山东省科技攻关计划(2006GG2209004) 作品数:14 被引量:53 H指数:5 相关作者: 王树迎 王慧 侯衍猛 黄丽波 申颖 更多>> 相关机构: 山东农业大学 中国海洋大学 扬州大学 更多>> 发文基金: 山东省科技攻关计划 国家自然科学基金 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
发情周期中山羊子宫和输卵管内肥大细胞及组织胺含量的变化 被引量:5 2009年 应用改良甲苯胺蓝染色法和透射电镜技术观察了山羊发情周期4个阶段肥大细胞(MC)在子宫和输卵管内的分布、形态及数量变化规律,用荧光测定改良法检测了子宫和输卵管组织中组织胺(HA)含量。结果显示:MC呈圆形、椭圆形或梭形,在子宫内主要分布在肌层,子宫外膜中零星散在,内膜中散在分布于固有层的子宫腺和血管周围,子宫阜和内膜上皮中未发现。输卵管内MC在黏膜皱襞、肌层和外膜中均有分布。MC在发情后期有明显的脱颗粒现象。发情周期中子宫及输卵管MC数量变化为:MC(发情后期)>MC(发情前期)>MC(间情期)>MC(发情期),子宫肌层MC数量各组间差异极显著(P<0.01),子宫固有层和输卵管内无显著变化。子宫角内HA含量在发情后期与其它时期有显著变化(P<0.05),子宫体、子宫颈和输卵管的变化不明显(P>0.05)。 王立芹 申颖 王树迎 黄丽波 侯衍猛 王慧 王建民关键词:山羊 肥大细胞 子宫 输卵管 组织胺 LHR基因在济宁青山羊发情周期不同阶段子宫中表达差异的研究 被引量:8 2009年 从济宁青山羊子宫组织中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增黄体生成素受体(LHR)基因,获得一条286bp的片段,以pGEM-TEasy vector为载体,转染大肠杆菌E.coliDH5α,筛选阳性克隆并测序。采用优化的半定量RT-PCR技术,以山羊GAPDH为分子内参,比较研究了发情周期不同阶段的济宁青山羊子宫组织中LHR基因的表达差异。结果表明:得到的片段为山羊LHR基因的部分序列,与GenBank中登录的山羊LHR基因(AF379199)41-326 bp序列同源性高达100%。LHRmRNA在整个发情周期的子宫中都有表达。其中,发情期的表达水平最低(0.454±0.06),且与其它时期比较均差异显著(P<0.05),随之在间情期升至最高值(0.705±0.09),尔后在发情前期降至(0.553±0.07)。这一研究结果为山羊的生殖内分泌调控机制研究提供了分子水平的数据。 申颖 王慧 王树迎 王立芹 侯衍猛 黄丽波关键词:半定量RT-PCR 发情周期 济宁青山羊 多胎与单胎山羊发情期卵巢褪黑素受体基因的克隆测序分析 2011年 为揭示褪黑素影响山羊繁殖性状的遗传机制,本研究采用差异显示PCR(DDRT-PCR)和克隆测序技术,研究了褪黑素受体1a(MelR1a)基因在多胎的济宁青山羊和单胎的沂蒙黑山羊发情期卵巢组织中的表达情况,并对MelR1a基因进行了克隆测序分析。检测结果表明,MelR1a在两种山羊卵巢中均有表达,说明,褪黑素可以通过分布于卵巢中的褪黑素受体而对山羊的生殖发挥重要的调控作用。克隆测序分析结果表明,两种山羊发情期卵巢组织中褪黑素受体1a基因的碱基组成没有变异,说明山羊褪黑素受体基因序列具有高度的保守性。 汪运舟 曾启繁 陈维云 王慧 王树迎关键词:济宁青山羊 沂蒙黑山羊 卵巢 济宁青山羊发情周期不同阶段LHR在输卵管中的分布及其mRNA表达 运用免疫组织化学和实时荧光定量RT-PCR技术探究济宁青山羊发情周期不同阶段黄体生成素受体(LHR)在输卵管不同部位中的位置分布,并比较研究济宁青山羊发情周期不同阶段输卵管不同部位LHR mRNA表达量的差异。结果显示:... 李广君 王树迎 王慧 侯衍猛 黄丽波关键词:济宁青山羊 荧光定量RT-PCR 免疫组化 输卵管 文献传递 沂蒙黑山羊发情周期不同阶段卵巢中FSHR和LHR基因表达规律的研究 被引量:8 2011年 选取健康未孕的成年沂蒙黑山羊,按发情周期(间情期、发情前期、发情期、发情后期)宰杀取卵巢,采用实时荧光定量差异显示PCR(real-time qRT-PCR)技术,以GAPDH为持家基因,对处于发情周期不同阶段的沂蒙黑山羊卵巢组织内的卵泡刺激素受体(FSHR)、黄体生成素受体(LHR)基因进行了mRNA水平上的相对定量分析。发现FSHR mRNA、LHR mRNA在黑山羊发情周期的卵巢中都有表达。FSHRmRNA的相对表达量依次为0.618 7±0.294 42、1.290 2±0.290 24、2.575 9±0.458 80、0.790 8±0.261 93,其中发情期最高,间情期最低,两者差异极显著(P<0.01)。LHR mRNA的相对表达量依次为2.284 0±0.146 22、0.508 9±0.0789 9、0.340 3±0.045 38、2.859 2±0.205 66,其中发情后期相对表达量最高,发情期最低,两者差异极显著(P<0.01)。结果表明,FSH、LH在黑山羊的整个发情周期中是相互作用、相互影响的。 李泰云 韩小康 丁彦红 王树迎 王丽 石中强关键词:卵巢 卵泡刺激素受体 发情周期 沂蒙黑山羊 山羊发情周期中FSHR在输卵管内的定位研究 为了揭示FSHR对非性腺组织的作用机理,采用免疫组化SABC方法从形态学角度研究济宁青山羊发情周期不同阶段FSHR在输卵管中的定位。结果显示:FSHR阳性细胞主要存在于济宁青山羊发情周期各个阶段输卵管的粘膜上皮中,在输卵... 邱荣 王树迎 刘晓东 黄丽波 侯衍猛关键词:输卵管 免疫组化 卵泡刺激素受体 济宁青山羊 文献传递 山羊输卵管FSHR基因在发情周期不同阶段的差异表达 为进一步研究山羊的生殖内分泌调控机制,我们采用实时荧光定量PCR方法研究了济宁青山羊发情周期不同阶段输卵管不同部位中FSHR基因表达量的差异,结果表明:FSHR基因在发情周期各个阶段输卵管中均有表达。在输卵管漏斗部,间情... 邱荣 王慧 王树迎 刘晓东 黄丽波 侯衍猛关键词:济宁青山羊 卵泡刺激素受体 实时荧光定量PCR 输卵管 发情周期 文献传递 沂蒙黑山羊褪黑素分泌的季节性变化规律研究 为了探讨沂蒙黑山羊季节性发情的内分泌机理。应用放射性免疫分析法研究了沂蒙黑山羊在春分、夏至、秋分和冬至4个节气的血浆褪黑素变化规律。结果显示,4个节气全天血浆内褪黑素含量在午夜达到最大值,而在白天日中附近降到最小值,夜间... 魏军强 刘晓东 王树迎 韩小康关键词:沂蒙黑山羊 褪黑素 文献传递 济宁青山羊皮肤毛囊体外培养及其影响因素研究 前言毛囊具有独特的结构和周期性再生能力,在哺乳动物一生中,毛囊反复周期性地经历着生长期、退行期和休止期的变化,并通过周期性的生长,显示出完全的自我再生能力。在这些变化中涉及到许多生理现象, 崔志峰 陈维云 董彬 王慧关键词:济宁青山羊 毛囊 体外培养 细胞因子 影响因素 文献传递 荧光定量PCR检测山羊褪黑素受体表达体系的优化研究 被引量:1 2010年 本研究通过系统对比试验,优化建立了检测山羊卵巢组织中褪黑素受体基因表达量差异的荧光定量PCR技术体系,在这种体系下检测褪黑素受体1A基因在山羊卵巢组织中的差异表达量,可以得到最优的标准曲线,使起始模板浓度与循环数有良好的线性关系,且扩增效率百分数Eff接近1;荧光动力学曲线符合标准的"S"形荧光增长曲线,曲线拐点清楚,基线平而无明显上扬趋势;熔解曲线成单峰,充分说明扩增的特异性高,产物单一,与SYBR Green I荧光染料结合的为目标DNA片段,荧光曲线能够准确反映目的产物的扩增结果。 汪运舟 陈维云 王慧 李俊娴 于婷 王树迎关键词:荧光定量PCR 反转录 反应体系优化 熔解曲线