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免疫磁珠捕获富集结合HPLC-Q-TOF/MS技术分析复杂水样中的蓖麻毒素被引量：3: 2015年; 以自来水、海水以及国际禁化武组织（OPCW）官方水平考试水样为背景基质,在优化仪器参数的基础上,建立了3种水样基质中蓖麻毒素的高效液相色谱-四极杆/飞行时间质谱（HPLC-Q-TOF/MS）分析方法。蓖麻毒素在3种基质中的检出限分别为0.05,0.20,1.00μg/m L,HPLC-Q-TOF/MS测得蓖麻毒素的分子量为62 884.97 Da。为提高复杂水样的分析灵敏度,采用连接有蓖麻毒素单克隆抗体6A6的免疫磁珠对不同水样中的蓖麻毒素进行富集与纯化,利用酶联免疫吸附（ELISA）法绘制了免疫磁珠捕获方法的工作曲线,在5.00~100μg/m L线性范围内,不同浓度加标样品的回收率为82.1%~88.8%,相对标准偏差为4.2%~5.9%。将免疫捕获技术与HPLC-Q-TOF/MS分析方法相结合,对真实蓖麻毒素加标样品进行分析,3种基质中蓖麻毒素的检出限分别达2.5,10,50 ng/m L。本方法可用于水样中痕量蓖麻毒素的快速、有效检测。; 梁龙辉刘石磊于惠兰高川周世坤; 关键词：蓖麻毒素水样

基于不同蛋白酶切策略的蓖麻毒素新型肽段标志物的液相色谱-高分辨质谱筛选与鉴定: 梁龙辉刘石磊刘昌财于惠兰杨旸陈博; 关键词：蓖麻毒素质谱

巯基化衍生结合分散液相微萃取-气相色谱/串联质谱-选择反应监测技术测定尿样中超痕量氯乙烯基胂酸被引量：2: 2016年; 目的建立路易氏剂染毒尿样中超痕量氯乙烯基胂酸(CVAOA)的分析检测方法。方法采用正交实验,优化分散液相微萃取(DLPME)条件,优化结果为:将250μl甲醇(分散溶剂)、250μl乙酸乙酯(萃取溶剂)、3,4-二巯基甲苯(DMT)(衍生试剂,用量满足摩尔比CVAOA∶DMT=1∶100)混合液,加入到p H=1的1 ml尿样中,90℃衍生并萃取60 min,使用气相色谱/串联质谱-选择反应监测模式〔GC/MS/MS(SRM)〕对衍生产物进行定性定量分析。结果本法在50 pg/ml^1μg/ml浓度范围内呈现良好的线性(r2=0.9999),相对标准偏差(RSD)<10%,检出限可达18 pg/ml,定量限为56 pg/ml,远低于已报道的DLPME分析方法。对低、中、高3种浓度(0.5、5和50 ng/ml)的路易氏剂染毒尿样进行检测,准确度为98.2%~104%,RSD为6.9%~8.9%。结论本文所建方法灵敏度高,专属性好,准确度和精密度良好,且操作简单,适用于真实染毒样品分析。; 吴姬娜刘石磊杨旸梁龙辉刘景全; 关键词：路易氏剂分散液相微萃取尿样

Trypsin/Glu-C串联酶解质谱法唯一性鉴定蓖麻毒素: 蓖麻毒素(ricin)是一种提取于天然植物蓖麻(Ricinus communis)种子中的一种II 类型核糖体失活蛋白(RIP-Ⅱ)。由于蓖麻凝集素(RCA120)等其他RIP-Ⅱ蛋白与ricin 序列高度同源，但毒性差...; 梁龙辉刘昌财闫珑于惠兰杨旸陈博吴姬娜李晓森刘石磊; 关键词：蓖麻毒素

超高效液相色谱-串联质谱法同时检测血浆中6种芥子气染毒标识物: 针对芥子气(HD)染毒血液样本的溯源性分析需求,采用超高效液相色谱-ESI-三重四级杆串联质谱技术(UHPLC-ESI-MS/MS),建立了芥子气染毒血浆中6种代谢产物(TDG,TDGO,SMO,SBMSE,MSMTES...; 梁龙辉刘石磊刘昌财黄桂兰向宇于惠兰; 关键词：液质联用芥子气

氟化衍生-固相萃取对水中痕量膦酸的GC-MS检测: 2017年; 针对水中痕量(<1 mg/L)甲基膦酸类化合物进行了GC-MS定性分析检测研究。建立了固相萃取结合氟化物衍生的方法进行样品制备。采用600MHz核磁对氟化物衍生效率进行分析,衍生效率大于99%。采用气相色谱-电子轰击电离质谱(GC-EI/MS)、气相色谱-化学源负电离质谱(GC-NCI/MS)以及气相色谱-选择离子扫描质谱(GC-SIM-MS)分析方法对5种标准物质沙林、梭曼原体以及甲基膦酸异丙酯、甲基膦酸乙酯、甲基膦酸的衍生化产物进行了分析,检出限分别为10,50,0.2,0.1,0.05μg/L,方法的相对标准偏差小于7%。; 李晓森杨旸吴姬娜梁龙辉邢中方李欣海刘石磊; 关键词：固相萃取甲基膦酸

巯基化衍生-气相色谱质谱法对水体及血浆中氰化物的分析检测: <正>本研究针对水体及血浆中的氰化钠进行气相色谱质谱的定性及定量分析检测。本实验选择1-丁基硫醇对水中的氰化钠进行衍生,将水中的氰离子衍生成为硫氰酸丁酯,从而能够进行质谱分析检。对于样品制备过程进行优化,通过对体系pH值...; 李晓森吴姬娜闫珑于惠兰梁龙辉周世坤刘石磊; 关键词：氰化钠 GC/MS分析血浆; 文献传递

超高效液相色谱-串联质谱法同时检测人血浆中6种芥子气染毒标识物被引量：4: 2016年; 针对芥子气(HD)染毒血浆的溯源性分析需求,采用超高效液相色谱-串联质谱技术(UHPLC-MS/MS),建立了人血浆中6种HD生物标识物(TDG,TDGO,SMO,SBMSE,MSMTESE,SBSNAE)的高灵敏度和专属性检测方法。应用甲醇和乙腈混合有机溶剂沉淀HD染毒血浆中的蛋白,然后用HLB柱固相萃取(SPE)纯化,经超高效液相色谱梯度洗脱分离,在三重四极杆串联质谱正离子多反应监测(MRM)模式下进行定性与定量检测。结果表明,6种目标物的线性范围为0.05~500 ng/mL(R^2=0.9840~0.9955),检测限在0.01~1.0 ng/mL之间,各分析物的精密度(n=5)≤5.5%,加标回收率在86.5%~110.8%之间。本方法通过SPE的引入和UHPLC程序的优化,有效地解决了基质背景对分析可靠性的影响问题,并成功应用于国际禁止化学武器组织(OPCW)第5次生物医学样品分析演练HD染毒血浆样品的鉴定。; 梁龙辉刘石磊刘昌财黄桂兰向宇李欣海于惠兰; 关键词：超高效液相色谱-串联质谱芥子气血浆

基于UHPLC-MS/MS分析痕量芥子气染毒血样中血红蛋白加合物被引量：1: 2019年; 芥子气可以与血红蛋白的组氨酸侧链发生反应,生成芥子气暴露染毒的生物标志物。本研究建立了定性、定量检测痕量芥子气暴露染毒人血红蛋白加合物的方法。采用2-氯乙基乙基硫醚(2-CEES)染毒的血红蛋白溶液作为内标,用链霉蛋白酶对芥子气-珠蛋白加合物进行酶解,经PPL柱固相萃取纯化以及苄氧羰基氯(Cbz-Cl)衍生,使用超高效液相色谱-串联质谱(UHPLC-MS/MS)进行分析检测。经过优化实验条件,最终选择链霉蛋白酶的酶解温度55℃,酶解时间10.0 h,使用3.0 mL 5%甲醇水溶液淋洗,1.0 mL 50%甲醇水溶液洗脱,Cbz-Cl衍生时间30 min。结果表明,在10.0~1 000μg/L线性范围内,线性关系良好(R^2>0.997),准确度为89.8%~113%,精密度(RSD)不高于12.4%,检出限(LOD)为10.0μg/L(S/N>5)。该方法采用2对离子对进行确证,有助于痕量芥子气暴露染毒的溯源性分析,与传统酸解法相比,该方法样品处理时间短,反应条件温和、操作简单,且灵敏度可提高约150倍。; 陈博陈博刘石磊于惠兰梁龙辉刘石磊吴姬娜刘昌财; 关键词：芥子气人血红蛋白

剧毒性Ⅱ型核糖体失活蛋白蓖麻毒素和相思子毒素的检测鉴定方法研究进展被引量：3: 2021年; Ⅱ型核糖体失活蛋白(RIPs)是一类重要的蛋白毒素,该类毒素大都具有一对二硫键连接的A-B链结构特征,B链具有半乳糖结合特性,能够与真核细胞膜表面受体特异性结合,将具有N-糖苷酶活性的A链导入细胞,与核糖体特定位点发生脱嘌呤作用使核糖体失活,最终通过抑制蛋白质合成而展现出细胞毒性。Ⅱ型RIPs毒素毒性极强,来源于植物的蓖麻毒素(ricin)和相思子毒素(abrin)的毒性分别是神经性毒剂维埃克斯(Vx)的385倍和2885倍。同时,该类毒素来源广泛、易于制备、稳定性好,成为一类潜在化生恐怖战剂,受到国内外广泛关注,其中蓖麻毒素作为唯一的蛋白毒素被收录于禁止化学武器公约禁控清单。近年来发生的多次蓖麻毒素邮件恐怖事件,进一步促进了有关Ⅱ型RIPs毒素的准确、灵敏、快速的检测鉴定技术的发展。剧毒性Ⅱ型RIPs毒素的检测鉴定方法主要涉及免疫分析法为代表的特异性识别和生物质谱分析为主的定性定量检测方法,以及基于脱嘌呤反应活性和细胞毒性的毒素活性检测方法。基于抗原-抗体作用的免疫检测法及基于寡核苷酸适配体的特异性识别检测法具有速度快、灵敏度高的优势,但对于复杂样品中高度同源蛋白的检测,易产生假阳性结果。随着生物质谱技术的快速发展,电喷雾离化(ESI)或基质辅助激光解吸离化(MALDI)等技术广泛应用于蛋白质的准确鉴定,不仅能够提供蛋白毒素的准确分子量和结构序列信息,而且能够实现准确定量。酶解质谱法是应用最为广泛的检测鉴定方法,通过酶解肽指纹谱分析,实现蛋白毒素的准确鉴定;对于复杂样品中蛋白毒素的分析,通过多种蛋白酶酶解策略获得丰富的特异性肽段标志物,然后进行肽段标志物的靶向质谱分析从而获得准确的定性及定量信息,方法有效提升了Ⅱ型RIPs毒素鉴定的准确度和灵敏度。免疫分析法和�; 梁龙辉梁龙辉刘昌财刘石磊; 关键词：毒素

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梁龙辉

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