RF/6A细胞增生和迁移,各个LY294002干预组与对照组相比,增生和迁移能力降低,差异有统计学意义(P<0.05),流式细胞仪分析结果显示LY294002可以诱导细胞的凋亡。结论LY294002可抑制体外培养的RF/6A细胞的生长和迁移,并诱导细胞的凋亡,有望为临床上新生血管性疾病提供新的治疗方法。
- 于文贞黎晓新周国宏何培英
- 关键词:LY294002血管内皮细胞增生
- ILK对前列腺癌DU145细胞生长影响的研究
- 目的:探讨整合素连接激酶(ILK)对前列腺癌细胞系DU145的生长及迁移能力的影响。材料和方法:应用SiRNA技术行ILK基因敲除后的DU145细胞作为实验组,对照组为未作处理的DU145。取对数生长期的的细胞进行实验。...
- 何培英徐涛李清王晓峰
- 关键词:ILK前列腺癌DU145细胞生长
- 文献传递
- 整合素连接激酶对视网膜色素上皮细胞生长、凋亡和分泌功能的影响被引量:3
- 2013年
- 背景 玻璃体视网膜手术后视网膜色素上皮(RPE)细胞的增生和移行是增生性玻璃体视网膜病变(PVR)发生的主要病理机制,干预RPE细胞的生物学行为对于PVR的靶向治疗有重要意义. 目的 观察整合素连接激酶(ILK)对RPE细胞生长、凋亡及分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响. 方法 用低糖DMEM培养基常规培养和传代人RPE D407细胞系,选择50代以内的细胞进行实验.应用特异性敲减ILK的小干扰RNA(siRNA) (ILK-siRNA)与100μl无血清培养基和RPE细胞共培养的方式转染RPE细胞作为实验组,应用非特异性siRNA转染RPE细胞作为对照组,分别将24孔板置于37℃、体积分数5% CO2孵箱中孵育.转染48 h后,应用MTT比色法检测各组RPE细胞活力;应用流式细胞仪检测RPE细胞的生长周期及细胞凋亡情况;采用Western blot法检测并比较各组RPE细胞中cyclin D1和caspase-3表达水平的变化;应用ELISA法检测并比较各组RPE细胞分泌VEGF水平的变化. 结果 转染siRNA 48 h后,MTT法检测见实验组和对照组RPE细胞活力分别为(43.69±0.89)%和(73.95±1.20)%,实验组比对照组降低了40.92%,差异有统计学意义(t=49.524,P=0.000).流式细胞术检测发现,实验组处于G1期的细胞数为(83.30±1.26)%,对照组为(47.10±0.93)%;实验组S期细胞数量显著减少,为(12.63±0.92)%,对照组为(36.25±1.21)%;实验组G2期细胞数量显著减少,为(4.07±1.40)%,对照组为(16.65±1.53)%,两组间G1、S、G2期细胞比例的差异均有统计学意义(t=56.624、-38.130、-14.860,均P=0.000).实验组的细胞凋亡率为(15.18±1.22)%,对照组为(2.20±0.15)%,二者间差异有统计学意义(t=25.742,P=0.000).Western blot 检测结果示,实验组cyclin D1的表达量明显降低,而caspase-3的表达量则明显增高.ELISA法检测结果示,实验组RPE细胞的VEGF分泌量为(1314.49±147.23) ng/L,比对照组的(3
- 郭丽莉于文贞黎晓新周玮琰谢万坤赵敏陈欢何培英
- 关键词:整合素连接激酶视网膜色素上皮细胞小干扰RNA增生性玻璃体视网膜病变
- siRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞PDE5的抑制作用
- 目的:观察siRNA对人阴茎海绵体平滑肌细胞5型磷酸二酯酶(PDE5)的抑制作用,为阴茎勃起功能障碍的基因治疗提供理论和实验依据。方法:根据siRNA设计原理,针对PDE5 cDNA序列设计三对PDE5 siRNA和一对...
- 陈国强白文俊王晓峰何培英刘士军孔雷
- 关键词:阴茎海绵体平滑肌细胞SIRNA
- 文献传递
- HLA-DQA1*0301及*0103与腔隙性脑梗死和原发性高血压的遗传易感性研究被引量:5
- 2001年
- 目的 针对腔隙性脑梗死 (lacunarstroke ,LS)和原发性高血压 (essentialhypertension ,EH)及多基因致病特点 ,进行HLA DQA1位点的基因分型 ,分析其遗传易感性。方法 采用PCR SSP方法对 62例LS、52例EH和 64例正常对照进行HLA DQA1位点的基因分型。结果 ①HLA DQA1 0 3 0 1等位基因与LS及EH呈显著正相关。②HLA DQA1 0 1 0 3等位基因与LS及EH呈显著负相关。结论 HLA DQA1 0 3 0 1等位基因与LS及EH的发病有一定的关联 ,而HLA DQA1 0 1 0 3等位基因可能是LS及EH的保护性基因。
- 沈乃莹闫征何培英金宇安王申五
- 关键词:腔隙性脑梗死高血压遗传易感性