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应用孕妇外周血cff-DNA检测胎儿RHD 血型 基因的方法学研究 2025年 目的研究一种新型应用孕妇外周血胎儿游离DNA(cell free fetal DNA,cff-DNA)检测胎儿RHD 血型 基因的无创检测方法,并分析该方法的可行性及准确性。方法以2023年8月—2024年8月本医学中心建档的RhD阴性孕妇为研究对象,采集孕妇5~8 mL外周血,首先对母亲RHD 基因型进行检测,采用吸附柱法提取孕妇外周血中的基因组DNA,用PCR-SSP法检测母亲RHD 基因分型,筛选出符合纳入标准的孕妇;然后采用磁珠法提取孕妇血浆中的cff-DNA,对提取得到的cff-DNA先进行质控检测,使用甲基化敏感限制性内切酶处理cff-DNA,酶切后扩增RASSF1A基因及β-actin基因,以确保提取到胎儿来源的cff-DNA;再进行胎儿RHD 血型 基因检测,运用巢式结合荧光探针的qPCR方法,扩增RHD 第4、7、10外显子,确定胎儿RhD血型 ;最后对胎儿cff-DNA RHD 血型 基因检测结果准确性进行验证,追踪出生后新生儿血型 ,以其为金标准,判断孕妇外周血cff-DNA RHD 血型 基因检测结果的准确性。结果收集到4例RhD阴性孕妇样本,进行母亲RHD 基因分型,结果3例为RHD 全缺失,1例为RHD -CE(2-9),均符合纳入标准;对孕妇外周血中提取得到的cff-DNA,酶切后质控验证,RASSF1A基因均为阳性,β-actin基因均为阴性,均提取到cff-DNA;运用cff-DNA检测胎儿RHD 血型 基因,结果显示4例RHD 第4、7、10外显子均为阳性,判断胎儿RhD血型 为RhD阳性;追溯4例新生儿,新生儿血型 血清学结果为RhD阳性。结论这种新的孕妇外周血cff-DNA检测胎儿RHD 血型 基因的方法可行,检测结果与出生后的新生儿血型 结果一致,其对早期诊断RhD相关HDFN及指导RhD阴性孕妇应用抗D免疫球蛋白具有重要意义。 任道菊 杨金华 李小薇 肖军 李翠莹关键词:RHD阴性 巢式PCR PCR-SSP技术联合抗人球蛋白卡式法在ABO和RhD血型 鉴定困难患者中的应用 2024年 目的探究聚合酶链反应-序列特异性引物(PCR-SSP)技术联合抗人球蛋白卡式法在ABO和RhD血型 鉴定困难患者中的应用。方法选取118例ABO与RhD血型 鉴定困难患者血型 标本,分别应用PCR-SSP技术、抗人球蛋白卡式法分析患者血型 情况。结果118例血型 鉴定困难者采用抗人球蛋白卡式法联合PCR-SSP技术明确检出ABO血型 113例,同时应用PCR-SSP可以确定ABO亚型,5例未检出血型 的样品经PCR-SSP测序发现,基因分型分别为BO02、A205O01、A102B01、A201B01、B01B01,分别出现第7外显子640A>G杂合突变、第7外显子1009A>G杂合突变、第3外显子150G>C杂合突变、第6外显子240T>C、第7外显子431G>T杂合突变;采用抗人球蛋白卡式法联合PCR-SSP检出RhD血型 114例,未检出的4例进行测序,1例显示为RhD weak D 779A/G突变;3例为RhD weak D type 4.0(包括602C/G、667T/G以及819G/A突变)。结论ABO和RhD血型 鉴定困难患者应用PCR-SSP技术联合抗人球蛋白卡式法进行鉴定可以准确鉴定血型 ,并发现血型 具体亚型,保证输血安全。 向健 王晶 王俊 田文武关键词:PCR-SSP技术 RHD血型 血型鉴定困难 一种用于检测RHD 血型 突变位点的SNP标记及应用 本发明提供一种用于检测RHD 血型 突变位点的SNP标记及应用,基因诊断制品技术领域,所述的SNP标记在RHD 基因Exon2编码区存在由起始密码子起第208位碱基出现C>T突变;第210、211位碱基之间插入G。导致第... 刘师序一种ABO正定型及RhD血型 检测卡 本申请属于血型 检测卡的技术领域,涉及一种ABO正定型及RhD血型 检测卡,其包括卡板,卡板的一端设置有加样管,所述卡板的一侧为支撑侧,卡板于支撑侧开设有收纳槽,卡板于收纳槽内设置有支撑组件。本申请具有解决检测人员需手持卡板... 宋亚琳一种ABO正定型及RhD血型 检测卡 本申请属于血型 检测卡的技术领域,涉及一种ABO正定型及RhD血型 检测卡,其包括若干待拼接的单元板体,单元板体的一端设置有单元加样管,单元板体于单元加样管的管口处设置有密封组件。本申请具有减少特定项目检测导致加测可种剩余加... 宋亚琳一种精准的AB0和RHD 血型 定型检测卡 本实用新型涉及血型 定型技术领域,具体涉及一种精准的AB0和RHD 血型 定型检测卡;包括承载板、支撑架、托架、卡套、试剂管和固定机构,固定机构包括两个固定组件,每个固定组件均包括转动轴、支撑板和固定插销,拉动第二把手,使得支... 刘阳 杨明 闫世杰利用RhD血型 设计和模拟常规输血血清学教学试验 2023年 目的利用RhD血型 设计和模拟输血学技术中的常规血清学试验,以解决试验教学中阳性标本不易获得的问题。方法利用RhD阳性红细胞、RhD阴性红细胞和抗-D试剂设计并模拟输血学技术中的酶处理试验,吸收放散试验,抗体鉴定试验和凝聚胺法交叉配血试验。结果木瓜蛋白酶处理红细胞可使RhD阳性红细胞与IgG抗-D反应出现肉眼可见的凝集;用RhD阳性红细胞和IgG抗-D成功模拟了吸收放散试验;通过创建不同的鉴定谱和鉴定细胞组合,成功模拟抗-Jk^(a)和抗-Fy^(a)的抗体鉴定;利用RhD阴性和阳性红细胞与IgG抗-D反应,成功模拟了凝聚胺法交叉配血相合与不相合的两种情况。结论利用RhD血型 可以模拟输血常用的大部分血清学试验,可用于输血血清学试验教学。 牛迎迎 王江 陈春霞 黄春妍关键词:输血医学 血清学试验 试验教学 云南省农村育龄人群ABO和RhD血型 的调查研究 被引量:1 2023年 以2013—2019年云南省接受国家免费孕前优生健康检查的20~49岁农村育龄人群为研究对象,分析云南省不同民族、不同地区人群ABO和RhD血型 的占比情况。在纳入的2748131名研究对象中,在ABO血型 中,占比由高到低依次为:A型(32.60%)、O型(30.60%)、B型(27.33%)和AB型(9.47%);在RhD血型 中,RhD阳性占99.29%,RhD阴性占0.71%。云南省农村地区育龄人群中,不同民族、不同地区间血型 占比之间的差异均有统计学意义(均P<0.001)。在参检人数超过3000名的18个民族中,瑶族(42.75%)、布依族(40.58%)和傣族(40.37%)O型血占比高于其他民族,A型和AB型血占比最高的为佤族(分别为40.15%和11.23%),B型血占比中苗族(34.70%)、拉祜族(34.42%)高于其他民族;RhD-血型 占比最高的为佤族(1.88%)。在云南省16个州、市中,O型血占比最高的为西双版纳傣族自治州(40.27%),保山市(36.39%)、临沧市(36.22%)和大理白族自治州(36.06%)A型血占比高于其他地区,迪庆藏族自治州(30.83%)和曲靖市(30.48%)B型血占比高于其他地区,AB型血占比最高的为昭通市(11.19%);RhD-血型 占比最高的为红河哈尼族彝族自治州(1.37%)。佤族A RhD+(39.36%)、A RhD-(0.78%)、AB RhD+(11.03%)、AB RhD-(0.20%)和O RhD-(0.48%)5种血型 占比均高于其他民族,差异有统计学意义(P<0.001)。 谢正媛 曹光 王涛 孔彩 李奕晓 祖维磊 赵子高 叶汉风关键词:ABO血型 RHD血型 少数民族 育龄人群 输血相容性检测实验室RhD血型 检测策略专家共识 被引量:11 2023年 RhD抗原是Rh血型 系统最具免疫原性的抗原,可导致溶血性输血反应(HTRs)和胎儿与新生儿溶血病(HDFN)。我国RhD阴性红细胞属于稀缺资源,RhD阴性患者及时输注红细胞面临资源挑战。对于初筛(盐水法)为RhD阴性的不同人群,使用何种检测策略、如何出具检测报告、何时需要鉴定“亚洲型”DEL(RHD *01EL.01,c.1227G>A)是临床输血工作者较为困惑的问题。本共识由国内200余位输血相容性检测技术专家进行深入探讨后完成,旨在进一步规范、细化RhD血型 检测策略,为实现不同RhD血型 患者精准输血,不断提高RhD-HTRs及RhD-HDFN的防治水平提供技术支撑,为今后制定RhD血型 检测策略行业标准奠定基础。 输血相容性检测实验室RhD血型检测策略专家共识编写组 马春娅 李小飞 姬艳丽 于洋 邵超鹏 付涌水关键词:RHD血型 孕产妇 受血者 献血者 875例孕妇ABO/RhD血型 和不规则抗体检测结果分析 被引量:5 2023年 目的分析孕妇ABO/RhD血型 和不规则抗体检测结果,为临床用血安全及新生儿溶血症的防治提供参考。方法选取就诊产检的875例孕妇(妊娠组)及同期非妊娠健康体检妇女875例(对照组),微柱凝胶抗人球蛋白法检测ABO/RhD血型 和不规则抗体及试管法检测抗体特异性、Ig类型、37℃温度下反应性并分析结果。结果妊娠组ABO血型 中A型、B型、O型及AB型分别为26.63%、28.34%、28.23%、16.80%,对照组分别为27.66%、27.43%、29.26%、15.66%,妊娠组RhD血型 阳性者占98.86%,对照组为98.17%,两组ABO和RhD血型 分布状况比较差异无统计学意义(P>0.05)。妊娠组孕妇中不规则抗体阳性者占1.37%,其中有既往妊娠史者9例、有输血史者1例;对照组妇女中不规则抗体阳性者占0.23%,其中有既往妊娠史者1例、有输血史者0例;妊娠组不规则抗体阳性率及有输血史(或妊娠史)的不规则抗体阳性率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。妊娠组孕妇既往妊娠次数0次、1次、2次、≥3次者不规则抗体阳性检出率分别为0.64%、1.28%、2.44%、6.25%,差异有统计学意义(P<0.05)。妊娠组孕妇不规则抗体阳性者Rh血型 系统、MNS血型 系统、Lewis血型 系统分别占83.33%、8.33%、8.33%,抗体的特异性鉴定抗E、抗cE、抗D、抗C、抗Ce、抗M、抗Lea均有检出,阳性率分别为25.00%、16.67%、16.67%、16.67%、8.33%、8.33%、8.33%,其余抗体未检出,抗体效价区间1∶8~1∶512,Ig类型鉴定中IgG占到83.33%,IgG+IgM、IgM各占8.33%,37℃温度下反应性区间为1+~3+。结论妊娠孕妇不规则抗体阳性率高于正常非妊娠妇女,妊娠次数增加是不规则抗体产生的主要原因之一,应重视对孕妇进行不规则抗体的筛查,以预防新生儿溶血症及保障输血安全。 俞松意 潘腾飞 陈敏霞关键词:不规则抗体 孕妇 ABO血型 RHD血型
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