王丽春
- 作品数：105 被引量：254H指数：7
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 人结缔组织生长因子及其制备方法
- 本发明公开了一种人结缔组织生长因子(HCTGF)及其制备方法,包括以下步骤:从初产妇的胎盘脐静脉得到可维持培养的人脐静脉内皮细胞;再从经PDGF刺激的人脐静脉内皮细胞中提取的mRNA经过逆转录PCR扩增得到CTGFcDN...
- 李琦涵赵红玲王炯王丽春赵树栋孙明和绍清董承红胡方刘龙丁董少忠王晶晶马绍辉
- 白细胞介素-6对肠道病毒71型感染乳鼠致病理损伤的促进作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)对肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)感染乳鼠致病理损伤的促进作用。方法以ICR乳鼠为感染模型,在EV71感染过程中同时注射IL-6或抗-IL-6抗体,以单独注射IL-6和注射PBS作为对照。接种后每天观察存活乳鼠的数量及活动体征,持续观察11 d,计算乳鼠存活率;Real-time PCR法检测各组乳鼠脑组织中的病毒载量;HE染色观察乳鼠脑组织的病变情况。结果脑部注射局部环境内提高IL-6的含量,能促进EV71对乳鼠的致病作用,可显著促进乳鼠的死亡;脑内注射抗-IL-6抗体对EV71脑内注射的乳鼠具有一定的保护作用。结论 IL-6在EV71感染时对乳鼠的致病具有促进作用,其在中枢神经系统的增高可能参与了EV71感染的免疫病理过程。
- 王丽春廖芸王晶晶张莹刘龙丁李琦涵
- 关键词：白细胞介素-6肠道病毒71型
- 肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响被引量：2
- 2019年
- 目的探讨肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsakievirus A 16,CA16)VP1蛋白在人支气管上皮细胞中对天然免疫相关信号分子的表达及T细胞免疫反应的影响。方法经RT-PCR法扩增EV71和CA16的VP1序列,插入至载体pcDNA3. 1(+),构建重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1。分别转染人支气管上皮细胞16HBE,于转染后24、48和72 h收集样本,进行细胞内天然免疫相关信号分子表达的检测和刺激T细胞增殖的检测。结果经双酶切及测序鉴定,重组真核表达质粒pcDNA-EV71-VP1和pcDNA-CA16-VP1构建正确。与阴性对照组比较,EV71-VP1组IFNγ、OX40L、RANKL、TNF-α和IL-2的水平上调,而CA16-VP1组的上调幅度较小。EV71-VP1及CA16-VP1组16HBE细胞的胞内外提取物均可明显刺激分泌IFNγ的T细胞增殖(P <0. 05)。结论 EV71和CA16 VP1蛋白在人上皮细胞16HBE中表达后,可差异性诱导细胞中天然免疫信号分子表达及相似的非特异性刺激T细胞增殖能力。
- 李好张莹王丽春姜莉范胜涛杨二霞董承红蒋国润张小龙廉亚茹李琦涵
- 关键词：肠道病毒71型柯萨奇病毒A组16型获得性免疫
- 人未成熟朗格汉斯细胞的分选及鉴定
- 2018年
- 目的分离并鉴定健康人皮肤组织内未成熟状态的朗格汉斯细胞(LC)。方法把取得的人包皮组织剪成特定大小后采用分散酶Ⅰ(dispaseⅠ)消化过夜,分离表皮和真皮;Ⅰ型胶原蛋白酶在37℃消化表皮组织2 h并结合摇床振荡制成单细胞悬液,通过特异性的分子标志物,应用流式细胞仪分选获得人CD3^-CD14^-CD1a^+CD45^+LC,采用免疫荧光技术检测CD207的表达对其进行鉴定,并用台盼蓝染色检测其活力。结果分选得到未成熟LC,纯度为91. 31%,平均存活率为93. 16%。结论成功分选获得活力好、纯度高的未成熟人LC。
- 王建斌王丽春柳蕾吴化叶程继帅李琦涵
- 关键词：流式细胞仪
- CTGF与FGF在促成纤维细胞增殖过程中的基因反应差异被引量：4
- 2001年
- 结缔组织生长因子(CTGF)是某些内皮细胞即刻早期基因反应产物,其与FGF具有类似的促进成纤维细胞(KMB-17)增殖的功能;在此促增殖过程中CTGF和FGF所诱导的基因反应有所差异,CTGF诱导细胞表达c-myc,而FGF促进c-fos表达增加;此外两种因子均诱导与酪氨酸磷酸化过程密切相关的src基因表达,免疫沉淀证实CTGF结合细胞表面受体后可诱导细胞内相应蛋白的酪氨酸磷酸化。
- 王炯董承红王丽春孙明李琦涵
- 关键词：CTGFFGF成纤维细胞增殖蛋白磷酸化
- 腮腺炎病毒分离株(SP株)SH基因及其旁侧序列的初步分析被引量：8
- 2006年
- 目的比较腮腺炎病毒分离株SP株与其他野毒株的序列差异,以确定其遗传特征。方法将2005年在云南省石屏县收集到的腮腺炎患儿唾液标本,于Vero细胞培养7 d后观察病变并分离收获病毒,用血细胞吸附试验验证。同时提取病毒RNA,采用反转录-套式聚合酶链反应(RT-nPCR)法从病毒RNA中扩增出SH基因及其旁侧序列,测序并以VectorNT16．0软件分析。结果SH基因旁侧区序列分析表明:SP株与国内已知野毒株具有明显的亲缘关系,在SH基因旁侧区范围内的序列一致性为93％～96％,差异均＜8％。氨基酸序列分析发现:该毒株与其他国内野毒株在此区域中的氨基酸序列一致性为93．3％～98．25％,与Wlz2株的遗传距离最近。结论SP株属于F基因亚型。
- 马绍辉张蓉松刘龙丁王晶晶王丽春杨文军梁燕杨子江李琦涵
- 一种重组蛋白K-S及其制备方法和应用
- 本发明公开了一种重组蛋白K‑S及其制备方法和应用，属于生物技术领域，方案包括在所述S1蛋白的核苷酸序列上，对6个关键位点进行突变，突变位点及碱基分别为：G1251T，T1355G，G1450C，A1501T，A1841G...
- 李琦涵范胜涛徐兴丽李丹丹赵恒于丽蒋国润廖芸张莹王丽春张晶晶段素琴高扬曾烽原徐祥雄
- 一种基于新型冠状病毒突刺蛋白S1区域预防新型冠状病毒感染的亚单位疫苗
- 本发明提供了一种基于新型冠状病毒突刺蛋白S1区域预防新型冠状病毒感染的亚单位疫苗，属于疫苗领域。所述亚单位疫苗包括新型冠状病毒突刺蛋白S1区域抗原和佐剂，通过皮下或肌肉注射施用2‑3次，用于预防新型冠状病毒。本发明所述的...
- 刘存宝曹晗王云飞王丽春
- 丙型肝炎病毒多表位抗原重组体免疫原性分析被引量：2
- 2003年
- 目的 研究丙型肝炎病毒 (HCV)多表位抗原重组体在大肠杆菌中的非融合表达及其免疫原性分析。方法 利用DNA重组技术将构建的HCV多表位抗原重组体克隆入原核表达载体pBV2 2 0并在BL 2 1中表达 ,非融合表达蛋白经SDS PAGE检测 ,排阻层析纯化 ,利用ELISA和免疫印迹分析其抗原反应性。免疫昆明鼠和猕猴 ,并检测其抗体和特异性CTL(Cyto toxicTlymphocyte) ,在抗体转阴后再次用HCV病人血清攻击以检测其免疫应答能力。结果 HCV多表位重组体在pBV2 2 0 BL 2 1中表达量占菌体总蛋白量的 15 %。Western blot和ELISA分析表明HCV多表位抗原能与HCV病人血清特异性结合 ,抗体水平和特异性CTL检测结果显示该抗原肽能诱导小鼠和猕猴产生较好的抗体水平和特异性CTL效应。用病人血清再次攻击后受试动物的抗体迅速阳转。
- 胡方董承红董少忠王丽春孙明王晶晶刘龙丁马绍辉陈丽珊任大明李琦涵
- 关键词：丙型肝炎病毒免疫原性大肠杆菌
- 一种SR－15蛋白分子的用途
- 本发明公开了一种SR-15蛋白分子的用途。涉及分子生物学技术领域。该蛋白分子基因全长为904bp，其具有完整的5′-非编码区和3′-非编码区，编码区可编码一个由121个氨基酸组成的蛋白质，分子量为14.9KD，该蛋白结构...
- 李琦涵董承红王丽春刘龙丁赵红玲姜莉孙明王炯董少忠王晶晶赵树栋胡方易红昆
