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枣疯病植原体RNA沉默抑制子鉴定和靶标蛋白筛选: 枣(Ziziphus jujuba)是原产我国的乡土树种,也是我国的第一大干果树种。枣疯病是枣树上重要的病害之一,是一种由植原体引起的致死性病害,给枣产业的高质量发展造成严重的危害。植原体通过分泌致病效应因子蛋白,与寄主...; 乔泽森; 关键词：枣疯病 RNA沉默抑制子

一种检测禾谷镰孢菌RNA沉默抑制子的方法: 本发明公开了一种检测禾谷镰孢菌RNA沉默抑制子的方法，属于微生物技术领域。该方法包括构建在禾谷镰孢菌内表达绿色荧光蛋白（eGFP）的重组菌株，之后向所述重组菌株中转入待鉴定的蛋白，最后转入靶向绿色荧光蛋白的RNA沉默载体...; 王双超聂建华郭立华

一种检测禾谷镰孢菌RNA沉默抑制子的方法: 本发明公开了一种检测禾谷镰孢菌RNA沉默抑制子的方法，属于微生物技术领域。该方法包括构建在禾谷镰孢菌内表达绿色荧光蛋白（eGFP）的重组菌株，之后向所述重组菌株中转入待鉴定的蛋白，最后转入靶向绿色荧光蛋白的RNA沉默载体...; 王双超聂建华郭立华

新的柑橘叶斑驳病毒桑树分离株的基因组克隆及其RNA沉默抑制子的鉴定: 唐佳璇

葡萄卷叶伴随病毒RNA沉默抑制子与VvMYB58转录因子互作及功能研究: 郭龙龙

柑橘褪绿矮缩病毒发生及RNA沉默抑制子鉴定: 双生病毒是已知的第二大类的植物病毒,基因组为单链环状的DNA。双生病毒最早在美洲、地中海地区危害严重。上世纪初,在我国的南部和西南地区陆续发现双生病毒在番茄、木薯和南瓜等经济作物上发生严重。随着高通量测序技术的出现与发展...; 叶肖; 关键词：双生病毒

甜菜孢囊线虫RNA沉默抑制子筛选及Hs34B08效应蛋白功能初步研究: 甜菜孢囊线虫是一类严重威胁甜菜生产安全的病原线虫,在全球50多个国家和地区均有发生和分布。该线虫寄主广泛,能够寄生超过218种寄主植物,给多种农作物造成了严重的危害,由于其危害严重性,我国将其列为进境检疫性有害生物名录,...; 蒋陈; 关键词：RNA沉默抑制子

甘蔗线条花叶病毒RNA沉默抑制子的寄主互作蛋白鉴定被引量：2: 2022年; 甘蔗线条花叶病毒(Sugarcane streak mosaic virus,SCSMV)是引起甘蔗花叶病的一种主要病原。SCSMV编码的P1蛋白是RNA沉默抑制子,在SCSMV抑制寄主的RNA沉默防御中发挥关键作用,但其作用机制尚未清楚。与寄主蛋白互作是RNA沉默抑制子发挥其抑制作用的主要途径之一,因此鉴定与病毒RNA沉默抑制子互作的寄主蛋白是研究抑制子作用机制的一个重要方法。为探究SCSMVP1抑制寄主RNA沉默的机制,本研究首先将SCSMVP1基因连接到质粒pGBKT7上构建诱饵质粒pGBKT7-P1,然后对pGBKT7-P1进行毒性和自激活检测,最后以pGBKT7-P1为诱饵,采用酵母双杂交技术从甘蔗cDNA文库中筛选与P1互作的寄主蛋白。结果显示,成功构建pGBKT7-P1诱饵质粒。将pGBKT7-P1诱饵质粒转入Y2HGold酵母菌株后,酵母菌株在SD/-Trp平板及液体培养基中生长良好,表明pGBKT7-P1诱饵质粒对Y2HGold酵母菌株无毒性。含pGBKT7-P1诱饵质粒的酵母菌株在SD/-Trp/X-α-Gal平板上长出白色菌落未变蓝,在SD/-Trp/X-α-Gal/AbA和SD/-Trp/-Leu/X-α-Gal/AbA平板上无菌落生长,表明pGBKT7-P1诱饵质粒无自激活活性。用pGBKT7-P1诱饵质粒对甘蔗cDNA文库进行筛选,经SD/-Trp/-Leu/X-α-Gal/AbA平板筛选1次及SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-Gal/AbA平板筛选3次后,获得42个阳性酵母克隆,提取阳性酵母质粒并导入大肠杆菌中扩大培养,经测序及blastx比对分析,获得13个可能与SCSMV P1互作的寄主甘蔗蛋白,分别是生长素应答蛋白IAA1、IAA15,转录因子NAC、GATA4、OFP4,真核翻译起始因子eIF5A,分子伴侣DnaJ,辅分子伴侣SBA1,重金属相关异戊二烯化植物蛋白HIPP35,mec-8和unc-52蛋白同系物抑制子SMU2,外膜孔蛋白OEP24,及2个未表征蛋白。基于这些蛋白的功能,推测P1可能通过与寄主蛋白互作来调控寄主防御反应相关基因的表达,和/或通过与寄主蛋白互作来影响寄主RNA沉默相关蛋白的合成、加工或转运,从而发挥其RNA沉默抑制子的�; 冯小艳王俊刚王文治沈林波赵婷婷冯翠莲张树珍; 关键词：RNA沉默抑制子 P1蛋白

小麦蓝矮植原体RNA沉默抑制子SWP16互作蛋白的筛选及功能初探: 植原体（phytoplasma）是一种形态不规则且无细胞壁的单细胞原核生物,据统计,全世界由植原体引发的植物病害多达800多种,我国有100余种。我国对植原体病害的报道早在明末《沈氏农书》中就有桑萎缩“凡桑一癃,再无医法...; 杨彦君; 关键词：RNA沉默抑制子

小麦蓝矮植原体RNA沉默抑制子互作蛋白的筛选与分析被引量：1: 2022年; 【目的】揭示小麦蓝矮植原体(WBD phytoplasma)的致病机理及其与寄主的互作关系,为植原体病害防治提供理论依据。【方法】以SWP16为诱饵,将SWP16构建到诱饵载体pBT3-STE和pBT3-SUC上,在小麦酵母双杂交膜系统cDNA文库中筛选与SWP16互作的蛋白,并确定最佳的筛库条件。通过α-半乳糖苷酶活性检测试验对筛选到的互作蛋白进行二次验证,并运用Uniprot对其进行Gene Ontology(GO)注释分析。【结果】以pBT3STE-SWP16作为筛库的诱饵蛋白,确定20 mmol/L 3-AT为筛选文库的最佳浓度,从小麦cDNA文库中筛选到20种互作蛋白,包括Rieske蛋白、细胞色素b5、CASP蛋白等。经过复筛和α-半乳糖苷酶活性检测试验进一步验证了互作关系,其中14种互作蛋白参与运输、pH调节、光合作用、内质网应激反应、蛋白质泛素化等生理过程;18种互作蛋白存在于线粒体、内质网、细胞膜、细胞质、叶绿体和细胞壁等6种细胞组分中;20种互作蛋白的分子功能主要包括几丁质酶活性、反转运蛋白活性、脱水酶活性、转移酶活性和转录因子活性等。【结论】筛选获得20种与小麦蓝矮植原体效应蛋白SWP16互作的蛋白,有助于推动小麦蓝矮植原体与寄主互作关系的研究。; 杨彦君丁磊马欢吴云锋; 关键词：酵母双杂交

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