崔大岺
- 作品数:3 被引量:7H指数:1
- 供职机构:河北大学生命科学学院更多>>
- 发文基金:河北省生物工程重点学科资助更多>>
- 相关领域:生物学更多>>
- 蚯蚓纤溶酶F-I-0基因的电子克隆
- 本文通过电子克隆的方法以F-I-0N端氨基酸序列作为种子序列,利用dbEST的EST片段进行同源比对、聚类和拼接,获得了未见报道的蚯蚓纤溶酶F-I-0基因,并对其进行了生物信息学分析,与F-I-0基因的生化性质基本一致。
- 崔大岺赵晓瑜候艳高珊刘彬彬
- 关键词:电子克隆生物信息蚯蚓纤溶酶
- 文献传递
- 蚯蚓纤溶酶F-I-0基因的电子克隆
- 蚯蚓纤溶酶是一类在蚯蚓体内分离到的具有纤溶蛋白作用和激活纤溶酶原作用的蛋白质,可以作为溶栓药物治疗因血栓引起的各种疾病。在其分子生物学研究方面,国内外在GenBank中递交了21条核酸序列和28条蛋白质序列,但其F-I-...
- 崔大岺
- 关键词:蚯蚓纤溶酶生物信息学电子克隆RT-PCR
- 文献传递
- 蚯蚓纤溶酶新基因EfP-0的电子克隆及其编码区序列RT-PCR验证被引量:7
- 2006年
- 利用生物信息学手段,以期获得蚯蚓纤溶酶F-Ⅰ-0组分的基因。根据从粉正蚓(Lumbricusrubellus)中分离的F-Ⅰ-0组分的N端氨基酸序列VVGGSDTTIGQYPHQL,利用DNAMAN软件通过电子克隆方法,从Lumbricidae的dbEST中获得该组分的核酸序列信息,设计特异引物,经过RT-PCR,成功地从赤子爱胜蚓(Eiseniafoetida)中克隆到一条蚯蚓纤溶酶新基因,命名为EfP-0。EfP-0基因全长678bp,编码225个氨基酸的成熟肽,属丝氨酸蛋白酶,胰蛋白酶家族,与F-Ⅰ-0组分的氨基酸组成非常接近。BLAST证明,EfP-0与已报道的蚯蚓纤溶酶基因之间的相似性均低于40%,因此为蚯蚓纤溶酶中的一个新基因,GenBank登录号为DQ836917。构建的pMAL-c2x-EfP-0重组质粒,在大肠杆菌TB1中获得融合蛋白MBP-EfP-0的可溶性表达,表达产物有酪蛋白平板溶解活性。
- 赵晓瑜高珊崔大岺耿风廷
- 关键词:蚯蚓纤溶酶电子克隆