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王娉: 作品数：83 被引量：289H指数：11; 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划质检公益性行业科研专项项目国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：轻工技术与工程医药卫生农业科学理学更多>>

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检测克罗诺杆菌的引物对、探针和方法: 本发明涉及用于快速检测克罗诺杆菌属细菌的寡核苷酸引物对及探针以及包含所述引物对和探针的试剂盒。本发明涉及利用所述引物对和探针或试剂盒快速检测克罗诺杆菌属细菌的实时荧光PCR方法。本发明还涉及所述引物对和探针或试剂盒在检测...; 陈颖王娉胡玥田雪杨海荣赵勇胜赵贵明刘洋; 文献传递

鉴定金黄色葡萄球菌的多重PCR方法被引量：1: 2011年; 建立了一种快速鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌的多重PCR方法。利用金黄色葡萄球菌的特异基因、耐甲氧西林基因和4种肠毒素基因nuc、mecA和sea、sec、sed、see建立6重PCR反应体系,并对PCR体系,引物浓度进行优化。6对PCR引物均能特异地扩出相应的目的基因。对47株金黄色葡萄球菌的检测结果与应用单重PCR鉴定结果完全一致。实验所建立的多重PCR方法能在一个反应体系中鉴定和鉴别金黄色葡萄球菌,为食品中金黄色葡萄球菌的快速检测提供了一种有效的检测手段。; 王娉劳华均胡玥袁飞杨海荣陈颖; 关键词：金黄色葡萄球菌多重PCR方法

克罗诺杆菌种间鉴定recN基因方法建立被引量：5: 2015年; 目的建立一种基于重组和修复蛋白基因(recN)的克罗诺杆菌种间鉴定方法,将不同来源的克罗诺杆菌分离株鉴定到种。方法扩增recN基因全长序列,选取不同长度的recN基因片段,用MEGA 4.0软件对克罗诺杆菌8个参考菌株进行聚类分析,确定克罗诺杆菌种间鉴定可信度高、序列较短的片段;设计并合成该片段的引物,以8株参考菌株作为参照,构建44株克罗诺杆菌实验菌株的聚类分析图,并用生化反应鉴定对聚类结果进行佐证。结果基于recN基因上一段640 bp的片段可对克罗诺杆菌不同种的菌株进行区分;以8株参考菌株在聚类图上的位置作为参考,根据遗传距离的远近,44株分离菌中有37株阪崎克罗诺杆菌,3株丙二酸盐阳性克罗诺杆菌,3株苏黎世克罗诺杆菌,1株尤尼沃斯克罗诺杆菌,与生化反应鉴定结果一致。结论该方法与生化鉴定和基于recN全基因方法相比简便快速,PCR扩增后,一次测序反应就可以将克罗诺杆菌鉴定到种。; 田雪王娉赵勇胜胡玥丛苑陈颖葛毅强

乳源蜡样芽胞杆菌耐药性、毒力因子检测及分子特征研究被引量：11: 2021年; 为了解乳品来源蜡样芽胞杆菌携带的毒力因子、分子特征及耐药性,对2016—2019年分离自乳品的122株蜡样芽胞杆菌,采用纸片扩散法(K-B纸片法)测定了分离株对氯霉素、庆大霉素等9种抗生素的耐药性,使用聚合酶链式反应法检测了菌株携带的毒力因子,同时采用脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)检测分离株的分子特征。结果表明,122株蜡样芽胞杆菌均对氯霉素、庆大霉素、阿米卡星敏感;对红霉素、克林霉素和环丙沙星的中介率分别为5.74%、4.92%和0.82%,9.84%的菌株对复方新诺明具有耐药性,8.20%的菌株对四环素具有耐药性,4.10%的菌株对利福平具有耐药性。122株蜡样芽孢杆菌都检出了蜡样芽孢杆菌的非溶血型肠毒素基因nheA、nheB及肠毒素FM基因entFM;nheC、bceT、cytK、hblA、hblC、hblD、ces和EM1基因的检出率分别为99.18%、37.70%、31.15%、29.51%、24.59%、8.20%、6.56%和6.56%。122株蜡样芽胞杆菌被分成15簇,未见明显的优势带型。由此可见,2016—2019年收集的蜡样芽胞杆菌乳品分离株携带多种毒力基因,约10%的菌株对复方新诺明、四环素、利福平等具有耐药性,PFGE呈现多种带型,为蜡样芽孢杆菌引起的食源性疾病的预警、预防和治疗提供参考。; 郭佳王娉王娉赵晓美赵晓美陈颖; 关键词：乳品蜡样芽胞杆菌耐药性毒力基因分子分型

一种用于预测乳品中耐药菌耐药基因与宿主对应关系的方法: 本发明涉及一种预测乳品中耐药菌耐药基因与宿主对应关系的方法，其包括(1)原料乳预处理；(2)细菌宏基因组DNA提取；(3)Shotgun测序；(4)菌种注释与ARGs注释；(5)ARGs细菌潜在宿主预测等步骤。本发明的预...; 陈颖王娉梁丽姣赵晓美曲天铭姬庆龙

一种基于微滴数字PCR技术的快速检测双歧杆菌Bi-07的引物探针组合及方法: 本发明涉及一种用于检测双歧杆菌Bi‑07的引物对及探针。本发明还涉及用于测定双歧杆菌Bi‑07的微滴数字PCR检测方法，所述方法包括使用针对双歧杆菌Bi‑07检测的特异性寡核苷酸引物及探针。本发明还涉及用于双歧杆菌Bi‑...; 王娉陈颖赵晓美姬庆龙赵勇胜杨海荣

冷鲜猪肉供应链主要环节中微生物多样性宏基因组分析: 2024年; 目的利用宏基因组学技术探究不同阶段冷鲜猪肉表面微生物群落结构及多样性变化,分析风险菌的组成及变化,为冷鲜肉中风险细菌的控制提供参考。方法采用宏基因组学技术,对预冷后、排酸后及市售3个阶段的30份冷鲜猪肉样本进行测序,并进行微生物多样性变化和菌群代谢通路的分析。结果不同阶段冷鲜猪肉菌群结构差异有显著性。从预冷到排酸再到市售,根瘤菌丰度变化导致了变形菌门相对丰度呈现先增后减趋势;索丝菌属丰度提升造成了厚壁菌门丰度占比的逐步提高。PCoA分析发现排酸肉与市售肉部分重叠,说明排酸肉细菌与市售肉中菌群相似。排酸后到市售肉样中,优势致腐菌热杀索丝菌(0.3%~14.5%)、莓实假单胞菌(0.02%~3.6%)和鲍曼不动杆菌(0.5%~3.3%)的相对丰度显著提升。代谢通路分析表明排酸肉样本中注释到的细菌有关代谢的编码基因丰度在3个阶段样本中最高,3组样本中部分协调糖代谢和氨基酸代谢的蛋白质和酶丰度呈上升的趋势,并且与索丝菌和假单胞菌变化趋势存在一致性。结论排酸肉样本中的细菌种群与市售肉样本中相似,生产中应加强排酸过程中菌群的控制,同时采取适当措施控制嗜冷菌的繁殖,保障供应链中肉品质量安全。; 王宇王娉曲天铭梁丽姣赵晓美陈颖张万刚; 关键词：冷鲜猪肉宏基因组学微生物多样性

一种食源致病性气单胞菌的检测及分离方法: 本发明公开了一种对食源致病性气单胞菌菌株的检测和分离方法：包括专用增菌液和显色培养基两部分，增菌液由特殊蛋白胨、胆盐和水组成；显色培养基由蛋白胨、糊精、麦芽糖、甜菜碱、胆盐、氯化钾、碳酸钾、硫酸镁、氨苄青霉素、头孢唑林、...; 陈颖姬庆龙赵贵明赵勇胜王娉赵晓美杨海荣

基于流式细胞仪技术的快速检测试剂盒在生乳菌落总数检测中的应用被引量：1: 2023年; 本研究将市售流式细胞仪技术快速检测试剂盒应用于生乳中菌落总数的检测。通过对不同浓度、不同死/活细菌比的金黄色葡萄球菌菌悬液的流式细胞术(Flow cytometry,FCM)检测,并将检测结果与标准分离分离培养法进行对比,证实了试剂盒染色液对常见微生物的荧光标记能力良好,样品染色液A和染色液B联用可以有效实现对死/活细菌的区分与计数。通过向生乳样品中添加不同浓度金黄色葡萄球菌、不同死/活细菌比例细菌或不同种细菌制备人工污染生乳样品并进行FCM检测,证实了该FCM试剂盒方法能够适用于实际生乳制品菌落总数定量检测与死/活细菌区分计数,且方法稳定性良好,可以应用于实际生乳菌落计数。该试剂盒方法在生乳检测流程上的应用证实了利用FCM法替代传统分离检测法的实际应用可行性,可以为第三方检测机构和乳品企业提供一种更为高效、便捷和准确的流程参考。; 赵晓美王娉曲天铭梁丽姣姬庆龙陈颖; 关键词：流式细胞技术菌落总数生乳

克罗诺杆菌的随机多态性扩增DNA(RAPD)基因分型研究被引量：8: 2012年; 研究了克罗诺杆菌标准菌株和样品中分离菌株的分子特征,为克罗诺杆菌的种间鉴别和分子溯源提供一种有效手段。采用随机引物扩增多态性DNA分析对38株菌株进行基因分型。筛选出1条随机引物,每一菌株可扩增出1～7条DNA片段,片段在400-3500bp,可将8株标准菌株的种间区分开来。以相似性50%为标准,38株克罗诺杆菌按照其遗传差异可以分为8个基因型类群。所建立的RAPD技术可用于克罗诺杆菌的种间鉴别和分子溯源研究。; 杨海荣赵贵明王娉赵勇胜袁飞胡玥陈颖; 关键词：基因分型

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