刘志文
- 作品数：25 被引量：58H指数：4
- 供职机构：江西农业大学生物科学与工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金博士科研启动基金江西省科技支撑计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程文化科学医药卫生更多>>
- 丙型肝炎病毒NS4B蛋白调控Hep3B细胞非折叠蛋白质反应研究被引量：3
- 2012年
- 研究表达的丙型肝炎病毒(HCV)NS4B对Hep3B细胞非折叠蛋白质反应的影响。NS4B重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)NS4B通过脂质体转染Hep3B细胞,G418筛选和Western blot鉴定稳定转染细胞;RT-PCR检测稳定转染细胞内XBP1 mRNA剪接,Western blot鉴定ATF6蛋白切割,荧光素酶试验检测稳定转染细胞内GRP78和XBP1启动子活性。G418筛选和Western Blot鉴定证实获得稳定表达NS4B的Hep3B细胞;在该细胞内,XBP1 mRNA剪接、ATF6切割、XBP1和Grp78启动子激活均被检测到。NS4B在Hep3B的稳定表达诱导了非折叠蛋白质反应。
- 张艳妮张庆华陈瑶刘好桔刘志文孔令保
- 关键词：丙型肝炎病毒NS4BHEP3B
- 亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌WU14亚硝酸盐还原酶的食品级高效诱导表达及其酶学性质研究被引量：10
- 2015年
- 【目的】研究亚硝酸盐胁迫下植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)WU14亚硝酸盐还原酶(nitrite reductase,Nir S)的作用机制,为发酵食品中应用乳酸菌纯种培养技术降解亚硝酸盐奠定基础。【方法】在37℃培养条件下,测定含0.02%—0.16%Na NO2的MRS培养液中L.plantarum WU14 24 h的生长密度、p H及Na NO2降解量。通过PCR扩增和TA克隆得到Nir S,并克隆到乳酸乳球菌食品级细胞内高效诱导表达载体p RNA48中,获得重组菌L.lactis NZ9000/p RNA48-Nir S。重组菌经30 ng·m L-1 nisin诱导后,经SDS-PAGE和盐酸萘乙二胺法分析目的蛋白的表达情况及Nir S酶活。通过生物信息学软件预测分析Nir S编码的蛋白质二三级结构、跨膜结构及疏水性。【结果】L.plantarum WU14能够在Na NO2浓度小于0.12%的MRS培养基中生长并降解一部分Na NO2,在0.10%Na NO2培养液中发酵24 h后降解量达到最大,为56.34μg·m L-1,Nir S酶活达2 347.5 U·m L-1。Nir S编码的蛋白质是一种以α-螺旋和无规则卷曲为主,不存在信号肽和跨膜结构的亲水蛋白。Nir S可在L.lactis NZ9000中高效表达,该重组菌能够在Na NO2浓度低于0.10%的GM17培养基中生长并降解一部分Na NO2,在含0.04%Na NO2的培养液中亚硝酸盐降解量达到最大,为22.21 mg·m L-1,Nir S酶活为925.41 U·m L-1。【结论】L.plantarum WU14的Nir S能够降解高浓度的亚硝酸盐,并且经食品级异源表达的Nir S具有较高的酶活力。本研究为探索研究亚硝酸盐降解的机理,建立发酵食品中亚硝酸盐降解的可控发酵体系提供了参考。
- 应碧昌晓宇刘志文周通陈瑶钟平安徐波
- HCV NS5B在人肝癌细胞系Huh7细胞内的表达及活性分析被引量：1
- 2009年
- 目的为靶向抗HCV药物筛选奠定基础。方法使用脂质体将包含HCV非结构蛋白5B(NS5B)基因的重组载体pcDNA-5B转染至人肝癌细胞系Huh7细胞,分别采用RT-PCR和Western Blot鉴定NS5B mRNA和蛋白表达,采用荧光素酶试验检测NS5B细胞内RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)活性。结果转染的Huh7细胞出现1.8kb的特异性NS5B mRNA目的带及一条相对分子质量约66 kD的蛋白目的带,且后者具有细胞内RdRp活性。结论人肝癌细胞系Huh7细胞可成功表达具有细胞内RdRp活性的NS5B,以其为靶标的抗HCV药物可为临床治疗提供新思路。
- 孔令保吴晓玉朱向东刘好桔刘志文王园秀熊舒
- 关键词：NS5BHUH7细胞活性
- “转识成智”制药工程专业人才培养模式的实践与探索被引量：2
- 2020年
- 在地方农林院校中,通过开展"转识成智"的教育实践与探索,研究新型教学模式下制药工程专业学生成长成才的培养路径和发展方向。制药工程专业应从目前自身情况和实际需要出发,进行培养目标和人才培养模式的创新改革,以适应建设创新型国家的综合性人才需求。
- 李志敏胡紫微刘志文王艺霖李至敏
- 关键词：转识成智制药工程
- 提高农业院校细胞生物学课程教学效果的尝试与实践被引量：3
- 2020年
- 作为农业院校生物学专业的核心课程,细胞生物学具有知识更新快、课程内容多而零散、传统上课效果不佳等特点。文章针对如何提高细胞生物学教学效果,激发学生学习兴趣,提升学生自主学习能力等,总结了教学过程中的几点尝试:一是优化理论课教学内容,增强授课的生动性与趣味性;二是增加文献阅读和讨论,培养学生独立学习、整合学习资源的能力;三是鼓励学生进入实验室,提高教与学的效果。实践证明,这些措施可有效提高本院各专业细胞生物学的教学效果。
- 戴益民刘志文陈仓赖芬菊
- 关键词：农业院校细胞生物学教学改革
- 集胞藻PCC6803中α-酮戊二酸脱羧酶的原核表达分析
- 2020年
- 【目的】α-酮戊二酸脱羧酶(α-ketoglutaric acid decarboxylase,α-KGD)是蓝细菌三羧酸循环途径中的一个关键酶。试验旨在优化集胞藻PCC6803中sll1981基因编码蛋白的原核表达方法,并对不同表达方法获得的重组sll1981蛋白进行活性测定。【方法】利用分子生物学技术构建含有sll1981基因的多种表达载体,通过SDSPAGE分析这些表达载体在大肠杆菌表达系统中的表达和可溶性情况,利用Ni-NTA亲和层析分离纯化重组sll1981蛋白,然后通过酶偶联法测定重组sll1981蛋白的催化活性。【结果】含有sll1981基因的不同表达载体在大肠杆菌表达系统中的表达良好,然而重组sll1981蛋白的可溶性和催化活性差异较大。【结论】当pET28bsll1981质粒与pTf16分子伴侣质粒在大肠杆菌中共表达时重组sll1981蛋白的可溶性和催化活性均为最佳。酶动力学测试表明集胞藻PCC6803中sll1981基因编码蛋白具有α-酮戊二酸脱羧酶功能。为进一步研究α-酮戊二酸脱羧酶的结构功能关系及催化机制提供重要基础。
- 张伟刘志文王小琴李至敏谢琮琮李志敏
- 关键词：集胞藻PCC6803原核表达分子伴侣
- 微生物实验教学改革探索被引量：3
- 2020年
- 微生物实验课程是生物学相关专业人才培养的重要实践教学环节。文章分别介绍微生物实验课程内容设计、实验课程设置体系的特点、实验教学模式及课程过程考核指标体系,并提出进一步完善实验教学和考核评价方式的具体改革措施,为提高本科实验教学质量,提高学生的综合素质与创新意识奠定基础。
- 魏赛金肖婧黄林胡殿明刘志文吴晓玉
- 关键词：微生物学实验教学教学改革
- 福寿螺分子鉴定及溯源研究进展
- 福寿螺(Pomacea canaliculata)于1981年传入我国,自2003年被列为我国第一批外来入侵物种至今,已对对我国的农、渔业特别是水稻产区的农业安全生产造成严重危害。国内外已采用多种手段防治福寿螺,取得了显...
- 刘志文丁俊杰刘奇玮张峰权永兵王建国
- 关键词：福寿螺分子
- 文献传递
- 短乳杆菌BS6 GlnR介导的氮代谢调控研究
- 2012年
- 短乳杆菌是乳酸杆菌属的重要菌种,被广泛应用于食品和医药行业。全局性转录因子GlnR普遍存在于各种细菌中,可以调控多个基因的表达。本研究从短乳杆菌(Lactobacillus brevis)BS6基因组扩增得到GlnR全长编码基因及包含GlnR盒的glnRA,amtB-glnK,glnPQ启动子序列,并运用细菌单杂交的方法证明GlnR在细菌体内可与上述3个操纵子的启动子结合,从而初步验证全局性转录因子GlnR在短乳杆菌氮代谢调控中的重要作用。
- 江湖刘志文李昆太郑小梅伍宁丰徐波
- 关键词：短乳杆菌
- 促进因子对阿舒假囊酵母合成核黄素的影响被引量：1
- 2010年
- 研究在发酵培养基中添加不同促进因子(玉米浆、酵母膏和豆油)对阿舒假囊酵母合成核黄素的影响。试验结果表明:添加10g/L玉米浆是最促进阿舒假囊酵母菌体生长和核黄素合成的最适质量浓度;40g/L酵母膏分别在0h补加20g/L,24h和48h各补加10g/L,其核黄素产量达到1587.37mg/L,比在0h1次添加40g/L酵母膏的产量提高了21.07%;在发酵培养基中添加2～5g/L豆油,对核黄素的合成均有促进作用。
- 刘志文黄林孔令宝程新涂晓嵘李昆太
- 关键词：阿舒假囊酵母核黄素生物合成
