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两端包含LoxP位点的表达GFP蛋白的质粒及其构建方法和应用: 本发明公开了两端包含LoxP位点的表达GFP蛋白的质粒及其构建方法和应用，该质粒的构建方法包括：S1：在GFP表达元件两侧设计两个不同类型的同向LoxP位点；S2：将两个不同LoxP位点分别连入正反向引物，以pEGFP‑...; 黄容桂彬李勇明杨诚廖兰杰汪亚平

两端包含LoxP位点的表达GFP蛋白的质粒及其构建方法和应用: 本发明公开了两端包含LoxP位点的表达GFP蛋白的质粒及其构建方法和应用，该质粒的构建方法包括：S1：在GFP表达元件两侧设计两个不同类型的同向LoxP位点；S2：将两个不同LoxP位点分别连入正反向引物，以pEGFP‑...; 黄容桂彬李勇明杨诚廖兰杰汪亚平

位点特异重组酶Cre介导的DNA甲基化抑制loxP重组同时沉默loxP位点间的基因: 虽然转基因作物的种植面积在不断增加,带来了一定的社会和经济效益。但抗抗生素、抗虫及抗除草剂等外源基因潜在的食品和生态安全问题引发了人们的担忧,严重限制了转基因植物进一步商业化推广,导致转基因技术的巨大价值远未被兑现。如何...; 刘若尘; 关键词：基因删除 DNA甲基化基因沉默

利用新型DNDF7和携带LoxP位点的LPL4质粒快速构建S-Sox5基因打靶载体: 2015年; 目的体外实验已证实S-SOX5蛋白转录调节运动纤毛基因Spag6，为进一步探索其在体内的作用，拟构建S-Sox5基因的敲除载体。方法利用新型DNDF-7和携带LoxP位点的LPL4载体，选择S-Sox5基因第1外显子作为条件性敲除目的片段，SV129系Es细胞DNA为模板分步扩增包括S-Sox5第1外显子的中间段（middle piece），上游同源左臂4．8kb（upper arm）及下游同源右臂2．5kb（down arm）的基因片段；构建upper-arm-DNDF7、down-arm-DNDF7和middle-piece-LPL4质粒，将middle-piece-LPL4的酶切产物LoxP—middle—piece．LoxP和down-arm-DNDF7酶切产物相连，形成携带LoxP位点的middle-down-arms-DNDF7重组质粒，该质粒与upper-arm-DNDF7酶切产物相连，获得S-Sox5基因打靶载体。结果经酶切鉴定及测序证实，构建的upper-arm-DNDF7、middle-piece-LPL4、down-arm-DNDF7重组质粒和S-Sox5基因打靶载体结构正确，与设计相符。结论成功构建小鼠S-Sox5条件基因打靶载体，为进一步建立S-Sox5条件敲除小鼠，在体内研究其功能打下基础。; 刘晙玭汪智琼平光伦石玉琴张玲张志兵

Cre/loxP位点特异重组系统在转基因菊花中的应用: 本研究利用Cre/loxP位点特异重组系统构建了植物安全表达载体pBI121-CRE,在该载体中,CRE基因受诱导型启动子rd29A的调控,在逆境胁迫条件下,rd29A启动子能够被激活表达,引起其下游基因CRE的表达。C...; 梁建国菅琳张启翔; 关键词：菊花无选择标记

含单一loxP位点重组伪狂犬病毒的构建: 伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)是双股线状DNA病毒,其基因缺失苗不仅能有效预防伪狂犬病,而且可作为构建其他活载体疫苗的常载体。目前重组PRV的构建普遍采用同源重组或细菌人工染色体克隆技术,操作...; 田瑞鹏; 关键词：伪狂犬病病毒重组病毒 CRE/LOXP系统

Cre/loxP位点特异性重组系统及其在口腔医学领域中的应用被引量：4: 2011年; Cre/loxP位点特异性重组系统由Cre重组酶和loxP位点组成。Cre重组酶可识别loxP位点并催化2个loxP位点之间的DNA进行精确的位点特异性重组。该系统作用方式简单、重组效率高,可定时、定位地对基因进行修饰,已成为一种定向改变生物活体遗传信息的重要的试验工具。本文主要就Cre/loxP系统的结构、重组机制、特点及其在口腔医学领域中的应用作一综述。; 张文娟于丹妮; 关键词：位点特异性重组 CRE/LOXP系统 CRE重组酶

Cre/loxP位点特异性重组系统在植物中应用的研究进展被引量：5: 2010年; Cre/loxP位点特异性重组系统自发现以来,在植物基因重组领域得到了广泛应用,已成为提高转基因植物安全性的有效方法。本文介绍了该系统的基本概况及其在转基因植物表达载体构建方面的应用,尤其是在基因删除、定点整合、多基因表达以及杂种优势利用等方面的应用做了重点阐述。; 孙家利闫晓红王力军魏文辉; 关键词：CRE/LOXP系统位点特异性重组转基因

Cre／loxp位点特异性重组系统在转基因植物中的应用被引量：7: 2008年; 位点特异性重组系统能够在植物遗传转化中更准确、可靠的操纵外源DNA的引入或删除,已成为植物遗传操作中的重要工具。本文简要介绍目前应用最为广泛的Cre/loxp位点特异性重组系统的重组机制,并着重阐述Cre/loxp系统在删除转基因植物中标记基因及定点整合等方面的应用。; 邱淑萍陈在杰王锋; 关键词：位点特异性重组转基因植物基因删除

含LoxP位点和EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失转移载体的构建被引量：7: 2008年; 提取鸭瘟病毒(DPV)疫苗株基因组DNA为PCR扩增模板,并根据GenBank已发表的DPV UL区UL24、UL23、UL22基因序列,选择保守序列设计了两对引物,分别扩增出位于UL23(TK)两侧的可用于同源重组的左臂片段(L)和右臂片段(R),L包括部分UL24、部分TK,R包括部分TK及部分UL22,L和R的拼接片段中TK基因内部缺失468个核苷酸.将L片段和R片段克隆于pBluescript M13-载体上,获得了pSKLR;再将含2个LoxP位点的表达绿色荧光蛋白的基因表达盒插入pSKLR的L片段和R片段之间构成转移载体pSKLR-EGEP-LoxP.大量提取pSKLR-EGEP-LoxP质粒,用脂质体转染鸭胚成纤维细胞,24 h后蛋白被正确表达,表明含LoxP位点的表达EGFP的鸭瘟病毒TK基因缺失的重组转移载体被成功构建.; 潘华奇刘磊曹瑞兵魏凡华袁立科李娟孙海亮潘光炎; 关键词：鸭瘟病毒 EGFP TK基因

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