陈小红
- 作品数:69 被引量:191H指数:8
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- 发文基金:浙江省自然科学基金国家自然科学基金浙江省中医药管理局科研基金更多>>
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- 转染miR-223对HEL细胞增殖和分化的影响
- 2011年
- 通过在体外将miR-223 duplex转染至红白血病细胞株(HEL),观察其对HEL细胞增殖作用的影响,来探讨miR-223对白血病细胞诱导分化及作用机理。以白血病HEL细胞株为靶细胞,采用MTT法和半固体集落法观察不同浓度的miR-223对HEL细胞增殖的影响;流式细胞术观察红系细胞分化的表面标志(CD71+、GPA+)表达;RT-PCR检测miR-223对LMO2转录因子表达的影响以及用免疫印迹反应观察相应蛋白的表达情况。结果表明:低浓度的miR-223(10nM、20nM)抑制HEL细胞增殖,且随浓度增加(50nM、100nM)时,抑制作用更明显(P<0.05或P<0.01)。半固体集落培养结果显示与MTT结果相一致。流式细胞术检测用不同浓度的miR-223转染HEL细胞中发现红系细胞表面标志GPA+表达随其浓度升高而增加,而CD71+在细胞中表达无显著差异。在miR-223作用前后提取RNA进行RT-PCR检测显示,LMO2基因表达随浓度增加而降低。对LMO2蛋白免疫印迹分析发现,经miR-223处理过的细胞中LMO2蛋白含量随浓度增加逐渐下降。结论:转染一定浓度miR-223至红白血病HEL细胞中,能够抑制细胞增殖,其作用机制有可能通过竞争性抑制LMO2转录因子表达,恢复与分化相关的转录因子的表达,来诱导红白血病细胞向成熟方向分化。
- 陈小红高瑞兰钱煦岱王潇徐丹尹利明周郁鸿
- 关键词:HEL
- 白花蛇舌草注射液抑制HL-60细胞增殖及作用机理研究被引量:9
- 2008年
- 本研究通过对白花蛇舌草注射液(hedyotic diffusa willdInjection,HDI)在体外抑制人白血病细胞株(HL-60)增殖作用的观察,以探讨HDI用于治疗白血病患者的作用机制。以白血病HL-60细胞株为靶细胞,采用MTT法观察不同浓度的HDI对HL-60细胞增殖的影响;用流式细胞术和DNA Ladder观察细胞凋亡、以及粒系细胞分化的表面标志(CD33、CD15)表达;RT-PCR检测HDI对survivin、bcl-2基因表达的影响。结果表明:低浓度的HDI(1.56ml/L)对HL-60细胞增殖无明显抑制作用(p>0.05),但当HDI浓度提高至3.12-12.5ml/L时,细胞则出现明显的增殖抑制,且随浓度增加抑制作用增强(p<0.05或p<0.01)。Annexin-V/PI双参数和DNA Ladder检测发现,HL-60细胞经不同浓度HDI诱导24、48、72小时后均未出现典型的凋亡现象,而粒系细胞表面标志CD15的表达,经不同浓度HDI诱导1周后均显著增高,CD33表达无显著变化。HL-60经HDI(6.25ml/L)处理2周后,survivin、bcl-2基因表达无明显变化;当处理3周后,survivin、bcl-2基因表达均明显低于未经处理过的细胞,分别低于60%和44%。结论:白花蛇舌草注射液在一定浓度下能够直接抑制白血病细胞增殖,其作用机制可能是通过诱导细胞分化、凋亡。
- 陈小红高瑞兰钱煦岱王潇谈潘莉尹利明周郁鸿
- 关键词:白花蛇舌草注射液HL-60CD15SURVIVINBCL-2
- 制备细胞增殖分化、凋亡相关基因芯片研究人参二醇诱导的基因表达谱
- 本文采用cDNA芯片分析了人参二醇(PDS)诱导造血细胞增殖、分化相关基因的表达谱,为PDS的作用机理提供基因表达谱方面的证据。
- 高瑞兰陈小红林筱洁钱煦岱黄琦吴超群
- 关键词:基因表达谱人参二醇细胞活性诱导分化
- 三七皂苷对人骨髓造血细胞凋亡相关蛋白表达的影响被引量:16
- 2006年
- 本文研究观察三七皂苷(PNS)对造血细胞促进凋亡相关蛋白(Daxx、Fas)和抑制凋亡的核转录因子(NFkB、c-Rel)表达的影响,探讨PNS促进造血细胞增殖,支持生长存活的作用机制。采用半固体集落培养法观察PNS对人骨髓红系、粒系祖造血细胞(CFU-GM、CFU-E)的增殖作用,台盼蓝拒染法观察细胞的存活率,涂片染色法观察细胞形态学的变化,用流式细胞术分析细胞凋亡状况。同时,用PNS处理粒系HL-60、红系K562、巨核系CHRF-288和Meg-014种细胞株后,提取胞浆蛋白和核蛋白,Western免疫印迹观察Daxx、Fas、NFkB和c-Rel蛋白的表达水平。结果发现:①PNS能够刺激人骨髓红系、粒系祖细胞和HL-60等4种细胞株增殖。②HL-60等4种株细胞经PNS和饥饿处理后,活性良好,镜下未观察到凋亡的形态学特征;AnnexinⅤ分析也未见凋亡的阳性细胞。③Westernblot结果显示,经PNS处理的4株细胞Daxx蛋白表达水平与对照相比,下降幅度分别为33.3%-61·5%;HL-60细胞本身表达Fas蛋白低下,PNS处理后也无明显下降,而K562、CHRF-288和Meg-01细胞Fas蛋白表达与对照相比,下降幅度分别为33.3%-71.4%。④NFkB、c-Rel蛋白除HL-60细胞对PNS诱导无明显变化外,其余细胞均出现不同程度地增加,分别提高了2.0-2.7倍和1.5-2.3倍。结论:PNS在某种程度上能够抑制Daxx、Fas蛋白表达,而相应减少造血细胞的凋亡,同时也能通过上调NFkB、c-Rel转录因子,促进细胞增殖,并阻止半胱天冬酶(caspase)连锁链的活化而抑制造血细胞凋亡,这为PNS应用于临床治疗凋亡过度的疾病如再生障碍性贫血提供了可能性。
- 陈小红高瑞兰郑智茵钱煦岱徐卫红
- 关键词:三七皂苷造血细胞DAXXNFKBC-REL
- 白花蛇舌草提取物对HL-60细胞系抑制增殖及作用机理的研究
- 目的:通过观察白花蛇舌草提取物对 HL- 60细胞增殖抑制作用,探讨白花蛇舌草抑制白血病细胞克隆增殖及作用机理。方法:选 HL-60细胞作为靶细胞,采用 MTT 法观察不同浓度的白花蛇舌草提取物对 HL -60细胞增殖的...
- 陈小红高瑞兰钱煦岱王潇
- 关键词:白花蛇舌草抑制增殖HL-60细胞系
- Th17细胞在特发性血小板减少性紫癜发病中的作用和意义被引量:18
- 2016年
- 目的:本研究探讨Th17细胞在特发性血小板减少性紫癜(ITP)发病中的作用和意义。方法:采用FCM检测ITP患者组和正常对照组外周血中Th17细胞的比例;ELISA技术检测上述两组血浆中IL-17、IL-23、IL-6和TGF-β1的表达水平;RT-PCR技术检测外周血单个核细胞(PBMNC)中IL-17和RORγt mRNA的表达水平;Westernblot法检测PBMNC中pSTAT3和RORγt蛋白的表达水平。结果:ITP患者外周血Th17细胞比例较正常对照组显著升高,血浆中IL-17、IL-23、IL-6和TGF-β1水平明显高于正常对照组(P<0.01);ITP患者PBMNC中IL-17和RORγt mRNA表达水平明显高于正常对照组(P<0.05);p STAT3和RORγt蛋白的表达水平明显高于正常对照组(P<0.05))。结论:在ITP发生和发展中,Thl7细胞亚群比例增高可能是一个重要的决定因素,Th17细胞相关的细胞因子及转录调控因子水平的变化与ITP发病密切相关。
- 王潇周郁鸿陈小红尹利明赵燕娜沃立科
- 关键词:特发性血小板减少性紫癜TH17细胞白介素-17
- 苦参碱对不同分子亚型弥漫大B细胞淋巴瘤的体外抗肿瘤功能研究
- 目的 探索苦参碱对生发中心B细胞型(GCB型)和活化B细胞型(ABC型)弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的体外抗肿瘤效果.方法 以DLBCL的GCB型细胞株SU-DHL-16和ABC型细胞株OCI-LY3作为细胞模型.
- 顾建友沈建平陈小红王潇康曦高瑞兰
- 关键词:苦参碱DLBCL分子亚型细胞周期
- 肿节风注射液对U937细胞的增殖抑制作用及CD_(80)、CD_(86)分子表达的影响被引量:3
- 2014年
- 目的:观察肿节风注射液(sarcandra glabra injection,SGI)对白血病U937细胞的增殖抑制作用及共刺激分子CD80、CD86表达的影响。方法:选用白血病U937细胞作为靶细胞,采用MTT法观察不同浓度的SGI对体外培养U937细胞的增殖抑制作用;流式细胞术检测药物处理前后细胞凋亡百分率及细胞表面共刺激分子CD80、CD86表达;激光共聚焦显微镜观察药物处理后U937细胞凋亡早、晚期的形态学变化;DNA凝胶电泳观察典型DNA梯形条带。结果:MTT显示不同浓度的SGI对白血病U937细胞均有不同程度的增殖抑制作用。与对照组比较,低浓度(1.83g/L)差异不明显,但随药物浓度(2.75-7.32g/L)的增加,抑制作用呈剂量依赖性(P〈0.05,P〈0.01)。流式细胞术检测结果显示药物处理48小时后,Annexin-V+/PI-的百分率随SGI浓度增加而明显升高。激光共聚焦显微镜发现细胞凋亡早期,细胞膜上Annexin-V表达阳性(Annexin-V+),核阴性(PI-);凋亡晚期两者均表达阳性。DNA凝胶电泳清晰可见典型的DNA梯形条带。对CD80、CD86表达检测显示,不同浓度的SGI处理24小时后,CD80表达分别为4.1%-16.5%;CD86则需要处理48小时后,随浓度增加而升高(2.5%-20.7%),但两者均与时间无依赖性。结论:SGI在一定浓度下能抑制白血病U937细胞增殖,诱导细胞凋亡,在SGI的诱导下,表面共刺激分子CD80、CD86表达均有不同程度的增加。
- 陈小红高瑞兰沈一平钱煦岱尹利明王潇
- 关键词:U937细胞
- MIR-223对粒细胞性白血病细胞增殖影响及作用机理
- 目的:通过在体外将miR-223转染至粒系白血病细胞株(HL-60、NB4),观察其对粒系白血病细胞增殖作用的影响,来探讨miR-223对白血病细胞诱导分化及作用机理。方法:以白血病HL-60、NB4细胞株为靶细胞,采用...
- 陈小红高瑞兰钱煦岱王潇徐丹尹利明周郁鸿
- 关键词:粒细胞性白血病MIR细胞增殖白血病细胞影响及作用
- β-七叶皂苷诱导HL-60细胞调亡的研究
- 目的:观察不同浓度的β-七叶皂苷(从天师栗果实提取的主要活性成分)是否具有诱导髓性白血病 HL-60的细胞株的凋亡作用。
- 成志高瑞兰陈小红金锦梅
- 关键词:HL-60细胞诱导凋亡