探究NAD激酶固定化条件及固定化酶的相关稳定性。制备磁性壳聚糖微球,戊二醛做交联剂把NAD激酶固定在磁性壳聚糖微球上。对影响固定化酶酶活的因素(温度、交联时间、pH及戊二醛浓度)进行考察,并设计正交试验对固定化条件进行优化。研究固定化酶的操作稳定性及储存稳定性。酶固定化最优条件为固定温度60℃、p H 9.0、戊二醛体积分数3.75%、交联时间6 h,该条件下酶活力回收率为56.16%,验证试验表明该工艺制备稳定;固定化酶在重复使用8次后,固定化酶酶活力回收率剩余55.89%;固定化酶储存10 d后酶活力回收率为93.12%。成功制备了固定化酶,固定化酶稳定性较好。
