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- 产L-异亮氨酸谷氨酸棒杆菌的代谢工程构建
- 2025年
- L-异亮氨酸作为必需氨基酸具有重要的生理功能,被广泛应用于食品、医药、农业等领域。针对目前发酵工业中L-异亮氨酸生产菌株谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)存在营养缺陷、发酵周期长等不足,利用代谢工程策略从头构建L-异亮氨酸合成菌株。首先,过表达解除反馈抑制的天冬氨酸激酶、苏氨酸脱水酶以及乙酰乳酸合酶编码基因lysC^(A279T)、ilvA^(G418A/T1147G)和ilvBN^(A139T/T140A)以强化L-异亮氨酸合成通路,所获菌株ILE-3的L-异亮氨酸产量达到3.5 g/L。然后,过表达丙酮酸羧化酶编码基因pyc以增强前体物L-天冬氨酸的供应。在此基础上过表达L-异亮氨酸输出蛋白编码基因brnFE以促进其外排,获得菌株ILE-6。该菌株在5 L发酵罐经发酵48 h后,ILE-6的L-异亮氨酸产量和转化率分别达到21.3 g/L和14.1%。该菌株遗传背景清晰、无营养缺陷、发酵周期短,其所用策略可为分支链氨基酸生产菌株的代谢工程构建提供参考。
- 张佳蓉李彦臻芦楠张成林
- 关键词:L-异亮氨酸L-苏氨酸代谢工程谷氨酸棒杆菌代谢流
- 一种提高L-异亮氨酸发酵生产效率的发酵强化剂和方法
- 本发明属于微生物发酵制备氨基酸技术领域,具体涉及一种提高L‑异亮氨酸发酵生产效率的发酵强化剂和方法。本发明提供了一种提高L‑异亮氨酸发酵生产效率的发酵强化剂,能够促进菌体快速生长繁殖和菌体代谢,提高L‑异亮氨酸产量和发酵...
- 郭传庄王建彬孙瑞成李小双李俊霖梁炜超张保平汪俊卿王婷李丕武马春玲
- λ-Red重组技术结合复合诱变提高大肠杆菌L-异亮氨酸合成能力
- 2025年
- 本研究旨在通过λ-Red重组技术结合复合诱变方法提高大肠杆菌L-异亮氨酸合成能力。以E. coli NXA为出发菌株,首先采用λ-Red同源重组敲除编码支链氨基酸转运蛋白基因brnQ,获得突变菌株E. coli NXA1。然后将E. coli NXA1经常温常压等离子体(ARTP)、紫外(UV)与亚硝基胍(NTG)多轮复合诱变,以α-氨基丁酸(α-AB)为结构类似物进行筛选,筛选得到突变菌株E. coli NXA2。摇瓶发酵结果表明,在37℃、200 r/min条件下发酵40 h后,E. coli NXA1的L-异亮氨酸滴度为2.76 g/L,较E. coli NXA提高了33.98%;E. coli NXA2的L-异亮氨酸滴度为3.22 g/L,较E. coli NXA1提高了16.67%,较E. coli NXA提高了56.31%。对菌株E. coli NXA2经连续传代20代后,表现出较好的遗传稳定性。λ-Red重组技术结合复合诱变对大肠杆菌提高L-异亮氨酸合成能力有明显效果,为选育L-异亮氨酸高产菌株奠定理论基础。
- 汪吉鹏朱滕滕刘璐马铖魏晓博刘慧燕方海田
- 关键词:大肠杆菌复合诱变发酵L-异亮氨酸
- 一种启动子及其相关的生物材料在生产L-异亮氨酸中的应用
- 本发明公开了一种启动子及其相关的生物材料在生产L‑异亮氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明所解决的技术问题是如何提高L‑异亮氨酸的产量。本发明所公开的启动子为SEQ ID No.2或SEQ ID No.1所示的DNA分...
- 孟刚赵春光杨立鹏魏爱英田斌方伟张英张晓琴
- 蛋白质突变体及其生物材料在生产L-异亮氨酸中的应用
- 本发明公开了蛋白质突变体及其生物材料在生产L‑异亮氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明所解决的技术问题是如何提高L‑异亮氨酸的产量。本发明所公开的蛋白质突变体的序列为SEQ ID No.4。将出发生物细胞中SEQ ID...
- 杨立鹏魏爱英孟刚赵春光田斌方伟张英
- NCgl0214蛋白质及其生物材料在生产L-异亮氨酸中的应用
- 本发明公开了NCgl0214蛋白质及其生物材料在生产L‑异亮氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明所解决的技术问题是如何提高L‑异亮氨酸的产量。本发明所公开的蛋白质的序列为SEQ ID No.4或SEQ ID No.2。...
- 孟刚魏爱英杨立鹏田斌方伟张英
- NCgl0762蛋白质及其突变体在生产L-异亮氨酸中的应用
- 本发明公开了NCgl0762蛋白质及其突变体在生产L‑异亮氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明所解决的技术问题是如何提高L‑异亮氨酸的产量。本发明所公开的蛋白质的序列为SEQ ID No.4或SEQ ID No.2。将...
- 赵春光杨立鹏魏爱英孟刚田斌方伟张英张晓琴
- 一种发酵生产L-亮氨酸和L-异亮氨酸的方法
- 本说明书实施例提供了一种L‑亮氨酸和L‑异亮氨酸的发酵方法:该方法使用至少一种L‑亮氨酸或者L‑异亮氨酸的生产菌进行发酵培养;该方法在物料上选择了相对廉价的糖蜜,其具有丰富的碳氮源,摒弃了杂质较多的玉米浆,并且通过酶解将...
- 范超刘军洪皓齐佳琨陈剑彬吴文忠
- NCgl0216编码的蛋白质突变体及其生物材料在生产L-异亮氨酸中的应用
- 本发明公开了NCgl0216编码的蛋白质突变体及其生物材料在生产L‑异亮氨酸中的应用,属于生物技术领域。本发明所解决的技术问题是如何提高L‑异亮氨酸的产量。本发明所公开的蛋白质的序列为SEQ ID No.4或SEQ ID...
- 魏爱英孟刚赵春光杨立鹏田斌方伟张英
- 一种利用嗜盐菌生产L-亮氨酸和L-异亮氨酸的方法
- 本发明涉及一种重组盐单胞菌,其包含外源引入的ilvC(乙酰羟酸异构还原酶,AHAIR)基因和ilvD(二羟酸脱水酶,DHAD)基因以及可选的ilvE(转氨酶,TA)基因。本发明的重组盐单胞菌能够实现无需灭菌、节能节水、开...
- 杨芳徐绚明王竞辉张瑶瑶杜开心高紫君刘威吴榉
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- 陈宁

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- 研究主题:发酵 谷氨酸棒杆菌 黄色短杆菌 大肠杆菌 发酵条件
- 徐庆阳

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- 谢希贤

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- 供职机构:天津科技大学
- 研究主题:基因工程菌 发酵 大肠杆菌 谷氨酸棒杆菌 发酵液
- 张成林

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- 供职机构:天津科技大学
- 研究主题:基因工程菌 谷氨酸棒杆菌 异亮氨酸 代谢工程 发酵液
- 张克旭

- 作品数:138被引量:559H指数:13
- 供职机构:天津科技大学生物工程学院
- 研究主题:发酵条件 发酵 选育 育种 谷氨酸