陈红英
- 作品数:432 被引量:1,067H指数:14
- 供职机构:河南农业大学更多>>
- 发文基金:河南省科技攻关计划国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生政治法律更多>>
- 猪伪狂犬病毒SYBR-GreenⅠ实时定量PCR检测方法的建立被引量:9
- 2009年
- 利用PCR技术扩增出猪伪狂犬病毒gH基因中187 bp的片段,并克隆到pGEMT载体上,纯化的质粒作为PCR检测的标准模板,以10倍梯度稀释质粒为标准模板,进行SYBR GreenⅠ荧光定量PCR扩增并制作标准曲线,建立了猪伪狂犬病毒的荧光定量PCR检测方法.该方法检测灵敏度可达1.26×102拷贝.μL-1,与猪圆环病毒,猪细小病毒,猪繁殖与呼吸综合征病毒,猪瘟病毒不发生交叉反应,具有良好的特异性和重复性;对15份疑似病料进行了检测,发现均为荧光定量PCR阳性,而常规PCR只能检测出6份阳性.结果表明,建立的实时荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床PRV感染的检测.
- 李明凤魏战勇郭显坡贾艳艳陈红英王学兵崔保安
- 关键词:猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR
- 猪α干扰素基因在干酪乳酸杆菌中的表达
- 从质粒pMD18-IFN-α扩增出猪α干扰素(IFN-α)基因成熟蛋白序列,克隆到含有信号肽的质粒pUCK-SP中,获得重组质粒pUCK-SP-IFN-α。再将NdeⅠ和EcoRⅠ双酶切获取的SP-IFN-α片段插入到同...
- 陈红英马世杰李坤付朋飞郭晓庆高晓云崔保安
- 关键词:猪Α干扰素基因表达抗病毒活性
- 文献传递
- 精液中猪细小病毒DNA三种提取方法效果比较被引量:6
- 2009年
- 猪精液中含有高浓度的蛋白质,因此提取高纯度DNA较为困难;试验分别用水煮法、异硫氰酸胍法和Trizol法三种方法对连续稀释梯度猪精液提取猪细小病毒DNA,应用Taqman荧光定量PCR技术评价提取效果并加以对比。结果发现Trizol法可以提取出高纯度的DNA,但因Trizol试剂价格昂贵,不适用临床检测;比较另外两种方法,水煮法较异硫氰酸胍抽提法更为有效,是一种迅速、简便、经济、高效的DNA提取方法,适合于临床大量样品的检测。
- 魏战勇梁静怡李厚伟王东方陈红英崔保安
- 关键词:猪精液DNA提取方法猪细小病毒异硫氰酸胍
- 鸽新城疫的诊断和防制
- 2007年
- 杨明凡陈红英方忠意崔保安
- 关键词:鸽新城疫防制病毒灭活苗发病情况白色稀粪
- 纳米铝胶佐剂猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫效果研究
- 本研究为探讨纳米铝胶佐剂猪细小病毒灭活疫苗对猪体的免疫效果,探明纳米铝胶佐剂的免疫增强作用。将制备的纳米铝胶佐剂和常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗与市售的PPV油乳剂灭活疫苗做对比,接种猪体后进行免疫效果比较,在免疫后0、1、...
- 寇亚楠陈红英崔保安魏战勇
- 关键词:猪细小病毒灭活疫苗免疫效果
- 文献传递
- 猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法
- 本发明公开了一种猪细小病毒与猪圆环病毒2型二重SYBR Green I实时荧光PCR检测引物及方法,设计与合成引物,利用引物检测猪细小病毒与猪圆环病毒2型的二重SYBR Green I实时荧光PCR检测方法,包括提取样品...
- 崔保安魏战勇陈红英李明凤党玉丽郭显坡
- 文献传递
- 中原地区牛肠道病毒分离鉴定及其遗传变异分析
- 2025年
- 旨在探究中原地区牛肠道病毒(BEV)的生物学特性及其5′-UTR序列遗传特征。采用RT-PCR方法对2023—2024年从四川、河南和河北地区收集的77份腹泻牛粪便样品进行BEV检测,对阳性样本的BEV 5′-UTR序列进行克隆及遗传变异分析,通过接种Madin-Darby牛肾细胞(MDBK)进行病毒分离与鉴定。结果:77份牛粪便样品中有20份(25.97%)检测为BEV阳性,获得20株BEV 5′-UTR核苷酸序列;20株BEV与13株BEV参考毒株5′-UTR序列同源性为77.2%~94.1%;遗传变异分析显示,获得的20株BEV序列中17株属于BEV-F种,余下3株属于BEV-E种;分离到2株BEV,命名为HB002、HN004-8,均为BEV-F种,病毒滴度均在48 h时达到高峰,分别为10^(5.49)TCID_(50)/μL和10^(5.67)TCID_(50)/μL;电子显微镜观察病毒粒子呈球形,直径20~30 nm。本研究为BEV感染的防控提供了参考。
- 刘颖黄宗梅王轩昂郑兰兰马世杰陈红英
- 麻鸭γ-干扰素基因的克隆与序列分析被引量:1
- 2007年
- 应用RT-PCR技术,直接从成年麻鸭脾淋巴细胞提取的总RNA中扩增出麻鸭γ-干扰素基因(duIFN-γ),并克隆、测序。测序结果表明,麻鸭IFN-γ全序列大小为515 bp,包含一个完整阅读框(495 bp),编码164个氨基酸残基,推导的氨基酸有3个潜在的N-糖基化位点,有5个与二硫键形成有关的半胱氨酸。麻鸭IFN-γ基因序列与AF087134、AF100929、AJ012254的序列完全一致,而与北京鸭(AY166850)核苷酸同源性为99.6%,有2个碱基差异,为非同义突变,氨基酸同源性为98.8%。麻鸭IFN-γ基因与鸡、火鸡和鹌鹑IFN-γ基因核苷酸序列同源性分别为77.2%、78.0%、78.8%,氨基酸序列同源性均67.1%,而与人、狒狒、猪、牛、绵羊、犬、猫IFN-γ核苷酸序列同源性为39.7%~42.1%,氨基酸序列同源性在28.0%~31.7%之间。
- 陈红英崔保安赵丽崔沛郑兰兰王东方郭小参
- 关键词:IFN-Γ基因克隆
- 一种猪伪狂犬病毒株
- 本发明公开了一种猪伪狂犬病毒株,其特征在于:猪伪狂犬病毒(Herpesviridae)毒株,CCTCC NO:V201314。本发明将PRV/HN2012株传至第7代,并对第7代病毒进行了病毒滴度TCID<Sub>50<...
- 陈红英杨明凡高晓云崔保安杨兴武张宇徐朋丽
- 文献传递
- PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法
- 本发明公开了一种PCV2、PRV与SIV H9亚型多重SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR引物及其检测方法,SIV H9亚型引物的序列如下:上游引物P1:5′-GGAACAACGCTTACCCTG-3′;下游引物P2:...
- 魏战勇李明凤陈红英宋亚鹏韩志涛崔保安
- 文献传递