搜索到409篇“ NADH-细胞色素B5还原酶“的相关文章
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- 烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius)属同翅目(半翅目),粉虱科,粉虱亚科,小粉虱属,是一种危害多种农业系统的农业害虫。自二十世纪八十年代以来,大量杀虫剂用于防治烟粉虱,频繁且不合理的使用杀虫剂,导致...
- 易胜
- 关键词：烟粉虱NADH-细胞色素B5还原酶表达量抗性
- siRNA表达载体介导靶向NADH-细胞色素b5还原酶基因的RNA干扰实验研究
- 2008年
- 目的探索经载体介导的RNA干扰抑制人NADH-细胞色素b5还原酶(b5R)基因表达的可行性。方法应用网络在线软件设计并合成两条针对b5R mRNA的RNA干扰的DNA模板片段,分别将其克隆至经过改建、带有neo基因的pSilencer1.0-U6载体上,构建成siRNA真核表达载体;脂质体转染法将上述重组质粒转入人肺成纤维细胞和BEL-7402肝癌细胞株。通过半定量RT-PCR和荧光定量RT-PCR分析,检测所构建的重组siRNA真核表达载体对b5R基因表达的干扰效应。结果获得两个能在细胞内生成靶向b5R基因siRNA的重组载体pSib5R-1和pSib5R-2;其中pSib5R-2对成纤维细胞b5RmRNA的抑制率达81·7%,对BEL-7402细胞b5RmRNA的抑制率达60%。结论两种细胞b5R基因的表达均可被载体介导的RNA干扰有效抑制;成功构建了针对b5R基因的siRNA表达载体,为建立稳定表达siRNA的、b5R酶缺陷的细胞模型提供了实验基础。
- 庄岳鹏王水良兰风华
- 关键词：NADH-细胞色素B5还原酶RNA干扰小干扰RNA
- RNA干扰法建立人NADH-细胞色素b5还原酶缺陷的细胞表型
- 2008年
- 目的探索经载体介导的RNA干扰法建立人NADH-细胞色素b5还原酶（EC1．6．2．2，NADH-cytochrome b5 reductase，65R）缺陷细胞系的可行性。方法设计并构建b5R的两种小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）表达载体，脂质体转染法瞬时转染BEL-7402细胞，半定量逆转录-PCR分析重组载体的干扰效应；G418筛选两种表达载体稳定转染的BEL-7402细胞，并通过稳定转染的细胞克隆在b5R mRNA水平，酶活性，酶含量等方面干扰效果的鉴定，获得b5R缺陷的细胞克隆；噻唑蓝法测定b5R缺陷细胞的生长曲线。结果获得两个靶向b5R基因的siRNA重组表达载体pSib5R-1和pSib5R-2，其中pSig5R-2瞬时转染对BEL-7402细胞b5RmRNA的抑制率达68．3％。获得18个稳定转染的细胞克隆，pSib5R-2转染的克隆中有两个克隆b5RmRNA抑制率达48．2％和56．2％，酶活性抑制率为54．6％和63．5％，酶含量也有明显降低。b5R酶缺陷没有改变细胞的生长速度。结论b5R基因的表达可被载体介导的RNA干扰有效抑制，成功建立了b5R缺陷的细胞表型，为进一步研究b5R基因的功能以及探讨Ⅱ型隐性先天性高缺血红蛋白症的发生机制提供了实验依据和材料。
- 庄岳鹏王水良兰风华
- 关键词：NADH-细胞色素B5还原酶RNA干扰小干扰RNA
- NADH-细胞色素b5还原酶缺陷与隐性先天性高铁血红蛋白血症
- 2008年
- NADH-细胞色素b5还原酶(简称b5R),是一种在体内广泛分布,具有重要生理功能的氧化还原酶类。b5R基因突变可导致b5R酶活性的降低,而b5R缺陷将导致隐性先天性高铁血红蛋白血症(RCM)。本文就b5R研究的某些进展及与RCM的关系作一介绍。
- 庄岳鹏兰风华
- 关键词：NADH-细胞色素B5还原酶
- NADH-细胞色素b5还原酶突变型的原核表达及产物纯化
- 2008年
- 遗传性高铁血红蛋白血症（RCM）是一种常染色体隐性遗传性疾病。通常是由患者的NADH-细胞色素b5还原酶（b5R）缺陷所致。近年来通过对该病的患者进行生物化学、免疫学及分子生物学研究。共发现6种新的突变基因型（R57Q，L72P、C203Y、R60H、M176T和P264L）。为了探讨b5R基因突变引起RCM的分子病理机制，研究突变型b5R蛋白结构和功能的关系，我们构建了野生型pGST-b5R和突变型pGST—b5RL72P表达载体，并在大肠杆菌中表达，获得了纯化的GST—b5R和GST—b5RL72P蛋白，为研究该突变对b5R酶的影响打下了基础。
- 郑德柱兰风华黄梁浒吴玉水谢飞程烽朱忠勇
- 关键词：NADH-细胞色素B5还原酶产物纯化突变型原核表达遗传性高铁血红蛋白血症分子病理机制
- NADH-细胞色素b5还原酶突变型蛋白的结构与功能研究
- 2007年
- 目的探讨NADH-细胞色素b5还原酶基因突变引起遗传性高铁血红蛋白血症的分子病理机制,研究突变型(b5R)蛋白结构和功能的关系。方法用基因重组技术将野生型和突变型(L72P)b5RcDNA克隆于pGEX-2T载体,在大肠杆茵BL21中诱导表达。Western印迹鉴定表达的蛋白为GST-b5R融合蛋白。应用谷胱甘肽-Sepharose4B亲和层析,还原型谷胱甘肽洗脱得到纯化的GST-b5R和GST-b5RL72P融合蛋白,比较GST-b5R和GST-b5RL72P酶活性。结果突变型酶活性低,为野生型的3%。结论L72P突变可引起蛋白质二级结构改变从而导致酶的活性下降。
- 郑德柱兰风华黄粱浒吴玉水谢飞程烽朱忠勇
- 关键词：NADH-细胞色素B5还原酶原核表达GST融合蛋白
- 耐力训练和力竭运动对大鼠红细胞高铁血红蛋白含量和NADH-细胞色素b5{5}的影响
- 血红蛋白（Hemoglobin，Hb）的自身氧化以及血红蛋白与氧自由基（O2-）和过氧化氢（H2O2）的反应都会产生高铁血红蛋白（Methemoglobin，MetHb）。在快速结合氧、运输氧、分离氧的过程中，氧合血红蛋...
- 江晓斌
- NADH-细胞色素b5还原酶在视网膜色素变性rds小鼠中的差异表达被引量：2
- 2001年
- 目的 :寻找遗传性视网膜色素变性动物模型rds小鼠发病时差异表达的基因。方法 :采用差异显示技术比较 2 5drds小鼠和正常对照小鼠的视网膜mRNA。对差异表达的基因片段进行克隆、测序和同源性比较。用基因特异引物RT -PCR观察其在不同日龄两种小鼠中的表达情况。结果 :rds小鼠与同龄正常对照小鼠相比 ,视网膜存在相当明显的基因表达差异。其中一个差异片段克隆的序列与大鼠NADH -细胞色素b5{5} (b5R)的cDNA序列有 91%的同源性 ,可以认为是小鼠b5R的cDNA片段。基因特异引物RT -PCR证实 12d、2 5d和 37drds小鼠视网膜中b5RmRNA水平高于同龄正常对照小鼠。结论 :可能由于某种氧化因素使b5R表达增高 ,大量消耗NADH并生成NAD+ 。
- 邝志和张清炯申煌煊
- 关键词：小鼠NADPH视网膜细胞凋亡视网膜色素变性RDS
- 一种新的多肽——NADH－细胞色素B5还原酶33和编码这种多肽的多核苷酸
- 本发明公开了一种新的多肽──NADH－细胞色素B5还原酶33,编码此多肽的多核苷酸和经DNA重组技术产生这种多肽的方法。本发明还公开了此多肽用于治疗多种疾病的方法,如恶性肿瘤,血液病,HIV感染和免疫性疾病和各类炎症等。...
- 毛裕民谢毅
- NADH-细胞色素b5还原酶基因Arg57Gln/Cys203Tyr复合杂合子鉴定
- 2000年
- 目的 调查中国人遗传性高铁血红蛋白血症 (RCM)患者 NADH-细胞色素 b5还原酶 (b5 R)基因突变情况 .方法 采用逆转录 -聚合酶链反应产物直接测序法 ,分析 RCM患者 b5 R基因的 c DNA全部编码序列 ;PCR结合限制性内切酶Msp I和 Rsa I酶切分析患者及其母亲的 b5 R基因组 DNA扩增片段 .结果 患者的 b5 R基因存在 Arg5 7Gln(CGG→CAG)和 Cys2 0 3Tyr(TGC→ TAC)复合杂合型突变 ;突变的等位基因位于不同染色体上 ,前者来源于母亲 ,后者来源于父亲 .结论 在国内外首次发现 I型 RCM患者的 b5
- 吴玉水王瑶兰风华唐玉钗朱忠勇
- 关键词：RCMNADH细胞色素B5还原酶
