王元伦 作品数:66 被引量:235 H指数:9 供职机构: 南京军区疾病预防控制中心 更多>> 发文基金: 江苏省自然科学基金 江苏省科技攻关计划 军队医药卫生科研基金 更多>> 相关领域: 农业科学 医药卫生 生物学 更多>>
猪瘟病毒单克隆抗体的研制和应用Ⅰ.抗猪瘟兔化弱毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立与鉴定 被引量:9 1989年 以聚乙二醇(PEG,MW6000)沉淀法部分纯化的猪瘟兔化弱毒中国株(SFV-C)免疫BALB/C小鼠,取其脾脏制备脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经ELISA检测和有限稀释法克隆化筛选出9株对SFV特异的单克隆抗体(McAb)杂交瘤细胞。它们产生的McAb仅对SFV-C株发生特异性反应,而与SFV-S及BV DV Oregon株不发生反应.相加试验表明,9个McAb分别针对不同的抗原决定簇。所有的McAb均不具有沉淀反应特性。 周宗安 刘劲松 房德兴 顾志香 王元伦关键词:猪瘟病毒 单克隆抗体 兔化弱毒 携带猪囊虫表位的嵌合蛋白疫苗的构建及其免疫学研究 被引量:5 2006年 用PCR法将猪囊虫抗原表位n1、n2插入乙肝病毒核心蛋白(HBc)序列的第78~79位之间,将猪囊虫抗原表位n3接在149位之后,再将该序列克隆入pET28a载体中,构建了重组表达质粒pET28a—△c-3n,在大肠杆菌中表达出融合蛋白。命名为PCCE。将PCCE纯化后免疫小鼠,以ELISA检测小鼠的体液免疫应答,Western blot检测抗体的特异性.Dot ELISA验证所选表位的保护性。另用绦虫卵攻击免疫小鼠,以观察疫苗的保护作用。测序结果表明,重组质粒构建成功;SDS—PAGE显示,融合蛋白表达正确,电镜证实有蛋白颗粒形成。对免疫小鼠应用ELISA检测到高滴度抗体;Western blot结果表明。免疫鼠体内诱导出了3种特异性抗体;Dot ELISA结果表明,所逸表位对宿主可能具有保护性。绦虫卵攻击免疫小鼠试验表明,疫苗PCCE的相对保护率为89%。结论:成功地表达和纯化了以HBc为载体的携带3个猪囊虫表位的融合蛋白(PCCE),以PCCE作为疫苗免疫小鼠,能诱导较强的特异性体液免疫反应,免疫小鼠对绦虫卵攻击具有较好的免疫保护作用。 邓小昭 周宗安 刁振宇 高健 王元伦 刘玉 郑纪山关键词:猪囊虫 疫苗 HBCAG 免疫反应 检测HBV基因组nt585位突变的特异性聚合酶链反应 被引量:1 1999年 目的 为调查乙型肝炎病毒(HBV)nt585位A→C变异株在国内的流行情况提供方法学。方法 根据已知的HBV基因组序列并结合国内主要流行adr和adw亚型的特点,合成在nt585位分别为A和C的2套4对引物,建立了突变特异性聚合酶链反应(msPCR)方法。结果 利用msPCR对由25份乙型肝炎免疫失败儿童患者血清和32份成人乙型肝炎患者血清扩增的HBVS基因片段进行了初步检测。结果表明该法可特异性扩增nt585为A和C的HBVDNA。结论 该法是鉴定HBV基因组nt585位A→C变异株的特异而敏感的方法。 房德兴 李法卿 谭维国 王元伦 陈华标 林厚基 周镇先关键词:乙型肝炎病毒 突变 聚合酶链反应 麻雀自然感染鸡传染性法氏囊病病毒的调查 被引量:6 1994年 从鸡传染性法氏囊病(IBD)流行的鸡场捕杀麻雀54只,用鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)单克隆抗体夹心阻断ELISA检测抗体,阳性检出率为7.4%(4/54);以逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)检测病毒核酸,阳性检出率为11.1%(6/54);RT-PCR阳性样本病毒分离亦为阳性。结果表明,IBD流行的鸡场里的麻雀能够发生IBDV自然感染,麻雀可能是IBDV的贮存宿主或二次传染源之一。 王永山 周宗安 翟春生 王元伦 方元 顾志香 王军 肖元廷关键词:麻雀 IBD IBDV ELISA 猪瘟病毒单克隆抗体的研制和应用——抗猪瘟兔化弱毒单克隆抗体的纯化 被引量:9 1991年 采用硫酸铵3次沉淀法和辛酸-硫酸铵法对4个IgG亚类(IgG_1,IgG_2a,IgG_2b,IgG_3)单克隆抗体腹水进行了纯化,以间接ELISA检测纯化前后样品的活性,经十二烷基硫酸钠-聚丙稀酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析纯化前后样品的纯度。结果表明,两种方法均可较为有效地去除腹水中的杂蛋白,获得用于诊断目的的单克隆抗体纯品。硫酸铵3次沉淀法适用于纯化所有IgG亚类的单克隆抗体,而辛酸-硫酸铵法不适于IgG_3亚类。 房德兴 王元伦 周宗安 刘劲松 顾志香关键词:猪瘟 病毒 单克隆抗体 免疫抑制对苏拉灭和贝尼尔治疗小鼠伊氏锥虫病疗效的影响 1995年 用从自然感染宿主分离的伊氏锥虫(Trypanosomaevansi)原种JG的克隆JGmcl和JGmc5感染免疫活性正常小鼠和免疫抑制小鼠,24h后,以苏拉灭或贝尼尔治疗,两种药物对免疫抑制小鼠的CD100均明显高于免疫活性正常小鼠。由经受一次苏拉灭或贝尼尔治疗未愈的免疫抑制小鼠分离的锥虫,感染免疫活性正常小鼠,再用原来对该克隆感染的免疫活性正常小鼠CD100的苏拉灭或贝尼尔治疗即无效。用免疫溶解试验分别测定一组免疫抑制和免疫活性正常小鼠感染后7d的血清,前者均为阴性,后者均为阳性,几何平均滴度1:102.3。抗体水平和虫血症消失与否密切相关。免疫抑制不仅显著降低抗锥虫化疗的效果,而且会导致产生抗药的锥虫;抗体的产生受抑制可能是引起上述效应的一个重要因素。 方元 叶万祥 聂海洋 王元伦关键词:伊氏锥虫病 免疫抑制 抗药性 抗体 应用免疫酶染色法检测鸡病毒性关节炎病毒的研究 被引量:2 1995年 用免疫酶染色法检测Vero细胞培养物、陈旧石蜡切片和人工感染试验鸡组织中的AVAV,并比较了AVAV强毒和弱毒株在组织中的分布情况。结果发现,试验鸡于感染AVAV弱毒株后1~5天、感染AVAV强毒株后1~9天出现病毒血症;跗关节、跖趾关节、趾关节、趾屈肌健、脾脏、肝脏等组织中病毒的检出率最高,存在时间也最长;在感染后3~20天于感染鸡法氏囊、感染后3~11天于感染鸡胸腺中检出了强毒株,在这两组织中未检出AVAV弱毒株。感染8小时后的Vero细胞培养物和陈旧石蜡切片均被检出AVAV。 唐雨德 周宗安 翟春生 王元伦 顾志香关键词:免疫酶染色法 鸡病 病毒性关节炎 病毒 猪瘟抗体三种检测方法的比较试验 被引量:1 1993年 对猪瘟兔化弱毒疫苗免疫母猪所生的仔猪,在接种疫苗前、后采集1116份血清样本,同时用HRP—SPA—ELISA、IHA和ID等三种方法进行比较检测,三种方法的阳性率分别为100%、90.77%和69.59%. 周宗安 刘劲松 房德兴 王元伦 顾志香 钟大璋 张元 崔玉仓 许家彦 王丽 宣华 费恩阁关键词:猪瘟 抗体 猪病 抗鸡传染性法氏囊病和鸡新城疫二联卵黄抗体的制备及其疗效观察 被引量:4 1993年 鸡传染性法氏囊病(IBD)和鸡新城疫(ND)是严重危害养禽业发展的两大疫病.据调查,两病的混合感染率可达70%~80%,混合感染的发病鸡群,病死率在80%以上.因此。 王永山 周宗安 翟春生 方元 顾志香 王元伦 肖元庭关键词:鸡病 IBD 新城疫 体外培养布氏锥虫伊氏亚种的葡萄糖代谢 1993年 布氏锥虫伊氏亚种[Trypanosoma(Trypanozoon brucei evansi)下简称伊氏锥虫]在宿主体内以葡萄糖作为能量来源,葡萄糖被酵解为丙酮酸排入体液。其在体外的存活和培养都需有葡萄糖存在。伊氏锥虫病病畜呈现低血糖。为了解体外培养伊氏锥虫的葡萄糖代谢。 方元 聂海洋 叶万祥 王元伦关键词:布氏锥虫 葡萄糖代谢