张毅
- 作品数：4 被引量：32H指数：2
- 供职机构：中国科学院更多>>
- 相关领域：生物学化学工程医药卫生更多>>
- 重组GM-CSF/IL-3融合蛋白表达菌发酵研究被引量：1
- 2000年
- 基因工程菌的发酵技术是基因工程药物大规模生产所必备的关键技术 ,本文对于重组GM -CSF/IL - 3融合蛋白表达菌株E .coliBL2 1 (DE3) ( pFu)的生长及产物表达规律进行了探索 ,在此基础上进行高密度发酵研究 ,菌体最终发酵密度达OD60 0 值 6 0以上 ,目的产物占菌体总蛋白 2 5 %以上。
- 张毅屈贤铭杨胜利
- 关键词：高密度发酵基因工程药物重组蛋白
- 融合蛋白基因工程应用及研究被引量：25
- 2000年
- 通过重组DNA技术将不同的基因或基因片段融合在一起 ,经表达后可以得到由不同的功能蛋白拼合在一起而形成的新型多结构域的人工蛋白 ,这是一种极具潜在应用价值与理论意义的方法。目前这种方法已被广泛应用于许多领域的研究中 ,并已显示出较高的价值 ,本文尝试对融合蛋白研究的几个领域的发展情况进行综述。
- 张毅屈贤铭杨胜利
- 关键词：融合蛋白基因工程酶学研究
- 粒细胞巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3融合蛋白的表达研究被引量：1
- 2000年
- 利用PCR扩增得到粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)、白细胞介素 3(IL 3)完整基因片段 ,将其分别克隆至pGEM T ,构建成GM CSF/IL 3融合蛋白基因 ,DNA序列与设计预期一致。将得到的融合蛋白基因克隆至T7RNA聚合酶表达载体pT7zz,得到表达质粒pFu ,经转化至表达宿主E .coliBL2 1(DE3) ,在IPTG诱导下获得融合蛋白目的产物的直接表达。经SDS PAGE电泳鉴定扫描分析 ,目的基因产物表达量占菌体总蛋白量的 30 %以上 ,目的基因表达产物以包涵体的形式表达。Western blot鉴定表明 ,该表达产物可以与GM CSF抗体及IL 3抗体特异性结合。目的基因表达产物经过包涵体变性、透析复性及柱层析纯化 ,用GM CSF、IL 3依赖细胞株TF 1检测 。
- 张毅屈贤铭杨胜利
- 关键词：融合蛋白基因药物GM-CSFIL-3
- 质粒载体的基因治疗被引量：5
- 2002年
- 质粒载体的基因治疗作为一类极有前途的非病毒基因治疗方法,具有低免疫反应、安全稳定、低成本、适合商业化生产等特点。本文综述了用于基因治疗的质粒载体的转染机制、转染方法、构建和大规模制备。
- 祝献民张毅
- 关键词：质粒载体基因治疗转染
