辽宁省自然科学基金(20102145)
- 作品数：4 被引量：30H指数：3
- 相关作者：刘春英井欢王莹易佳丽史妍婷更多>>
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- 补中益气汤含药血清逆转A549/DDP的顺铂耐药及对mTOR表达的影响被引量：18
- 2013年
- 目的:研究补中益气汤含药血清对肺腺癌顺铂耐药细胞株(A549/DDP)顺铂耐药的逆转作用及对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)表达的影响。方法:动物随机分组,制备补中益气汤高、中、低剂量血清(给药剂量分别为11.34,5.67,2.83 g.kg-1.d-1),将A549,A549/DDP细胞体外分为顺铂(DDP)组,空白血清+DDP组,含药血清高剂量+DDP组,含药血清中剂量+DDP组,含药血清低剂量+DDP组,细胞对照组,经过15%各组血清联合DDP不同浓度(10,20,40,80,100,200μmol.L-1)作用48 h,采用MTT法检测补中益气汤不同浓度含药血清对A549/DDP顺铂耐药的逆转作用;采用免疫荧光,免疫细胞化学,Western-blot方法检测mTOR的表达。结果:与DDP组比较,补中益气汤不同浓度含药血清作用于A549/DDP后IC50和耐药倍数均有显著降低(P<0.05),以补中益气汤中剂量组(等临床剂量组)作用最为显著(P<0.01),A549/DDP中mTOR的染色吸光度及荧光强度均明显减弱(P<0.01),蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:补中益气汤能增强A549/DDP对顺铂的敏感性,并能通过降低细胞生存通路中mTOR的表达而有效逆转肺腺癌细胞的顺铂耐药。
- 史妍婷井欢王莹易佳丽刘春英
- 关键词：补中益气汤哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
- 补中益气汤含药血清联合siRNA对肺腺癌A549/DDP细胞的LRP表达影响被引量：3
- 2014年
- 目的:运用小干扰RNA片段(small interfering RNA,siRNA)的方法特异性沉默肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)基因,观测该方法同补中益气汤含药血清联合应用逆转人肺腺癌耐药细胞A549/DDP的效果。方法:设计并合成针对LRP基因对应序列的siRNA,采用转染试剂对细胞进行转染。实验分组为:空白对照组、补中益气汤含药血清组、siRNA组及补中益气汤含药血清+siRNA组,利用逆转录聚合酶链反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测对该基因的抑制作用,Western blot及免疫细胞化学法检测蛋白质表达。结果:参照空白对照组,补中益气汤含药血清组、siRNA组及补中益气汤含药血清+siRNA组mRNA及LRP蛋白表达均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:补中益气汤含药血清和siRNA均能降低A549/DDP的LRP蛋白表达,并且2种因素之间存在交互作用。
- 李璐璐迟寿军王莹井欢刘春英
- 关键词：补中益气汤A549/DDP细胞肺耐药蛋白
- 补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞生长周期作用的影响被引量：5
- 2014年
- 目的评估补中益气汤含药血清对A549/DDP细胞生长周期的影响效果。方法体外培养人肺腺癌A549/DDP细胞,实验分组为:空白对照组,补中益气汤组和脾细胞处理组。用不同浓度的补中益气汤含药血清和脾细胞刺激A549/DDP细胞,采用MTT法(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide,MTT)测定2种方法对细胞的直接杀伤作用;流式细胞术检测2种方法对细胞凋亡的影响;荧光显微镜观察2种方法对凋亡小体产生的影响。结果MTT法显示同空白对照组相比,补中益气汤含药血清对细胞生长均有抑制作用(P<0.05),且该法同脾细胞作用后效果类似;2种方法处理后,流式细胞术均可见特征性的细胞凋亡峰;在荧光显微镜下可见凋亡细胞。结论补中益气汤含药血清在体外能阻滞A549/DDP细胞的生长增殖,诱导该细胞发生凋亡,且效果同脾细胞类似。
- 井欢唐莹于丹刘春英
- 关键词：补中益气汤细胞周期细胞凋亡
- 补中益气汤对A549荷瘤小鼠脾脏上Caspase-3蛋白表达影响研究被引量：7
- 2014年
- 目的研究补中益气汤对半胱氨酸天冬氨酸酶—3(Caspase—3)在人肺腺癌细胞株(A 549)荷瘤小鼠脾脏上表达的影响。方法随机对照法将24只A 549荷瘤BALB/c小鼠分为空白对照组,补中益气汤低剂量组、补中益气汤高剂量组,顺氯氨铂(cisplatin,DDP)组,补中益气汤每日给药2次连续10天,顺铂每日给药1次连续3天,在连续15天后将所有荷瘤小鼠的脾脏取出。将新鲜的脾脏组织固定后制作石蜡切片。免疫组织化学法检测各组脾组织中Caspase—3蛋白表达的部位与含量多少,聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测各组组织中Caspase—3 mRNA的表达。结果免疫组化结果显示与空白对照组相比,补中益气汤低剂量组Caspase—3蛋自的表达量显著增多(P<0.05),补中益气汤高剂量组蛋白的表达量增多(P<0.05)。而DDP组与空白对照组相比无统计学意义,DDP组与补中益气汤低剂量组、补中益气汤高剂量组相比的差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。RT—PCR结果同免疫组化结果具有一致性。结论补中益气汤可增加A 549荷瘤小鼠脾脏上Caspase—3蛋白的表达,从而使Caspase—3诱导肿瘤细胞凋亡的作用增强。
- 王雨刘春英
- 关键词：人肺腺癌细胞株补中益气汤
