沈强
- 作品数：6 被引量：17H指数：2
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- αΒ-晶状体蛋白促进体外培养人RPE细胞的增殖
- 2013年
- 目的测定αΒ-晶状体蛋白在体外培养人视网膜色素上皮细胞(retinal pigment epithelial cell,RPE)中的表达,探讨αΒ-晶状体蛋白对体外培养人RPE细胞增殖的影响。方法传代培养人A-RPE19细胞系,免疫荧光技术检测αΒ-晶状体蛋白在RPE细胞中的表达。用不同稀释浓度(体积比分别为1/102、1/103、1/104、1/105、1/106)的αΒ-晶状体蛋白以及其抗体干预各组(对照组、蛋白组、抗体组)细胞,MTT方法检测不同时间点各组细胞光密度值,流式细胞术检测各组细胞不同时间点的周期及凋亡情况。结果αΒ-晶状体蛋白在体外培养人RPE细胞质中表达;在48 h,浓度为1/104～1/102时,3组细胞的光密度值差异有统计学意义(P<0.05);蛋白组与对照组相比,0～48 h蛋白组的G1期比例减小,S、G2期比例增加,抗体组与对照组相比,G1期比例增加,S、G2期比例减少(P<0.05,P<0.01);48 h时3组之间凋亡细胞的构成比差异有统计学意义(P<0.05)。结论αΒ-晶状体蛋白在体外培养人RPE细胞质中表达,并对体外培养人RPE细胞增殖起明显促进作用。
- 唐德荣张学东陈小丽沈强李颖媛
- 关键词：人视网膜色素上皮细胞增殖
- 玻璃体腔注射环孢菌素A对糖尿病大鼠血视网膜屏障的保护作用及机制被引量：1
- 2012年
- 目的观察和探讨玻璃体腔注射环孢菌素A（CsA）对糖尿病（DM）大鼠血视网膜屏障（BRB）的影响及其作用机制。方法8～10周龄健康Sprague—Dawley雄性大鼠48只，随机分为正常对照组、DM组、CsA组及二甲基亚砜（DMS0）组，每组12只。对DM、CsA及DMSO组大鼠进行一次性腹腔注射链脲佐菌素（STZ）溶液建模，正常对照组大鼠腹腔注射等量的柠檬酸钠缓冲液。注射后72h，采用免疫组织化学染色法检测视网膜内外渗的内源性白蛋白评价BRB的渗透性；蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测视网膜细胞间粘附分子（ICAM-1）的蛋白表达；酶联免疫吸附试验（EusA）检测视网膜血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果与正常对照组相比，DM组大鼠视网膜外渗的白蛋白增多，视网膜内ICAM一1、VEGF表达明显升高，差异均有统计学意义（F=29．350，29．240，9．658；P〈0．01）。与DM组相比，CsA组大鼠视网膜外渗的白蛋白减少，视网膜内ICAM-1、VEGF表达明显下降，差异均有统计学意义（t=3．174，5．000，3．352；P〈0．05）；DMSO组大鼠视网膜外渗的白蛋白、视网膜内ICAM-1及VEGF表达均无明显变化，差异无统计学意义（t=0．420，0．561，0．312；P〉0．05）。结论玻璃体腔注射CsA对DM大鼠BRB具有保护作用。其机制可能与CsA降低IcAM-1及VEGF的表达有关。
- 沈强张学东宗元娟陈雪梅
- 高糖对视网膜色素上皮细胞Toll样受体2表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察高糖对体外培养的ARPE-19细胞Toll样受体2(toll-like receptor 2,TLR2)表达的影响及机制。方法各组ARPE-19(RPE细胞系)细胞分别刺激48 h,正常糖浓度组(5.5 mmol/L D-葡萄糖)、中度高糖组(15.5 mmol/LD-葡萄糖)、高糖组(25.5 mmol/L D-葡萄糖)、PKC-α抑制剂组(25.5 mmol/L D-葡萄糖加10 mmol/L Go6976 PKC-α抑制剂)、高渗对照组(5.5 mmol/L D-葡萄糖加20 mmol/L甘露醇)。Western blot检测各组ARPE-19细胞TLR2蛋白表达水平,以及PKC-α蛋白胞浆向胞膜的转位情况;Real-time PCR分析各组ARPE-19细胞TLR2的mRNA表达水平。结果与正常糖浓度组相比,高糖组和中度高糖组TLR2的mRNA和蛋白表达,以及PKC-α转位均增加(P<0.05),并且高糖组高于中度高糖组(P<0.05)。与高糖组比较,PKC-α抑制剂组的TLR2蛋白表达降低(P<0.05),PKC-α蛋白转位显著降低(P<0.01)。结论高糖可以上调ARPE-19细胞TLR2的mRNA和蛋白表达,刺激PKC-α转位;高糖可能是通过PKC-α通路上调ARPE-19细胞TLR2表达。
- 陈雪梅张学东宗元娟沈强
- 关键词：糖尿病视网膜病变ARPE-19TOLL样受体2高糖
- 玻璃体腔注射环孢菌素A对糖尿病大鼠视网膜功能及结构的保护作用
- 宗元娟沈强张学东雷博方晏红陈雪梅
- 糖尿病黄斑水肿的发病机制及治疗进展被引量：13
- 2012年
- 糖尿病黄斑水肿是引起糖尿病患者视力受损的主要原因之一,其发病机制不完全清楚,推测主要与血-视网膜内、外屏障的破坏,多种细胞因子的作用以及缺氧等因素有关。激光光凝和玻璃体手术是目前治疗糖尿病黄斑水肿的最有效方法,糖皮质激素等药物在玻璃体内注射也广泛应用。本文就糖尿病黄斑水肿的发病机制及治疗进展作一综述。
- 沈强张学东
- 关键词：糖尿病黄斑水肿血-视网膜屏障激光光凝玻璃体切割术
- 玻璃体腔注射环孢素A对糖尿病大鼠视网膜功能及结构的保护作用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨玻璃体腔注射环孢素A（CsA）对早期糖尿病（DM）大鼠视网膜功能、组织结构及超微结构的影响。方法实验研究。SD大鼠经链脲佐菌素诱导建立DM动物模型。实验分为正常对照组、未注射药物组（DM组）、注射CsA干预组（DM＋CsA组）、注射对照液干预组（DM＋DMSO组），每组9只。于建模成功后4周进行玻璃体腔注射，注射后48h应用视网膜电图（ERG）检测视网膜功能。然后处死大鼠获取视网膜，应用光镜、透射电镜检测视网膜结构变化。运用单因素方差分析方法分析4组大鼠在不同刺激光强下ERG结果的差异，辅以事后检验进行ERG结果的各组间多重比较。结果不同刺激光强度下4组大鼠的ERGb波振幅间的差异有统计学意义（F=14．760—28．890，P值均〈0．01）；当刺激光强度≥-0．35log cd·s·m^-2时，4组大鼠的暗适应ERGa波振幅间的差异亦有统计学意义（F值分别为12．510和15．500，P值均〈0．01）。与正常对照组（ERGa波：82．43±26．68，ERGb波：208．40±51．20）相比，DM组（ERGa波：39．71±7．61，ERGb波：92．20±24．42）和DM＋DMSO组（ERGa波：37．63±17．25，ERGb波：93．11±22．50）大鼠暗适应时均有ERGa波、b波振幅下降（t=5．448—7．872，P值均〈0．05），DM＋CsA组b波振幅（160．10±43．49）下降明显（t=3．299，P〈0．05），但a波（63．91±20．32）无明显变化（P〉0．05）。石蜡切片染色结果显示，与正常对照组相比，其他三组大鼠视网膜外核层疏松变薄、细胞超微结构紊乱呈凋亡表现。与DM组及DM＋DMSO组相比，DM＋CsA组暗适应时ERGa波、b波振幅下降程度轻（t=3．203—4．759，P值均〈0．05）、外核层疏松变薄程度轻、超微结构改变程度轻。结论DM大鼠病程早期即出现视网膜神经功能的损害，并有视网膜神经细胞超微结构改变。眼内注射CsA对大鼠视网膜功能有保护作用�
- 宗元娟沈强张学东雷博方晏红陈雪梅
- 关键词：糖尿病视网膜病变环孢素A视网膜电图
