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- 一种快速检测O型口蹄疫病毒的方法
- 本发明的目的是提供一种检测O型口蹄疫病毒的方法,即在筛选获得了一组高效特异性检测O型口蹄疫病毒的RT‑RAA引物探针的基础上,以RT‑RAA技术和CRISPR/Cas13a技术结合,实现对FMDV‑O临床样本的高灵敏度、...
- 沙洲尼博崔进郑辉李晨钰董雅琴张慧房琳琳刘爽王晓华戈胜强魏荣
- 一种O型口蹄疫病毒的多表位VP1融合蛋白、病毒样颗粒和多克隆抗体以及它们的用途
- 本申请涉及检测O型口蹄疫病毒抗体相关技术领域,具体公开了一种O型口蹄疫病毒的多表位VP1融合蛋白、病毒样颗粒和多克隆抗体以及它们的用途。本申请以病毒样颗粒作为竞争抗原以及以多克隆抗体作为标记抗体,并基于竞争法建立检测O型...
- 陈锡俊董李学张晓利郭恋杨丹李洁关团郭海燕薛文苏晓慧隋大宗蒋萍萍唐荧赵秀英李硕
- 猪源SIRT5促进O型口蹄疫病毒在PK-15细胞复制
- 2024年
- 目的探究猪源SIRT5对O型口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus serotype O,FMDV-O)复制的影响及其调控FMDV-O复制的初步机制。方法利用Western Blotting和RT-qPCR检测FMDV-O感染PK-15细胞后内源性SIRT5表达情况;设计合成3对SIRT5特异性siRNA,通过Western Blotting和RT-qPCR检测SIRT5、FMDV-O蛋白水平、转录水平及病毒拷贝数的变化情况;构建SIRT5真核表达质粒转染至PK-15细胞,运用Western Blotting、RT-qPCR实验方法探究过表达SIRT5对FMDV-O复制的影响,同时利用RT-qPCR检测过表达SIRT5对SeV、FMDV-O诱导的I型干扰素刺激基因mRNA表达水平的影响。结果FMDV-O感染PK-15细胞后内源性SIRT5的表达上调;siRNA干扰SIRT5抑制FMDV-O的复制;过表达SIRT5促进FMDV-O复制;过表达SIRT5降低了SeV、FMDV-O诱导的干扰素刺激基因mRNA的表达水平。结论FMDV-O感染刺激宿主SIRT5表达,而猪源SIRT5通过抑制I型干扰素刺激基因的产生进而促进FMDV-O复制。本研究为进一步探究猪源SIRT5促进FMDV-O复制的机制提供参考依据。
- 陈国辉史喜绢别鑫恬杨行赵思越张大俊赵登率闫文倩陈玲玲赵美玉何路郑海学刘霞张克山
- 关键词:PK-15细胞
- O型口蹄疫病毒CATHAY株持续感染BHK21细胞系的建立
- 2024年
- 为研究口蹄疫病毒(FMDV)持续感染形成的分子机理,本研究利用氯化铵、利巴韦林、免疫阳性血清和低剂量病毒处理O型FMDV(CATHAY株)和BHK21细胞建立持续感染细胞系,采用RT-PCR、核酸测序、IFA和Western-blot方法筛选和验证持续感染细胞模型。结果显示,除了低剂量病毒感染方法能连续传代,且从第5~20代次细胞中扩增到与亲代毒株高度同源的FMDV VP1基因,并能检测到VP1蛋白外,其他方法由于对细胞具有明显毒性作用,未能建立持续感染细胞模型。笔者认为化学药物可能不适合所选病毒毒株建立持续感染模型,而利用低剂量病毒法建立FMDV持续感染细胞系是一种简单可行的方法。上述结果表明,本研究成功建立了FMDV持续感染BHK21细胞模型,这为研究FMDV与宿主的互作关系,阐明FMDV持续感染机理奠定了重要的理论基础。
- 彭德财刘伟高闪电马云云温升辉侯茁师铭咸邵军军常惠芸丁嘉烽
- 关键词:口蹄疫病毒利巴韦林氯化铵
- O型口蹄疫病毒和塞内卡病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量:4
- 2024年
- 为建立O型口蹄疫病毒(FMDV-O)和塞内卡病毒(SVV)快速鉴别检测方法,本实验根据FMDV-O VP2基因序列和SVV P3基因序列,采用Primer Express3.0软件分别设计引物与探针,并经各反应条件的优化初步建立了可同时鉴别检测FMDV-O和SVV的双重荧光定量RT-PCR方法。利用该方法检测临床常见猪病毒,结果显示可同时检测出FMDV-O和SVV核酸,且与猪水泡性口炎病毒(VSV)、猪水疱病毒(SVDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、A型口蹄疫病毒(FMDV-A)、A-1型口蹄疫病毒(FMDVA-1)核酸均无交叉反应,并可检测到FMDV-O PanAsia株、cathay株、Ind-2001株和Mya-98株等主要流行株,特异性强;该方法对含FMDV-O和SVV拼接质粒标准品的最低检测限为7.17×10^(2)拷贝/μL,敏感性高;利用该方法检测了同一时间和不同时间提取的3种不同浓度的质粒标准品,结果显示批内和批间重复性试验Ct值的变异系数均小于3%,重复性好。利用本实验所建立的方法对30份临床样品进行检测,结果与各病毒单一荧光定量RT-PCR检测结果一致。本研究建立的FMDV-O和SVV双重荧光定量RT-PCR方法能够快速准确的鉴别检测FMDV-O和SVV,为口岸检疫的快速通关提供了技术手段。
- 张展陈信全冯国金黄慧贤利光辉
- 关键词:O型口蹄疫病毒VP2基因
- 一种猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达载体及其构建方法和应用
- 本发明公开了一种猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达载体及其构建方法,构建得到的猪O型口蹄疫病毒结构蛋白VP1的表达载体在以谷氨酸棒状杆菌作为底盘菌株时能够分泌表达,与现有技术相比,实现了在除大肠杆菌以外的底盘菌株中表达...
- 刘秀霞崔思楠金凌鹏闵远乐王浩王一凡谢佳康杨艳坤白仲虎
- O型口蹄疫病毒VP1蛋白单克隆抗体的制备及DC-FLISA检测方法的建立
- 口蹄疫是由口蹄疫病毒(FMDV)引起的偶蹄动物的接触性传染病,被发现120多年后仍然是牲畜的重要病原体,在口蹄疫病毒流行地区,生产损失和疫苗接种造成的年度成本估计为6.5-21亿美元。控制是非常困难的,因为口蹄疫病毒具有...
- 赵奇
- 关键词:O型口蹄疫
- 猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的VLPs及其制备方法与应用
- 本发明属于分子生物学技术领域,具体涉及猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒抗原表位的病毒样颗粒及其制备方法与应用。所述VLPs由猪圆环2d型框架嵌合猪O型口蹄疫病毒单个表位或不同抗原表位组合后得到的重组蛋白组装而成,所述...
- 陈金顶罗朝唯丁红星吴珂珂范双旗黄竣聪阮洋李玉婉赵明秋易琳
- 猪塞内卡病毒(SVA)和O型口蹄疫病毒双重荧光RT-PCR检测方法中阳性参考品的制备
- 2024年
- 为制备猪塞内卡病毒(SVA)和O型口蹄疫病毒(FMDV-O)阳性质控品,根据选择的目的基因片段,设计阳性参考品序列,通过基因拼接技术和装甲RNA技术,制备含有口蹄疫O型病毒和塞内卡病毒目的基因的装甲RNA病毒样颗粒,用来作为塞内卡病毒(SVA)和O型口蹄疫病毒(FMDV-O)的阳性参考品。结果表明,该阳性质控品无生物传染性,可以真实模拟病毒粒子结构,耐受DNaseI及RNaseA,稳定性高,在-70℃保存18个月,荧光RT-PCR检测结果均无显著差异。本试验制备的含有猪O型口蹄疫病毒和塞内卡病毒目的基因的装甲RNA病毒样颗粒,可以作为SVA和FMDV-O双重荧光RT-PCR检测方法中进行质量控制的阳性参考品。
- 陈信全张展周伟光张峥嵘黄慧贤
- 关键词:O型口蹄疫病毒MS2噬菌体
- 一种时间分辨荧光微球修饰抗体的制备方法及其制备的O型口蹄疫病毒检测试纸条和应用
- 本发明提供了一种时间分辨荧光微球修饰抗体的制备方法及其制备的O型口蹄疫病毒检测试纸条和应用,属于体外检测技术领域。一种时间分辨荧光微球修饰抗体的制备方法,包括以下步骤:将平均粒径200nm的时间分辨荧光微球进行活化,将活...
- 蒋韬孙燕燕林密李昕张海霞张宏燕闫丽欢张彦鹏杨光包艳芳
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- 金宁一

- 作品数:1,124被引量:2,096H指数:17
- 供职机构:延边大学农学院
- 研究主题:重组鸡痘病毒 口蹄疫病毒 新城疫病毒 HIV-1 核酸疫苗
- 郑海学

- 作品数:629被引量:484H指数:10
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所
- 研究主题:非洲猪瘟病毒 口蹄疫病毒 蛋白 病毒 口蹄疫
- 鲁会军

- 作品数:321被引量:573H指数:12
- 供职机构:吉林农业大学
- 研究主题:口蹄疫病毒 核酸疫苗 口蹄疫 重组鸡痘病毒 多表位
- 郑敏

- 作品数:279被引量:812H指数:14
- 供职机构:广西动物疫病预防控制中心
- 研究主题:口蹄疫病毒 口蹄疫 重组鸡痘病毒 原核表达 核酸疫苗
- 常惠芸

- 作品数:393被引量:902H指数:15
- 供职机构:中国农业科学院兰州兽医研究所
- 研究主题:口蹄疫病毒 口蹄疫 非洲猪瘟病毒 兽用药物 药物