浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室开放基金
- 作品数：53 被引量：361H指数：10
- 相关作者：陈全震曾江宁王雪鹏廖一波杜萍更多>>
- 相关机构：浙江省海洋水产养殖研究所国家海洋局第二海洋研究所浙江省近岸水域生物资源开发与保护重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学环境科学与工程医药卫生更多>>
- 可口革囊星虫对Cd^(2+)和Hg^(2+)的富集及其影响被引量：4
- 2015年
- 采用原子吸收、原子荧光等分析检测技术,探讨了Cd2+、Hg2+在可口革囊星虫中的富集规律及其对生长与主要营养成分的影响.结果表明:在试验设定的胁迫浓度内,可口革囊星虫体壁肌肉对Cd2+、Hg2+的富集均随胁迫时间的延长而增加,最终达到饱和浓度;环境中Cd2+、Hg2+浓度越高,富集速度越快,达到饱和的时间越短,饱和浓度也越高.可口革囊星虫体质量增长随着重金属胁迫浓度的升高而减慢,且联合胁迫的影响程度大于单一胁迫.体壁肌肉蛋白质含量随重金属胁迫浓度的增加而升高,Cd2+、Hg2+分别在0.05和0.02 mg·L-1胁迫浓度下达到最高,然后开始降低.联合胁迫也呈同样的规律,且影响程度更大.体壁肌肉脂肪含量随重金属胁迫浓度的增加而降低,联合胁迫下降低程度更大.
- 吴洪喜高业田黄振华蒋霞敏
- 关键词：可口革囊星虫重金属蛋白质脂肪
- 菲律宾蛤仔血细胞透射电镜样品制备固定液的筛选被引量：3
- 2016年
- 对样品的固定是透射电镜样品制备的关键环节,通过在透射电镜下观察和比较不同固定液固定菲律宾蛤仔血细胞后血细胞超微结构的变化,初步筛选出适合菲律宾蛤仔血细胞透射电镜制样的固定液。试验结果表明,固定液可直接影响到透射电镜制样品质的高低,2.5%、5%戊二醛低渗固定液引起了血细胞细胞器的肿胀,其中线粒体肿胀尤为严重,肿胀程度2.5%戊二醛组大于5%戊二醛组;等渗固定液固定的血细胞细胞器不肿胀,但等渗5%戊二醛与4%多聚甲醛-2.5%戊二醛固定液对血细胞的精细结构保存不佳,而2%多聚甲醛-2.5%戊二醛固定液对血细胞超微结构保存较好,表现为细胞外膜结构清晰,细胞质基质丰富且分布均匀,细胞内线粒体、内质网、高尔基体、细胞核等细胞器固定效果较好。试验得出,低渗固定液会导致细胞肿胀,线粒体对渗透压的要求较其他细胞器更加敏感;提高固定液含量会减轻因低渗引起的细胞肿胀程度,但高含量固定液会损坏细胞内精细结构,故适合的样品固定液是细胞精细结构较好保存的基础。
- 刘静袁玉清
- 关键词：菲律宾蛤仔血细胞透射电镜
- 海洋无脊椎生物受精动力学模型:研究方法与应用被引量：2
- 2013年
- 众所周知受精是物种繁衍的重要一步。不同于具有体内受精特性的物种，很多海洋无脊椎生物直接将精卵排放到自然水体中，不具有复杂的交配行为，不存在生物个体水平上的性选择（Sexual selection），其受精率主要依赖于水中精卵的相互作用。在理想状态下从生物物理学角度考虑，具有生殖细胞自由排放（Free—spawning）特性的水生生物，其生殖细胞在受精过程前散布于三维立体空间内，
- 刘广绪
- 凡纳滨对虾肠道上皮细胞微胞子虫PCR检测方法的建立与应用被引量：9
- 2016年
- 根据Gen Bank中对虾肠道上皮细胞微胞子虫(Enterocytozoon hepatopenaei,EHP)的基因保守序列,设计一对特异性引物,通过优化PCR扩增条件,建立快速检测凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)EHP的PCR方法。用该方法对EHP阳性虾进行PCR扩增,得到与实验设计相符的330 bp特异性扩增条带,而对白斑综合症病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)、对虾杆状病毒(BP)、"棉花虾"微孢子虫、黏孢子虫的阳性虾,以及健康虾的扩增结果为阴性。测序比对发现,PCR产物序列与Gen Bank EHP基因序列的同源性为99.8%,表明该PCR方法检测结果准确。敏感性试验表明,该方法最低可检测出约100 fg的EHP质粒DNA。用该PCR方法检测广东、广西、江苏、山东、海南等地的755份临床样品,共检出阳性样品21份。该PCR方法可用于凡纳滨对虾EHP的快速检测。
- 雷燕肖洋张会军王娟张文文卢刚王雪鹏
- 关键词：凡纳滨对虾PCR
- 口虾蛄假溞状幼体和仔虾消化酶活力的变化被引量：4
- 2015年
- 采用酶学方法测定了口虾蛄Oratosquilla oratoria假溞状幼体Ⅲ~Ⅺ期及仔虾的消化酶活力,分析比较了各发育期幼体和仔虾酶活力的变化。结果表明：在口虾蛄幼体发育过程中,淀粉酶活力先增大,至假溞状幼体Ⅴ期达到峰值后逐渐减小,纤维素酶活力呈逐渐下降的趋势,仔虾的淀粉酶及纤维素酶活力显著小于假溞状幼体酶活力（P〈0.05）;随着幼体的发育,幼体的胃蛋白酶、胰蛋白酶、脂肪酶活力逐渐增大,除了仔虾的脂肪酶活力和Ⅺ期假溞状幼体无明显差异外（P〉0.05）,仔虾期的酶活力显著高于其他发育期幼体的酶活力（P〈0.05）。研究表明,口虾蛄幼体消化酶活力的高低与幼体发育期有关,同时受食性和各发育阶段能量需求的影响。
- 刘海映周元雪邢坤陈雷
- 关键词：口虾蛄幼体仔虾消化酶
- 凡纳滨对虾对虾杆状病毒PCR检测方法的建立及初步应用被引量：3
- 2015年
- 根据Gen Bank中公布的对虾杆状病毒(Baculovirus penaei,BP)基因片段序列,设计1对特异性检测引物,建立快速检测凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)对虾杆状病毒的PCR方法。用该方法对BP阳性虾进行PCR扩增,结果得到380 bp的特异性扩增条带,与实验设计相符,而对白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉病毒(TSV)、传染性皮下及造血器官坏死病毒(IHHNV)阳性虾和健康虾的扩增结果为阴性。测序比对结果证实,该PCR方法检测结果准确,最低可检测出约1 pg的病毒DNA。利用建立的PCR方法对来自广东、广西、福建、海南和浙江的2 722份临床病料进行检测,共检出阳性病料133份,表明该PCR方法可用于对虾杆状病毒的临床快速检测。
- 雷燕肖洋张会军张翔王娟张文文王雪鹏
- 关键词：凡纳滨对虾PCR检测
- 缢蛏(Sinonovacula constricta)EST-SSR分布特征及引物开发利用被引量：31
- 2012年
- 采用CAP3软件对NCBI上的5296条缢蛏ESTs序列进行了微卫星特征分析。结果表明,经拼接、去冗得到非冗余EST序列3453条,含SSR位点的EST序列267条,共307个SSR位点,检出率为8.89%,平均每6.83kb出现1个SSR位点。设计了40对EST-SSR引物并进行PCR扩增,29对引物能扩增出理想的PCR产物,其中多态性引物14对。利用14对多态性引物分析了乐清湾缢蛏遗传多样性,共检测到等位基因数(Na)61个,每个位点的等位基因数为2—12个。二核苷酸、三核苷酸和四核苷酸重复是最主要的重复类型,分别占15.96%、37.13%和35.50%。乐清湾缢蛏群体观测杂合度(Ho)、期望杂合度(He)和多态信息含量(PIC)分别为0.569、0.490和0.449,表明乐清湾缢蛏遗传多样性较丰富。
- 刘博邵艳卿滕爽爽柴雪良肖国强
- 关键词：缢蛏
- 大口黑鲈鱼种弹状病毒病的诊断被引量：14
- 2015年
- 对广东佛山一突发批量急性死亡现象的大口黑鲈Micropterus salmoides养殖池塘中的患病大口黑鲈鱼种进行了研究。结果表明:濒死的大口黑鲈在水面漫游,烂身、烂鳍,停止摄食,严重者体色发黑;解剖病鱼鳃有少量出血点,肝脏严重肿大、充血,脾脏肿大,胃肠空虚,肾脏肿大;流行病学调查发现,该病具有明显的传染性;从病鱼肝脏、脾脏和肾脏中未分离到致病菌,也未检测到大量寄生虫;组织病理切片观察发现,肝脏、脾脏和肾脏均呈弥漫性坏死;参考Gen Bank中弹状病毒的基因序列,设计并合成检测引物,以从自然发病鱼提取的DNA作为模板,检测结果显示,病鱼均能扩增出与预期大小片段相符的特异性产物;经过克隆测序比对显示,扩增条带的基因序列与杂交鳢弹状病毒(HSHV)、鳜鱼弹状病毒(SCRV)核苷酸序列同源性分别为96.9%、95.3%。因此,初步诊断引起大口黑鲈鱼种急性死亡的病原为弹状病毒。
- 雷燕戚瑞荣崔龙波肖洋张文文马家好王雪鹏
- 关键词：大口黑鲈弹状病毒组织病理变化
- 菲律宾蛤仔血细胞透射电镜样品制备的初步研究被引量：1
- 2016年
- 透射电镜样品制备的好坏直接影响着透射电镜的观察和电镜图片的质量。该论文针对贝类血细胞普遍存在易凝集、密度低、类型不单一的现象,选取菲律宾蛤仔血细胞为研究对象,从取样方法、琼脂预包埋方式和锇酸固定时间3个方面比较和筛选适合其透射电镜的样品制备方法。实验结果显示:用预先抽取固定液的针管抽取血淋巴能有效防止血细胞凝集;离心式的琼脂预包埋方法能使血细胞集中,防止血细胞丢失;3000r/min^10 000r/min的转速均能达到较好的制样效果;锇酸固定10min,细胞质基质丢失严重,线粒体、高尔基体、粗面内质网等超微结构模糊。随着锇酸固定时间的增加,血细胞超微结构的保存逐渐转好,锇酸固定2h得到的血细胞透射电镜样品制备效果最佳。这些研究结果为菲律宾蛤仔和其它贝类血细胞超微结构及其相关的免疫学、病理学的研究提供基本技术参考。
- 刘静袁玉清吴亚林
- 关键词：菲律宾蛤仔血细胞透射电镜
- 石斑鱼循环水养殖系统微生物群落结构被引量：14
- 2017年
- 通过16S rRNA基因片段高通量测序研究了褐点石斑鱼(Epinephelus fuscoguttatus)和东星斑(Plectropomus leopardus)循环水养殖系统水体细菌种群结构。结果显示石斑鱼循环水养殖系统中优势细菌类群为变形菌门(Proteobacteria)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、蓝藻门(Cyanobacteria)、梭杆菌门(Fusobacteria)、厚壁菌门(Firmicutes)和硝化螺旋菌门(Nitrospira)。其中养殖塘、固液分离池、沉淀池和蛋白分离池中主要优势细菌为γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria),紫外消毒池和补氧池中则以a-变形菌纲(Alphaproteobacteria)为主,而生物滤池中两者比例接近,均为优势种群。从养殖塘到补氧池细菌多样性指数先降低后升高,生物滤池中达到最高值,之后再次下降至紫外消毒池中达到最低值,补氧池中有所回升。PCoA分析和聚类分析结果表明,养殖水在紫外消毒前后其细菌群落组成有着明显的差异。水质理化指标检测表明,经过净化处理后,循环系统的养殖水溶解氧含量上升,氨氮和亚硝酸盐含量下降并维持在较低的浓度。环境因子与细菌群落结构相关性分析结果表明,磷酸盐、pH、溶解氧和温度等指标可能对细菌群落结构影响相对较大,但未发现两者间有很显著的相关性,这可能与实验样本较少有关。
- 吴越马建忠郑伊诺许凯伦李敏陈星星胡园曾国权黄振华
- 关键词：石斑鱼循环水养殖系统养殖水体细菌群落高通量测序
