重庆医科大学附属儿童医院儿童发育疾病研究省部共建教育部重点实验室
- 作品数：189 被引量：904H指数：14
- 相关作者：曾佑群马超赵利华徐明灯吴扬更多>>
- 相关机构：复旦大学附属儿科医院重庆大学生物工程学院生物医学工程系重庆大学生物工程学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- PEG3启动子启动铁蛋白报告基因在干细胞瘤变时特异表达及体外磁共振成像被引量：2
- 2019年
- 目的探讨利用肿瘤特异性启动子PEG3驱动MRI报告基因铁蛋白重链(ferritin heavy chain 1, FTH1)在干细胞瘤变时特异性表达并进行MRI检测的可行性。方法构建PEG3启动子控制FTH1表达的病毒载体PEG3-FTH1-LV,感染大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs),获得MSCs-PEG3-FTH1细胞,MSCs和MSCs-CMV-FTH1作为对照,通过与大鼠胶质瘤细胞C6间接共培养2周诱导其瘤变为TMSCs、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1。观察细胞形态,检测细胞迁移能力、细胞增殖速度及细胞表面抗体CD29、CD34、CD45、CD90的表达,裸鼠皮下成瘤实验验证细胞瘤变,Western blot、普鲁士蓝染色、细胞透射电镜和磁共振成像(MRI)检测细胞诱导前后FTH1基因的表达。结果 TMSCs细胞较MSCs细胞变小,多呈纺锤状,增殖速度加快,迁移能力增强,CD34、CD45表达增加,CD90表达减少(P<0.05),裸鼠皮下成瘤阳性;Western blot结果显示:MSCs、MSCs-PEG3-FTH1、TMSCs细胞不表达或少量表达FTH1蛋白,而MSCs-CMV-FTH1、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1细胞均大量表达FTH1蛋白(P<0.05);普鲁士蓝染色和细胞透射电镜观察到MSCs-CMV-FTH1、TMSCs-PEG3-FTH1、TMSCs-CMV-FTH1细胞内铁颗粒,而在MSCs、MSCs-PEG3-FTH1、TMSCs细胞内无明显铁颗粒,MRI显示TMSCs-PEG3-FTH1细胞信号较MSCs-PEG3-FTH1细胞信号明显降低。结论 PEG3启动子可驱动报告基因FTH1在干细胞瘤变时特异性表达并能被MRI检测。
- 孙君蔡金华秦勇李晓朦仇嘉文
- 关键词：磁共振成像骨髓间充质干细胞
- 纤支镜肺泡灌洗术诊治70例婴幼儿重症腺病毒肺炎分析被引量：9
- 2013年
- 腺病毒肺炎为腺病毒（adenovirus,ADV）感染引起的急性下呼吸道疾病,多见于6个月至2岁小儿[1]。6个月至2岁小儿的ADV特异性抗体降至最低,易重症感染,病情重、并发症多,是引起儿童死亡的首要原因,目前缺乏特异性治疗。近年来,我院采用纤维支气管镜肺泡灌洗术辅助治疗婴幼儿重症腺病毒肺炎,疗效理想,现报告如下。
- 叶泽慧黄英舒畅李渠北代继宏王莹袁小平
- 关键词：腺病毒肺炎疗效
- 高脂饲料诱导的肥胖大鼠网膜素水平的实验研究被引量：2
- 2012年
- 人群调查发现肥胖人群网膜素水平较正常人群低,而正常及肥胖大鼠血清网膜素水平及其基因表达情况尚不清楚.将SD大鼠随机分为正常组(n=10)和高脂组(n=30),分别喂养普通饲料和高脂饲料.6 w后从高脂组选取体重增长最快的20只,再从中随机抽取10只继续喂养高脂饲料,12 w后两组各剩9只,采用全自动生化仪ADVIA2400测定血糖及血脂、ELISA检测血清胰岛素及网膜素水平、RT-PCR检测网膜脂肪组织网膜素mRNA表达水平.结果显示高脂组大鼠体重、体重增加值、肥胖指数、低密度脂蛋白、胰岛素、血清网膜素水平及网膜脂肪组织网膜素mRNA表达水平均高于正常组(P<0.05).首次发现肥胖大鼠血清网膜素水平及网膜脂肪组织中网膜素mRNA表达水平较正常大鼠显著增高,与人群调查结果不一致.
- 吕攀攀瞿平毕杨陈洁张蔓刘友学
- 关键词：肥胖大鼠高脂饲料
- 悬滴三步法体外诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞的分化
- 2011年
- 背景:研究胚胎干细胞分化为心肌细胞的条件和技术,进一步提高诱导分化率、细胞纯度,具有重要的理论和临床应用意义。目的:建立体外诱导胚胎干细胞分化为心肌细胞模型,为体外研究心肌细胞发育提供合适的实验方法。方法:采用悬滴-悬浮-贴壁三步法(悬滴三步法)对未分化的胚胎干细胞进行体外诱导分化培养,并按诱导剂的不同分为6组,Ⅰ组:丹参+5-氮杂胞苷;Ⅱ组:丹参+维甲酸;Ⅲ组:5-氮杂胞苷;Ⅳ组:丹参;Ⅴ组:维甲酸;Ⅵ组:阴性对照。诱导剂加入后9d,免疫细胞化学方法检测拟胚体α-actinin、myosin、α-actin的表达。结果与结论:诱导剂加入后第2天,倒置显微镜下见拟胚体自发性收缩,每个拟胚体可有1个或多个收缩中心。免疫细胞化学示心肌特异性结构蛋白α-actinin、myosin、α-actin均成阳性表达。Ⅰ组心肌细胞的分化率最高,与Ⅱ、Ⅵ组心肌细胞分化率比较差异有非常显著性意义(P<0.01),与Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组比较差异有显著性意义(P<0.05)。结果显示悬滴三步法联合中药丹参与5-氮杂胞苷为诱导剂,可提高体外胚胎干细胞分化为心肌细胞的分化率。
- 刘官信王芳洁赵丹芦起
- 关键词：胚胎干细胞分化5-氮杂胞苷
- C反应蛋白诊断新生儿败血症准确性的Meta分析被引量：21
- 2011年
- 目的探讨CRP诊断新生儿败血症的诊断价值。方法计算机检索维普中文科技期刊数据库、中国期刊全文数据库、万方数据库、中国生物医学文献数据库、Medline、EMBASE、Cochrane图书馆、PubMed等数据库(检索时间为1989年1月至2011年7月),获得CRP诊断新生儿确诊败血症的文献。采用QUADAS工具对纳入文献进行质量评价。采用MetaDisc1.4和RevMan5.0软件检验各文献间的异质性,并根据异质性结果选择相应的效应模型进行加权定量合并,计算敏感度和特异度及其95%CI。绘制受试者工作特征(SROC)曲线并计算曲线下面积(AUC),并行敏感度分析。结果 20篇文献进入Meta分析。分析结果显示:CRP诊断新生儿败血症的汇总敏感度和特异度分别为0.69(95%CI:0.65～0.72)和0.87(95%CI:0.86～0.89),SROCAUC为0.88,Q*指数为0.81。CRP>8mg·L-1诊断新生儿败血症的汇总敏感度和特异度分别为0.88(95%CI:0.82～0.92)和0.86(95%CI:0.81～0.90),SROCAUC为0.94,Q*指数为0.88;CRP≥8mg·L-1诊断新生儿败血症的汇总敏感度和特异度分别为0.54(95%CI:0.47～0.61)和0.81(95%CI:0.76～0.85),SROCAUC为0.80,Q*指数为0.74;两者合并诊断新生儿败血症的汇总敏感度和特异度分别为0.70(95%CI:0.65～0.74)和0.83(95%CI:0.80～0.86),SROCAUC为0.88,Q*指数为0.82。在纳入文献中标本来源和检测方法的差异等非阈值效应因素是产生异质性的原因。结论 CRP对新生儿败血症诊断的敏感度和特异度较高,有助于早期诊断新生儿败血症。
- 刘维勤肖甜甜余加林
- 关键词：C反应蛋白新生儿败血症META分析
- MIRU—VNTR和Spoligotyping用于重庆地区210株儿童结核分枝杆菌临床分离株的基因分型被引量：8
- 2011年
- 目的评价间隔区寡核苷酸分型（Spoligotyping）和基于结核分枝杆菌散在分布数目可变串联重复序列分析（MIRU—VNTR）方法在重庆地区儿童结核病分子流行病学中的应用。方法收集重庆地区210株儿童结核分枝杆菌（MTB）临床分离株，应用上述两种分型方法进行比较分析。结果采用Spoligotyping分型方法，210株菌可分为2个基因群44种基因型，其中最大的1个基因群即北京家族（北京基因型）含有130株菌（61．90％）。采用MIRU—VNTR分析发现24个位点的多态性差异较大，不同MIRU位点组合（12、15和24位点）的分辨率指数依次升高，后两个组合的差异是由位点ETR-B引起。各位点和各位点组合在北京家族菌株中的分辨率指数均高于非北京家族菌株。结论重庆地区儿童MTB具有明显的基因多态性，其主要流行型为北京家族。在结核病原学监测中，可先采用Spoligotyping，再对成簇菌株进行15位点与ETR—B组合二次分型的联合分型策略，可据高分子流行病学调查效果。
- 刘芮汐李奇志幸琳琳彭哲朱朝敏
- 关键词：北京基因型数目可变串联重复序列间隔区寡核苷酸分型儿童
- 氨溴索对导管相关性黏液型铜绿假单胞菌生物被膜的体内干预作用被引量：3
- 2012年
- 目的建立大鼠导管相关性黏液型铜绿假单胞菌生物被膜感染模型,探讨氨溴索对黏液型铜绿假单胞菌生物被膜的体内干预作用。方法建立铜绿假单胞菌临床分离株BF体外模型,培养7 d后得到成熟BF。将BF植入大鼠气管建立大鼠导管相关性黏液型铜绿假单胞菌生物被膜感染模型,分为BF感染组,BF氨溴索干预组,空白导管对照组和正常对照组。分别在植入后第4天和第7天处死大鼠,取出导管通过扫描电镜观察导管上BF的结构改变,检测导管上细菌及藻酸盐的含量;并检测肺组织匀浆和血浆中藻酸盐抗体含量。结果成功建立大鼠导管相关性黏液型铜绿假单胞菌生物被膜感染模型。在术后4 d和7 d两个时间点BF感染氨溴索干预组大鼠气管导管上的BF结构被破坏,在术后4d和7dBF感染氨溴索干预组和BF感染组菌落计数分别为(8.349 4±0.025)lgCFU vs(8.566 9±0.11)lgCFU和(8.152 7±0.015)lgCFU vs(8 500 9±0.013)lgCFU(F=87.6和F=507.5,P<0.05)。BF藻酸盐的含量也减少,术后4 d和7 d BF感染氨溴索干预组和BF感染组藻酸盐含量分别为(55.377 6±0.842)mg/g vs(83.488 6±0.538)mg/g和(42.372 1±0.505)mg/g vs(74.621 5±0.215)mg/gg(F=791.7和F=3 450.9,P<0.05)。BF感染氨溴索干预组和BF感染组的血浆抗藻酸盐抗体含量在两个时间段分别为(0.772 1±0.006)vs(1.000 5±0.006)和(0.791 7±0.007)vs(1.019 5±0.007)(F=351.9和844.5,P<0.05)。结论氨溴索可破坏大鼠气管导管上的BF结构,减少导管上BF内的细菌和BF藻酸盐的含量。氨溴索可降低抗藻酸盐抗体的表达,减轻肺部免疫损伤。
- 李芳王文磊余加林
- 关键词：导管相关性黏液型铜绿假单胞菌生物被膜氨溴索
- 糖原合成酶激酶3β与白血病被引量：1
- 2013年
- 糖原合成酶激酶3B（GsK3β）是一种保守的胞质丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶，既可以负调控与白血病相关的经典Wnt、Akt等信号通路，也可以正调控转录核因子（NF—κB）、非经典Wnt、溶酶体凋亡等信号通路，从而调节白血病细胞的增殖、分化和凋亡。目前，多种GSK3β抑制剂以及激活剂在白血病研究中均有报道，它们在减少化疗不良反应、逆转耐药、增强对白血病细胞的杀伤等方面发挥重要作用。GSK3β有望成为白血病分子靶向治疗的靶点。
- 王妍徐酉华
- 关键词：糖原合成酶激酶3白血病信号传导分子靶向治疗
- 中重度儿童支气管哮喘与生长发育指标关系对照研究分析被引量：9
- 2011年
- 目的 观察中重度儿童支气管哮喘与生长发育的关系.方法 选择3～10岁中重度持续状态的哮喘患儿389例,并且按病情严重程度分为中度组（226例）和重度组（163例）,各组按年龄又分为3～岁（85例和63例）、5～岁（76例和52例）和7～10岁（65例和48例）3个组,选择同期同年龄段正常儿童298名作为对照组,其中3～岁96名、5～岁92名和7～10岁110名,分别测量其身高、体重及肺功能.结果 3～岁重度组身高值、体重值、身高百分位数、体重百分位数、身高标准差的离差法（SDS）数值、体重SDS[分别为（98.54±7.75）cm、（14.87±2.46）kg、50.30%±16.31%、50.27%±18.29%、0.11±0.66、0.06±0.49]均低于同年龄段的中度组[分别为（103.58±5.48）cm、（16.60±2.21）kg、65.80%±18.54%、65.10%±18.92%、0.46±0.53、0.45±0.54]及对照组[分别为（105.60±6.29）cm、（17.82±2.82）kg、72.37%±11.37%、71.92%±2.82%、0.66±0.62、0.66±0.52],差异具有统计学意义（F值分别为7.295、8.034、15.246、10.745、8.026、10.864,P值均＜0.05）.5～岁重度组身高值、体重值、身高百分位数、体重百分位数、身高SDS、体重SDS[分别为（110.10±7.36）cm、（18.76±3.20）kg、45.86%±18.92%、41.69%±12.50%、-0.95±0.42、-0.23±0.34]均低于同年龄段的中度组[分别为（117.76±6.35）cm、（21.63±2.75）kg、61.81%±20.75%、61.79%±18.92%、0.36±0.62、0.38±0.56]及对照组[分别为（119.90±5.78）cm、（22.80±3.07）kg、68.97%±18.59%、66.27%±18.35%、0.57±0.65、0.48±0.63],差异具有统计学意义（F值分别为8.351、7.864、15.037、13.921、12.116、11.725,P值均＜0.05）.重度组7～10岁身高值、体重值、身高百分位数、体重百分位数、身高SDS、体重SDS[分别为（123.50±9.52）cm、（23.82±5.72）kg、45.81%±15.51%、42.63%±14.91%、-0.06±0.48、-0.02±0.61]均低于同年龄段的中度组[分别为（129.10±8.41）cm、（26.70±5.72）kg、66.84%±16.09%、64.
- 吴雪郡黄英王莹龚财惠
- 关键词：哮喘儿童
- 超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染的效率及对ABCB1a和P-gp表达的影响
- 2012年
- 目的研究超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染L2RYC细胞的效率以及对ABCB1a水平和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)表达的影响。方法制备脂质微泡;设计4对siABCB1a序列,并构建4种真核表达质粒pSES-siABCB1a;转染L2RYC细胞(单纯质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+微泡+超声组),另设空白对照组。采用流式细胞术检测质粒的转染效率;实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后L2RYC细胞中ABCB1a基因及P-gp的表达。结果 4种pSES-siABCB1a质粒经PCR、双酶切及测序证实构建正确;质粒+微泡+超声组pSES-siABCB1a质粒可高效转染L2RYC细胞,可见荧光表达,转染效率为(49.35±5.89)%;转染后ABCB1a基因mRNA及P-gp的表达均明显降低(P<0.05)。结论超声微泡可促进外源基因体外转染L2RYC细胞,siABCB1a能有效抑制ABCB1a基因和P-gp的表达。
- 何昀李奇林温晟刘东尧李明勇王强魏光辉
- 关键词：超声微泡转染P-糖蛋白
