陈国柱 作品数:14 被引量:29 H指数:3 供职机构: 军事医学科学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
PI3K在肿瘤坏死因子诱导L929细胞程序性坏死过程中的调控作用研究 被引量:2 2017年 目的探讨磷脂酰肌醇3-激酶(phosphatidylinositol-3-kinase,PI3K)在肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)诱导细胞程序性坏死过程中的调控作用与机制。方法利用慢病毒介导的RNA干涉技术构建PI3K催化亚基p110α敲低、RIP1敲低及RIP1与p110α双敲低的L929细胞株,Western印迹或RT-PCR验证敲低效果。同时,利用Western印迹检测AKT和混合系激酶区域样蛋白(MLKL)磷酸化及MLKL多聚化。流式细胞术和显微拍照术检测细胞死亡。结果 PI3K和AKT抑制剂及p110α敲低都可降低AKT磷酸化水平,并阻断TNFα诱导的L929细胞程序性坏死。敲低RIP1并不抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的L929细胞程序性坏死,但这种RIP1非依赖性细胞程序性坏死能为p110α敲低抑制。此外,p110α敲低可抑制TNFα与Z-VAD联合诱导的MLKL活化及其介导的细胞程序性坏死。结论 PI3K是调控细胞程序性坏死的重要靶点,可通过RIP1依赖及非依赖性方式激活,进而活化AKT与MLKL,启动TNFα诱导的细胞程序性坏死。 常喜喜 胡世平 王宇 王丽丽 武帅 王籽橙 杜芝燕 于继云 张毅 陈国柱关键词:磷脂酰肌醇3-激酶 肿瘤坏死因子Α 蛋白激酶B 拮抗细胞程序性坏死——机体应激损伤防护的新策略 2011年 应激是机体对内外环境变化做出的总体反应,过度应激导致机体的组织坏死和器官衰竭,从而诱发应激损伤。细胞程序性坏死是一种新鉴定的可调控的程序性细胞死亡,具有明确的调控靶点和信号转导通路,且在缺血再灌注、外源微生物感染和炎症反应等应激因素诱导的组织损伤过程中具有重要的调控作用。同时,细胞程序性坏死抑制剂在多种应激损伤动物模型中都表现出显著的预防和治疗效果,从而表明阻断细胞程序性坏死将成为应激损伤预防和治疗的新策略,而细胞程序性坏死的调控靶蛋白也为应激损伤的药物设计提供了新的靶点。 陈国柱 成祥 于晓妉关键词:应激损伤 缺血再灌注损伤 芹菜素在制备预防和治疗人缺血损伤引起疾病的药物应用 本发明涉及天然药物芹菜素在制备抗缺血损伤性疾病的药物中的应用。这些疾病包括急性心肌梗塞、脑梗塞、肠缺血、四肢缺血性坏死及肝、肾等器官因缺血造成的细胞坏死及功能损害。 于晓妉 赵名 陈国柱 徐元基 杜芝燕文献传递 组蛋白去乙酰化酶抑制剂-FK228对人非小细胞肺癌A549细胞纺锤体检查点的影响 被引量:1 2013年 HDACi-FK228是一种新型抗肿瘤药物,但其作用机制研究的尚未十分明确,为进一步阐明FK228杀伤肿瘤细胞的机制,该文应用流式细胞术检测FK228对非小细胞肺癌A549细胞周期的影响;应用免疫荧光染色和免疫印迹检测FK228对检查点蛋白Bub1及BubR1定位和表达的影响;采用纺锤体检查点功能实验检测FK228对细胞检查点功能的影响。结果提示,FK228处理24 h后,G2/M期细胞比例由6.35%增至19.91%;FK228能够抑制检查点蛋白Bub1及BubR1着丝粒定位并上调两种蛋白表达;纺锤体检查点功能实验提示对照组经Nocodazole或Taxol处理后G2/M期细胞比例最高分别达35.74%及29.24%,而FK228处理组经上述两种药物处理后各时间点G2/M期细胞所占比例皆明显减少(最高所占比例分别仅为7.13%及6.03%),失去了随时相点的动态变化,提示FK228抑制了A549细胞纺锤体检查点在监测张力和黏附上的功能。该研究证实FK228能够通过影响纺锤体检查点蛋白着丝粒定位以及抑制纺锤体检查点的功能,进而干涉肿瘤细胞有丝分裂过程,有助于阐明HDACi杀伤肿瘤细胞的新机制。 张旭辉 赵名 陈国柱 成祥 于晓妉关键词:组蛋白去乙酰化酶抑制剂 肿瘤细胞 RIP1介导肿瘤坏死因子α诱导的L929细胞凋亡与程序性坏死 被引量:2 2016年 肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNFα)诱导的L929细胞死亡是研究细胞程序性坏死的重要模型,但也有报道称,TNFα处理后的L929细胞发生了凋亡。该研究以所在实验室保存的L929细胞(L929-A)和从商业化细胞库购买的L929细胞(L929-N)为模型,进一步鉴定了TNFα诱导的L929细胞死亡类型与调控机制。结果发现,TNFα处理后的L929-A细胞中出现了凋亡特征,且阻断胱冬肽酶(caspase)信号通路可显著抑制TNFα诱导的L929-A细胞死亡,但却促进TNFα诱导的L929-N细胞死亡。此外,受体相互作用蛋白1(receptor-interacting protein 1,RIP1)在TNFα诱导的两种L929细胞死亡过程中都具有关键性的调控作用,表明TNFα处理后的L929-A细胞发生了RIP1依赖的细胞凋亡,而L929-N细胞发生了程序性坏死(necroptosis)。同时,启动细胞程序性坏死的关键蛋白RIP3(receptor-interacting protein 3)在L929-N细胞中表达水平显著高于L929-A细胞,因此,RIP3的这种差异表达可能是决定两种L929细胞在TNFα处理后发生不同类型细胞程序性死亡的重要原因。 常喜喜 成祥 王丽丽 王宇 张毅 陈国柱 于继云关键词:L929细胞 肿瘤坏死因子Α 细胞凋亡 CHIP基因稳定转染人慢性髓系白血病K562细胞诱发有丝分裂异常 被引量:1 2008年 本研究旨在建立可稳定高效表达E3泛素连接酶CHIP(carboxyl terminus of Hsc70/Hsp70-interactingprotein)的慢性髓系白血病细胞株K562细胞模型,以观察过表达CHIP对细胞生物学特性的影响。采用脂质体介导的方法,经G418筛选及有限稀释法成功建立了可稳定表达野生型CHIP及其TPR及U-box结构域缺失突变体的慢性髓系白血病K562细胞克隆。对过表达CHIP的K562细胞用MTT法检测体外增殖,流式细胞术检测细胞周期,Western blot法检测相关蛋白表达,瑞氏-姬姆萨染色进行细胞形态学观测。结果表明,过表达野生型CHIP对K562细胞体外增殖能力没有明显影响,细胞周期中G2/M期细胞比率增加,CHIP对BCR-ABL激酶的稳定性没有影响,但却明显导致细胞形态异常,表现为细胞体积增大及异常核细胞数目增多,出现异常有丝分裂相等,提示CHIP分子对细胞有丝分裂过程可能具有调控作用。结论:野生型CHIP可诱导K562细胞发生有丝分裂异常。 高莹 王妍 张旭辉 陈国柱 杜芝燕 徐元基 于晓妉关键词:CML 雷公藤红素对非小细胞肺癌细胞株H1299增殖与凋亡的影响 被引量:11 2008年 目的:研究雷公藤红素对非小细胞肺癌细胞株H1299的杀伤作用及相关调控机制。方法:用细胞计数法测定不同浓度雷公藤红素对H1299细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测H1299细胞的细胞周期;用Western blotting检测剪切的(cleaved)聚ADP核糖聚合酶(PARP)、cleaved caspase-3和低氧诱导因子-1(HIF-1)的表达水平;用DCF-DA染色和荧光显微镜检测细胞内的活性氧(ROS)水平;用萤光素酶活性测定法检测NFκB的活性。结果:雷公藤红素以时间和剂量依赖性的方式抑制H1299细胞的增殖,并使细胞阻滞在G2/M期。同时,雷公藤红素显著上调cleaved PARP和cleaved caspase-3的表达,提高细胞内的ROS水平,并且抑制NFκB的活性。结论:雷公藤红素以时间和剂量依赖性的方式抑制H1299细胞的增殖,并诱导caspase依赖性的细胞凋亡,具体机制与细胞内ROS的积累和NFκB的活性抑制有关。 陈国柱 徐元基 杜芝燕 于晓妉关键词:雷公藤红素 肺癌 细胞凋亡 雷公藤红素调控H1299细胞内线粒体呼吸链复合物活性和活性氧水平的研究 目的:研究雷公藤红素(celastrol,Cel)对非小细胞肺癌细胞H1299线粒体呼吸链复合物(mitochondrial respiratory chain complex,MRCC)活性和活性氧(reactive ... 陈国柱 成祥 于晓妉关键词:活性氧水平 雷公藤红素 H1299 文献传递 组蛋白去乙酰化酶抑制剂诱导肿瘤细胞凋亡的机制 2008年 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACi)是一类新的化疗药物,能够有效抑制组蛋白去乙酰化酶的活性,促进组蛋白及非组蛋白的乙酰化修饰,在转录和翻译后修饰水平调控肿瘤靶蛋白及凋亡相关蛋白的表达和降解,活化凋亡信号通路,诱导肿瘤细胞凋亡。HDACi抑制抗氧化蛋白的表达,提高细胞内活性氧的水平,引起细胞的氧化损伤。因此,氧化损伤诱导的细胞凋亡也是HDACi杀伤肿瘤细胞的重要机制。HDACi诱导细胞凋亡机制的发现将进一步促进HDACi在临床治疗中的应用。 陈国柱 于晓妉关键词:组蛋白去乙酰化酶抑制剂 细胞凋亡 乙酰化修饰 活性氧在组蛋白去乙酰化酶抑制剂杀伤肿瘤细胞过程中的作用 被引量:1 2008年 组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACi是)一类新的化疗药物,在体内外的实验中表现出显著的抗癌活性。HDACi选择性抑制肿瘤细胞内抗氧化蛋白的表达,提高细胞内的活性氧水平,引起线粒体和DNA的氧化损伤,从而活化凋亡信号通路,诱导肿瘤细胞凋亡。 陈国柱 于晓妉关键词:组蛋白去乙酰化酶抑制剂 活性氧 细胞凋亡 乙酰化修饰