庞海林
- 作品数：20 被引量：39H指数：3
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 脂多糖诱导肿瘤坏死因子释放因子基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定
- 2016年
- 探讨构建人脂多糖诱导肿瘤坏死因子释放因子(LITAF)基因的过表达慢病毒载体的技术方法,并检测其体外表达目的基因的水平。设计LITAF基因引物,应用聚合酶链反应(PCR)的方法扩增LITAF基因片段;应用EcoRI、Bam HI酶切LV8载体,通过连接酶将LITAF基因片段连接至线性化的LV8载体上,应用酶切及测序方法鉴定LITAF-LV8重组质粒,将其包装慢病毒后感染293T细胞(人胚肾细胞),观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达,验证后感染肝癌细胞株HepG2。RT-PCR和Westernblot鉴定感染后HepG2中LITAF的表达。LITAF基因在慢病毒感染的HepG2细胞中的表达显著高于对照组细胞。说明成功构建了过表达LITAF的HepG2细胞株,为后期研究提供了实验基础。
- 姜勋亮张贺龙张峰康艳霞附舰庞海林闵婕
- 关键词：慢病毒过表达肝细胞肝癌
- 埃兹蛋白的表达与非小细胞肺癌转移的关系研究被引量：2
- 2014年
- 目的:探究埃兹蛋白(Ezrin)的表达与非小细胞肺癌转移的关系。方法:通过免疫组化检测Ezrin在有无转移的非小细胞肺癌组织中的表达差异,通过细胞免疫组化、western-blot、RT-PCR检测Ezrin在不同转移潜能肺癌细胞系中的表达差异,通过transwell考察Ezrin对不同转移潜能癌细胞侵袭和迁移能力的影响。结果:Ezrin蛋白在有转移的非小细胞肺癌组织中的表达水平明显高于无转移的肺癌组织,在高转移潜能肺癌细胞系中的表达高于低转移潜能细胞系,受抑制时会削弱高转移潜能肺癌细胞的迁移和侵袭能力,过表达时会增强低转移潜能肺癌细胞的侵袭和迁移能力。结论:Ezrin可能在非小细胞肺癌及其转移中发挥重要作用。
- 赵强庞海林马宁强周菁张峰刘乐乐张贺龙
- 关键词：埃兹蛋白非小细胞肺癌
- Shugoshin1在非小细胞肺癌多西紫杉醇耐药中的作用被引量：3
- 2013年
- 目的:探讨Shugoshin1在非小细胞肺癌A549细胞对多西紫杉醇耐药中的作用。方法:用Western-blot及RT-PCR检测Sgo1在非小细胞肺癌紫杉醇耐药细胞株A549/Taxotere及亲本A549中的表达差异。通过构建Sgo1的si-RNA质粒和过表达质粒经慢病毒包装分别转染A549/Taxotere及亲本A549细胞,利用Western-blot及RT-qPCR鉴定其干预效果。MTT比色法比较下调及上调Sgo1的表达后细胞对化疗药物多西紫杉醇敏感性的影响。结果:在非小细胞肺癌多西紫杉醇耐药细胞株中,Sgo1的表达明显高于其亲本细胞株A549。通过外源性筛选和鉴定,经慢病毒包装载体,成功构建了Sgo1表达上调和下调的细胞株;MTT试验发现:抑制Sgo1的表达能显著增加A549/Taxotere对多西紫杉醇的敏感性,而外源性上调Sgo1的表达能明显降低A549对多西紫杉醇的敏感性。结论:Sgo1的表达与非小细胞肺癌细胞株A549紫杉醇耐药性密切相关。
- 刘佳钰周菁庞海林裴艳蕾张宁张峰刘理礼张贺龙
- 关键词：非小细胞肺癌多西紫杉醇耐药
- Sema3A在胃癌增殖和侵袭中作用的初步研究被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨Sema3A在胃癌增殖和侵袭中的作用。方法:构建Sema3A正义表达载体,经慢病毒包装,感染胃癌高转移潜能MKN-28M细胞,获得外源性稳定表达的Sema3A胃癌细胞株。利用MTT法、克隆形成实验、细胞凋亡实验观察Sema3A过表达对胃癌细胞生长增殖能力的影响。Transwell侵袭实验观察Sema3A过表达对胃癌细胞体外侵袭转移能力的影响。结果:慢病毒包装Sema3A正义表达载体转染入胃癌细胞MKN-28M后,有效增加了Sema3A基因的表达。Sema3A慢病毒包装载体感染MKN-28M细胞后,与对照组相比,细胞生长、增殖速度明显减慢(P<0.05),克隆形成率明显下降(P<0.05),细胞凋亡明显增加(P<0.05),体外侵袭试验表明外源性上调Sema3A显著降低了高转移细胞系MKN-28M的侵袭转移能力(P<0.05)。结论:成功构建了外源性过表达Sema3A基因的慢病毒载体,上调Sema3A基因的表达显著降低了胃癌高转移系MKN-28M细胞的生长增殖能力,抑制了侵袭转移能力,提示Sema3A在抑制胃癌的发生发展中具有重要作用。
- 骞佩王亚芳庞海林张贺龙刘理礼
- 关键词：SEMA3A胃癌增殖
- 过表达GDF15对肺腺癌细胞A549增殖、迁移和侵袭能力的影响被引量：2
- 2018年
- 目的:探究GDF15在体外对人肺腺癌细胞株A549生物学行为的影响,为肺癌防治提供新的靶点。方法:通过质粒转染的方法,构建GDF15过表达和neo空载体的A549细胞株,运用MTT法、平板克隆和Transwell的实验方法,观察过表达GDF15对A549细胞株生物学行为的影响。结果:成功构建GDF1 5过表达的A549-GDF15细胞株和neo空载体的A549-neo细胞株。与空载体细胞株相比,过表达GDF15能够抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结论:GDF15在体外可抑制肺癌细胞的增殖及迁移。
- 段炼庞海林蔡燕飞刘理礼张贺龙
- 关键词：GDF15肺腺癌
- EMT参与人非小细胞肺癌A549细胞多西紫杉醇耐药
- 目的：建立耐多西紫杉醇的人非小细胞肺癌细胞株A549/Docetaxel,并初步探索与上皮间质转化(EMT)的关系.方法：用抗肿瘤药物多西紫杉醇体外以浓度递增和短时反复作用的方法诱导和筛选人非小细胞肺癌A549细胞；用M...
- 庞海林刘理礼张贺龙周菁刘佳钰张峰刘乐乐骞佩崔兆勋赵强马宁强
- 关键词：EMT非小细胞肺癌细胞多西紫杉醇耐药
- 下调ZEB-1表达对非小细胞肺癌A549细胞增殖、迁移与侵袭的影响
- 2015年
- 目的:探讨ZEB-1对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。方法:构建干扰ZEB-1的质粒,转染至A548细胞株,运用体外增殖、迁移、侵袭实验来观察ZEB-1表达下调后对非小细胞肺癌细胞株A549生物学行为的影响。结果:下调ZEB-1的表达可降低A549细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。结论:ZEB-1表达水平与非小细胞肺癌侵袭转移的能力显著相关。
- 牛玉捷信波庞海林刘乐乐申炜炜张贺龙
- 关键词：非小细胞肺癌RNA干扰
- BMP 7对小细胞肺癌细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨重组人BMP 7(bone morphogenetic protein-7,rh BMP 7)在体外对人小细胞肺癌(SCLC)细胞株SBC-3和SBC-5生物学行为的影响,为开发新的抗癌药物提供理论依据。方法:设置不同的rh BNP 7浓度梯度(0、50、100、150、200ng/ml)和时间梯度(24、48、72h)作用于SBC-3细胞和SBC-5细胞。MTT法检测细胞增殖情况,探索rh BMP 7的有效作用浓度和作用时间。选择有效作用浓度作用于SBC-3/5细胞,观察撤离rh BMP 7后细胞增殖的变化,并用流式细胞仪分析rh BMP 7对细胞凋亡和周期的影响。结果:rh BMP 7在体外对SBC-3细胞和SBC-5细胞的增殖有抑制作用,且有一定的浓度依赖性,有效作用时间为48h。rhBMP 7撤离后肿瘤细胞的增殖可以得以恢复。进一步研究还发现rh BMP 7可以抑制SBC-3和SBC-5细胞的迁移和侵袭能力。流式细胞仪分析rh BMP 7不影响SBC-5细胞的凋亡率,但会诱导SBC-3细胞的凋亡(P<0.05)。同时,rh BMP 7处理组中G1期的细胞比率有所升高,S期的细胞有所减少;并且这一影响在SBC-3细胞中更为明显。结论:rh BMP 7可以抑制SBC-3和SBC-5细胞的增殖,且抑制作用具有浓度和时间依赖性。rh BMP 7并不影响SBC-5细胞的凋亡,但会诱导SBC-3细胞的凋亡。因rh BMP 7可以增加G1期细胞的比率,推测可能是通过诱导细胞周期阻滞抑制肿瘤细胞增殖,从而为SCLC的治疗提供新的思路。
- 申炜炜庞海林牛玉捷崔兆勋汪建林刘理礼张贺龙
- 关键词：小细胞肺癌BMP7肿瘤治疗
- 血管内皮抑制素的不同给药方法对肺癌A549细胞和脐静脉内皮细胞生长的影响
- 2012年
- 目的:探讨血管内皮抑制素的不同给药方法对A549肺癌细胞、脐静脉血管内皮细胞及BALB/c裸鼠移植瘤生长的影响。方法:用不同浓度的血管内皮抑制素作用于A549细胞及脐静脉血管内皮细胞,用MTT法检测其对细胞增殖的影响;构建BALB/c裸鼠A549移植瘤模型,观察不同给药方法下肿瘤体积、重量的变化;应用免疫组化法检测肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达差异。结果:在各组不同浓度的血管内皮抑制素作用下,A549细胞增殖能力并未随抑制素浓度的增加而降低,仅在浓度为1μg/ml时与对照组有差异(P<0.05);脐静脉血管内皮细胞增殖能力与对照组比较均无统计学意义(P>0.05)。在体内实验中,单独使用血管内皮抑制素及血管内皮抑制素联合顺铂治疗,各实验组肿瘤体积较对照组均有不同程度的缩小(P<0.05),联合用药疗效优于单用血管内皮抑制素;单独使用血管内皮抑制素时隔日给药肿瘤抑制率最高(50.74%),联合用药3周(血管内皮抑制素1次/日+顺铂1次/周)抑瘤效果最好(96.41%);免疫组织化学结果显示各实验组肿瘤组织中CD31和CD34分子的表达均下降(P<0.05)。结论:血管内皮抑制素在体外浓度为1μg/ml时对A549细胞生长有抑制作用,而对脐静脉内皮细胞生长没有明显抑制作用。血管内皮抑制素与顺铂联合使用较单独使用的抑瘤效果明显。血管内皮抑制素联合化疗时,每日连续给药抑瘤效果更好。
- 赵强王华贝庞海林马宁强张贺龙
- 关键词：血管内皮抑制素A549细胞
- 下调IQGAP1的表达对非小细胞肺癌PC14/B细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:探究IQGAP1对非小细胞肺癌细胞株PC14/B生物学行为的影响。方法:构建干扰IQGAP1的质粒,转染至PC14/B细胞株,体外增殖、迁移、侵袭实验观察下调IQGAP1表达后对非小细胞肺癌细胞株PC14/B生物学行为影响。结果:成功构建IQGAP1表达下调的细胞株RNAi-PC14/B。与转染空载体的细胞株相比,下调IQGAP1的表达能够抑制PC14/B细胞增殖、迁移和侵袭能力。结论:IQGAP1表达可能与肺癌转移相关。
- 刘乐乐庞海林骞佩崔兆勋申炜炜牛玉捷张贺龙
- 关键词：IQGAP1小干扰RNA非小细胞肺癌
