张树利
- 作品数:5 被引量:0H指数:0
- 供职机构:中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 用于转化腾冲嗜热厌氧杆菌MB4的质粒、培养基和转化方法
- 本发明公开了一种腾冲嗜热厌氧杆菌MB4(Thermoanaerobactertengcongensis MB4)的遗传转化方法。本发明还涉及用于该转化方法中的质粒、培养基、以及采用该转化方法筛选的Thermoanaero...
- 谭华荣刘波杨海花张树利
- 文献传递
- 腾冲嗜热菌单链DNA结合蛋白SSB2和SSB3新的单链DNA结合特性(英文)
- 2009年
- 【目的】揭示腾冲嗜热菌中两个单链DNA结合蛋白SSB2和SSB3的全新的底物结合功能及其不同的体内表达模式。【方法】利用腾冲嗜热菌复制起始位点附近的长度较短的单链DNA为底物,采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及Western blot方法,研究SSB2和SSB3体外单链DNA结合特征和体内表达模式。【结果】SSB2与35nt的复制起始区单链DNA(ssDNA)结合,形成单个SSB2-DNA复合物;当与59ntssDNA结合时,可以随着蛋白浓度的递增形成一个或两个SSB2-DNA复合物;而与70nt的单链DNA结合时,则形成1~3个SSB2-DNA复合物。这些结果说明SSB2在与长度小于70nt的单链DNA结合时,存在着多种构型。而这些构型的形成取决于单链DNA的长度、蛋白的浓度,并与SSB蛋白所受的预处理温度和反应温度有关。SSB3与59nt和70nt结合时,最多形成3个或4个复合物。低温保存和高温下反应对SSB3蛋白的功能影响比SSB2更为显著,表现为构型明显减少或结合ssDNA能力下降。此外,在腾冲嗜热菌中,SSB2和SSB3的表达水平随温度变化而变化,SSB2在45℃~65℃间表达水平很高,在75℃时表达水平下降,而SSB3在45℃时表达水平较低,在55℃到75℃间表达水平较高,说明二者在腾冲嗜热菌中的表达可能受到培养温度的调控。【结论】腾冲嗜热菌中SSB2和SSB3具有全新的底物结合特征及其不同的体内表达模式。
- 张树利杨海花李磊田宇清谭华荣
- 用于转化腾冲嗜热厌氧杆菌MB4的质粒、培养基和转化方法
- 本发明公开了一种腾冲嗜热厌氧杆菌MB4(Thermoanaerobactertengcongensis?MB4)的遗传转化方法。本发明还涉及用于该转化方法中的质粒、培养基、以及采用该转化方法筛选的Thermoanaero...
- 谭华荣刘波杨海花张树利
- 文献传递
- 腾冲嗜热厌氧杆菌单链DNA结合蛋白的功能研究
- 本论文研究并揭示了腾冲嗜热厌氧杆菌中三个单链DNA结合蛋白不同的生化特性。SSB1只在蛋白:DNA摩尔比较高的情况下才表现出其ssDNA结合功能。当蛋白浓度提高一倍时,SSB1在结合ssDNA的同时表现出降解ssDNA的...
- 张树利
- 关键词:结合蛋白热稳定性生物化学
- 腾冲嗜热厌氧杆菌的单链DNA特异性内切酶EndoTT的特性研究及遗传操作系统的构建
- EndoTT由腾冲嗜热厌氧杆菌(Thermoanaerobacter tengcongensis)MB4的基因tt0829所编码,体外生化研究结果证明EndoTT不仅具有双链DNA结合活性,而且对单链DNA和受损伤的双链...
- 刘波张树利杨海花谭华荣
- 关键词:内切酶DNA操作系统特异性
- 文献传递