您的位置: 专家智库
>
资助详情 >
黑龙江省自然科学基金(C200624)
黑龙江省自然科学基金(C200624) 作品数:38 被引量:137 H指数:7 相关作者: 邵淑丽 张伟伟 李旭艳 杨志宏 张珍珠 更多>> 相关机构: 齐齐哈尔大学 温州大学 东北师范大学 更多>> 发文基金: 黑龙江省自然科学基金 黑龙江省教育厅科学技术研究项目 黑龙江省研究生创新科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
树麻雀的体温调节 被引量:1 2011年 为探讨树麻雀的体温调节,对不同环境温度和光周期条件下的气候箱驯化树麻雀日体温、光照和黑暗两时段体温,以及季节驯化树麻雀的体温等进行比较。结果发现,环境温度对树麻雀体温影响显著(P﹤0.05),低温环境中树麻雀体温调节标准升高;光周期是树麻雀体温日节律调节的信号,光消失时树麻雀将启动相应的降低体温标准的节能预算对策;树麻雀体温的季节性差异极显著(P﹤0.01),夏、秋、冬和春四季树麻雀体温依次降低。总之,能量收支预算决定了树麻雀体温调节,高的体温和体温调节能力是树麻雀能够成为具有较高适合度的遍布物种的重要生理基础。 杨志宏 邵淑丽 陈闯关键词:树麻雀 温度 光周期 体温 体温调节 MDR1基因shRNA真核表达质粒的构建 2014年 为了构建靶向MDR1基因的短发夹RNA(shRNA)真核表达重组质粒,试验针对MDR1基因序列选取3个干涉靶点,设计合成3条编码shRNA的DNA模板,分别定向克隆到真核表达质粒pSilencer 3.1-H1中构建重组质粒,再进行菌落PCR扩增和测序鉴定。结果表明:菌落PCR扩增得到与预期大小相同的阳性带,经DNA测序证实插入片段完全符合设计要求,序列无突变。说明成功构建了3个靶向MDR1基因的真核表达重组质粒pSilencer 3.1-H1 shRNA。 李旭艳 邵淑丽 恽冬泽关键词:MDR1基因 真核表达重组质粒 干扰MDR1基因表达提高急性早幼粒白血病HT9细胞对紫杉醇的敏感性 被引量:2 2017年 以人类急性早幼粒白血病HT9细胞为实验对象,利用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术干扰MDR1基因表达,提高HT9细胞对紫杉醇的敏感性。构建了3种靶向MDR1基因的重组干扰载体,稳定转染HT9细胞后,采用qRT-PCR和Western blotting方法,分别检测MDR1基因的m RNA和蛋白表达水平,用MTT法检测各转染组细胞对紫杉醇的敏感性,流式细胞术检测各组细胞药物外排功能。结果显示,成功构建了3种靶向MDR1的重组干扰载体p3.1-1、p3.1-2和p3.1-3。3种重组干扰载体不同程度抑制HT9细胞中MDR1基因的表达,其中重组干扰载体p3.1-3对MDR1基因沉默效果最好,对m RNA和蛋白的沉默效率分别为73.80%和47.61%,与对照组相比,转染p3.1-3重组干扰载体的细胞对紫杉醇的IC50由(1.26±0.17)μg/m L降至(0.46±0.07)μg/m L,逆转率达到(63.48±5.91)%,并且药物外排功能也明显降低。以上实验结果表明,3种靶向MDR1的重组干扰载体均能抑制MDR1基因表达,其中p3.1-3对MDR1基因干扰效果最好,并且能够有效提高HT9细胞对紫杉醇的敏感性,降低细胞药物外排功能。 邵淑丽 肖越 张伟伟 李旭艳 张珍珠关键词:RNAI 大蒜素联合阿霉素诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡作用 2014年 研究大蒜素联合阿霉素诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡的作用。台盼蓝拒染法检测细胞增殖活性,通过光镜、荧光显微镜、透射电镜、DNA琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术控测不同浓度的大蒜素和阿霉素单独及联合作用对SGC-7901细胞增殖的影响。结果表明,大蒜素与阿霉素联合作用可增强诱导细胞凋亡。 张希锐 邵淑丽 李凤英 张伟伟关键词:大蒜素 阿霉素 SGC-7901 莪术油对胃癌细胞SGC-7901增殖和凋亡的影响 被引量:4 2012年 研究莪术油影响人胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的机制。采用台盼蓝拒染法检测不同剂量莪术油对胃癌细胞SGC-7901的生长抑制率;光学显微镜观察细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳检测细胞DNA片段化情况;流式细胞术检测细胞线粒体膜电位的改变、细胞凋亡率以及细胞周期分布。实验结果表明:作用48h时,最佳浓度为110μg/mL,IC50值为104.958μg/mL。DNA电泳可见有梯状条带出现,流式细胞术法显示有凋亡峰出现。莪术油可诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡。 孙宏岩 邵淑丽 李爽 张伟伟关键词:莪术油 胃癌 SGC-7901 细胞凋亡 羟基喜树碱联合丝裂霉素诱导人白血病K562细胞凋亡 2012年 观察羟基喜树碱与丝裂霉素联合应用对人白血病细胞K562的作用效果,并探讨其机制。不同浓度羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合作用于人白血病细胞K562后,应用台盼蓝拒染法检测细胞生长抑制率,计算合用指数(CI),流式细胞仪(FCM)检测K562细胞凋亡率,吖啶橙(AO)荧光染色和透射电镜观察凋亡形态学变化。结果表明:单独应用时羟基喜树碱和丝裂霉素的IC50分别是8μg/mL和12.5μg/mL,联合应用时IC50下降为4μg/mLHCPT)和3.6μg/mL(MMC),CI=0.78,为协同效应。羟基喜树碱与丝裂霉素单独及联合应用均可诱导K562细胞凋亡。2种药物联合应用时的凋亡率高于各自单独用药。羟基喜树碱与丝裂霉素联合应用可以通过共同诱导细胞凋亡,协同抑制人白血病细胞生长。 陈琳 邵淑丽 武广慧 张伟伟关键词:羟基喜树碱 丝裂霉素 K562细胞 扎龙国家自然保护区6种雀形目鸟类血液蛋白的遗传多态性 被引量:2 2009年 采用SDS-聚丙烯酰氨凝胶电泳法,对扎龙自然保护区6种雀形目鸟类(黄喉鹀、黄眉柳莺、黄胸鹀、虎纹伯劳、麻雀和灰头鹀)的4个血液蛋白位点[血红蛋白(Hb)、白蛋白(Alb)、转铁蛋白(Tf)和腺苷脱氨酶(Ada)]进行了多态性检测.结果表明:研究区6种鸟类在这4个血液蛋白位点上均存在多态性,这6种鸟在Ada座位上均表现出较大的遗传变异性;黄眉柳莺的群体遗传变异较大,灰头鹀的群体稳定性相对较高;这6种鸟可划分为两大类,黄喉鹀、黄胸鹀、灰头鹀和黄眉柳莺聚为一大类,麻雀和虎纹伯劳聚为另一类,这与6种雀形目鸟类的实际分类地位基本相符;研究区较高的体温调节价和取食压力并未导致6种鸟类血液蛋白的遗传结构产生较大变异,可能是由于该地区雀形目鸟类与外界存在一定的基因交流,从而缩减了其群体遗传上的变异和分化. 徐兴军 吕建伟 禤立芳 张东月 周双涛 赵衎 王滨 邵淑丽关键词:雀形目鸟类 血液蛋白 遗传多态性 聚类分析 靶向MRP1基因的shRNA稳定逆转肺癌的多药耐药性 被引量:6 2011年 目的:利用短发夹RNA(shRNA)表达载体逆转肺癌细胞株(A549/DDP)的多药耐药性。方法:构建2个多药耐药相关蛋白1(MRP1)基因特异的shRNA表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-MRP1,稳定电转染A549/DDP细胞,实时荧光定量PCR分析MRP1 mRNA的表达,免疫荧光检测细胞MRP1蛋白的表达,流式细胞术检测细胞内罗丹明123(Rho123)的潴留情况。MTT法检测细胞活力。结果:成功构建了shRNA表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-MRP1,稳定转染sh-MRP1-2.1-1和sh-MRP1-2.1-2后,A549/DDP细胞MRP1 mRNA和蛋白表达均显著降低,细胞内Rho123相对荧光强度由16.93%±0.58%分别升高至89.02%±0.59%和82.56%±1.37%;A549/DDP亲本细胞顺铂的IC50分别由(101.45±0.64)μmol/L降至(38.06±0.05)μmol/L和(53.72±0.36)μmol/L,5-氟尿嘧啶的IC50分别由(263.20±2.00)μmol/L降至(98.82±1.16)μmol/L和(141.81±0.49)μmol/L。结论:shRNA干扰表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-RMP1能够稳定、持久地抑制MRP1基因,有效地逆转了A549/DDP细胞的多药耐药性。 邵淑丽 崔婷婷 贾红双 谢振丽 张伟伟 刘迁 陈薇薇 李爽 陈丽关键词:短发夹RNA 多药耐药 多药耐药相关蛋白1 RNA干扰 A549/DDP细胞 沉默MDR1基因增强急性早幼粒白血病耐药细胞HT9药物敏感性 被引量:4 2012年 该研究利用短发卡RNA(small hairpin RNA,shRNA)表达载体沉默HT9急性早幼粒白血病耐药细胞MDR1基因表达,以提高细胞对三尖杉酯碱、阿霉素的敏感性。通过设计合成编码shRNA的DNA模板序列,定向克隆到pSilencer 2.1-U6 neo质粒,成功构建1个P-gp蛋白基因特异的shRNA表达载体,稳定电转染HT9细胞,实时荧光定量PCR分析MDR1 mRNA表达,Western blot检测细胞P-gp蛋白表达,流式细胞术检测P-gp蛋白外排泵功能,MTT法检测细胞对药物敏感性。结果显示,成功构建了shRNA表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-MDR1,转染HT9细胞后,PCR检测重组质粒整合到HT9/sh-2.1-1细胞基因组DNA,获得稳定遗传;HT9/sh-2.1-1细胞MDR1 mRNA表达降低了78.84%(P<0.01),P-gp蛋白表达降低了48.27%(P<0.05),细胞内Rho123相对荧光强度由(10.8±0.58)%升高至(73.56±1.37)%;转染细胞对三尖杉酯碱、阿霉素敏感性明显增强,IC50分别由(2.06±0.15)μmol/L降至(0.57±0.01)μmol/L、(4.04±017)μmol/L降至(1.56±0.05)μmol/L。提示shRNA干扰表达载体pSilencer 2.1-U6 neo-MDR1能够稳定、持久地抑制MDR1基因表达,并能有效增强HT9细胞对三尖杉酯碱、阿霉素的敏感性。 邵淑丽 李旭艳 张伟伟 恽东泽 付博 张珍珠关键词:短发卡RNA MDR1基因 三尖杉酯碱 大蒜素诱导结肠癌HT-29细胞凋亡 被引量:17 2015年 本实验的目的是观察大蒜素(allicin)对人结肠癌HT-29细胞凋亡和增殖的影响,并对其作用机制做初步的探讨。通过利用倒置显微镜、荧光显微镜、透射电镜、流式细胞术以及Real time PCR等方法,对大蒜素处理后的HT-29细胞的形态、存活率、细胞周期分布、细胞凋亡率、线粒体膜电位(驻追m)以及Bax/Bcl-2基因表达比例的变化进行了研究。结果显示,大蒜素可抑制HT-29细胞增殖,且呈剂量依赖性关系。大蒜素作用于HT-29细胞48 h的最佳药物浓度是6滋g/m L。在此条件下,细胞出现明显的凋亡现象。早期和晚期细胞凋亡率分别为(7.48依0.38)%和(10.07依0.78)%,驻追m显著下降(p<0.01),细胞被阻滞于S期和G2期,Bax/Bcl-2的比值显著升高(p<0.01)。因此,我们推测大蒜素可能通过调节Bax和Bcl-2两个基因的表达比例,诱导人结肠癌HT-29细胞的凋亡,进而抑制癌细胞的增殖。 邵淑丽 刘锐 隋文静 赵彬 张伟伟 杨希婷 张楠关键词:大蒜素 BAX BCL-2 人结肠癌