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舌下腺黏液性腺泡细胞特异性Cre重组酶基因敲入小鼠的建立和鉴定: 2024年; 目的建立和鉴定整合素β样蛋白1基因(Itgbl1)启动子指导下的Cre重组酶基因敲入小鼠。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研制Itgbl1-Cre基因敲入小鼠。利用Itgbl1-Cre基因敲入小鼠与Cre的报道小鼠ROSA;LSL-tdTomato;交配的子代小鼠进行遗传细胞谱系示踪。通过红色荧光蛋白tdTomato鉴定Itgbl1阳性细胞及其子代细胞的组织表达谱。通过多色免疫荧光染色利用多种细胞特异性的标志物鉴定阳性细胞及其子代细胞的细胞类型。结果与结论tdTomato蛋白在舌下腺的黏液性腺泡细胞、胰岛细胞和胃的分泌细胞中特异性表达。此外,tdTomato在部分视网膜和脑的神经元细胞以及少量肠的浆膜层、骨关节软骨、骨膜和骨髓的细胞中表达。成功建立了首个在小鼠舌下腺的黏液性腺泡细胞中特异性表达Cre重组酶的转基因小鼠品系。; 彭艳丽粟柯糙郎依铭谢中良李明月周学涛王庆业汪海珍杨晓杨冠滕艳; 关键词：CRE重组酶

IL-11-Cre重组酶小鼠的建立与鉴定: 白细胞介素-11（IL-11）是一种炎症细胞因子,有独特的生物学功能。越来越多的研究发现IL-11在炎症和纤维化等病理过程中具有重要作用,被认为是肿瘤与病理性纤维化疾病的潜力药物开发靶点。来自多种遗传修饰小鼠模型的证据证...; 谢中良; 关键词：IL-11

一种Cre重组酶调控系统及其应用: 本发明公开了一种Cre重组酶调控系统及其应用，所述Cre重组酶调控系统包括ER50基因。本发明方案，通过引入4OHT诱导降解蛋白ER50构建得到Cre重组酶调控系统，本发明方案构建得到的Cre重组酶调控系统中，4OHT通...; 彭晓华邹庆剑陈敏吴运琴汪金玲池玉娥周小青唐成程孔雯婷林佩雯

一种基于Cre重组酶的人腺病毒HAd5C改造方法: 本发明提供了一种基于Cre重组酶的人腺病毒HAd5C改造方法，属于生物医药技术领域。本发明利用载体pBHGlox(delta)E13Cre，该载体敲除了腺病毒复制关键基因E1和E3，其余骨架基因完整，因此可以用于HAd5...; 刘奇王健田烁黄文林

骨骼及其他组织中Sstr2+细胞的鉴定及Cre重组酶小鼠的研制: 生长抑素（somatostatin，SST）信号通路通过抑制生长因子的分泌参与调节神经发育、激素分泌、细胞增殖等多种细胞生物学行为。生长抑素Ⅱ型受体（somatostatin receptor 2，SSTR2）是生长抑素...; 刘川; 关键词：骨质疏松症发病机制重组酶

基于Cre重组酶诱导的大规模慢病毒基因药物制备系统及方法: 本发明涉及一种基于Cre重组酶诱导的大规模慢病毒基因药物制备系统，其包括：悬浮293稳转细胞株和表达Cre基因的病毒；所述悬浮293稳转细胞株的基因组上整合了慢病毒包装蛋白表达序列和目的基因序列；且所述慢病毒包装蛋白表达...; 董文吉赵忠亮陈志川董祖伊刘子瑾程谟斌张艳君

利用Loxp/Cre重组酶体系构建脂肪组织GGPPS特异性缺失的小鼠模型被引量：1: 2020年; 香叶草基合成酶(Geranylgeranyl bisphosphate synthase,GGPPS)与囊泡运输过程中小G蛋白的翻译后修饰密切相关。文章选择同时具有2个Loxp位点基因和GGPPS基因的Ggpps-floxed小鼠与带有脂肪组织特异性启动子aP2的Cre小鼠aP2-Cre进行杂交,以获得脂肪组织GGPPS特异性缺失的小鼠Ad Ggpps KO。经过基因鉴定和多组织的定量聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)以及Western blot确认,得到的小鼠模型的脂肪组织GGPPS缺失。; 薛晓萌刘健; 关键词：脂肪组织小鼠

肾上腺皮质束状带特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的构建: 2020年; 肾上腺是人体重要的内分泌器官。由于缺乏肾上腺皮质束状带特异性表达Cre酶的工具鼠,目前对肾上腺皮质束状带细胞中特异表达基因的功能缺乏深入的解析。CYP11B1基因编码类固醇11β-羟化酶,该酶是糖皮质激素合成的关键酶,在肾上腺皮质束状带中特异性表达。本研究旨在利用CYP11B1基因在束状带特异性表达的特点,构建在肾上腺皮质束状带中特异性表达Cre重组酶的转基因动物。采用CRISPR/Cas9技术在CYP11B1基因终止密码子位点定点敲入2A-GfpCre表达框,获得CYP11B1-2A-GfpCre同源重组载体,进而构建CYP11B1Cre小鼠,并通过mTmG和LacZ染色确定Cre酶主要表达在小鼠肾上腺皮质束状带。在此基础上,本研究还用该工具鼠与胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionineγ-lyase, CTH)条件性敲除鼠交配,获得了肾上腺皮质束状带CTH特异性敲除的小鼠,并证实了该动物肾上腺皮质束状带中CTH表达缺失。以上结果充分说明肾上腺皮质束状带特异性表达Cre重组酶小鼠构建成功。该工具鼠的成功构建,为深入研究肾上腺皮质束状带相关功能提供了有力工具。; 张宁宁王长楠倪鑫; 关键词：肾上腺皮质细胞 CRE重组酶转基因小鼠

Kap147/Kpn杂合启动子引导Cre重组酶在转基因小鼠睾丸组织中特异性表达: 2019年; 为了验证杂合启动子Kap147/Kpn的体内、外功能,构建了Kap147/Kpn引导的Cre重组酶转基因鼠。体外细胞转染和激素诱导证实Kap147/Kpn启动子具有细胞特异性,且受雄激素诱导。通过RT-PCR(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction)和荧光定量PCR(Polymerase Chain Reaction)证实Kap147/Kpn启动子引导Cre重组酶在转基因鼠(Cre-F0-2)睾丸组织中特异表达。荧光定量PCR检测发现,Cre mRNA在转基因鼠睾丸中的表达量与小鼠年龄相关,经15 mg/(kg·d)二氢睾酮(DHT)处理后睾丸中Cre mRNA表达量增加1.7倍,经100 mg/(kg·d)醋酸环丙孕酮(CAP)处理后Cre mRNA表达量降低约50%,证实Kap147/Kpn启动子在转基因鼠体内受雄激素调控。荧光组化显示,转基因鼠Cre-F0-2与双荧光Cre重组酶报告鼠杂交后,能成功介导子代鼠睾丸组织特异性的基因敲除。杂合启动子Kap147/Kpn引导的Cre重组酶转基因鼠(Cre-F0-2)具有雄激素调节性和睾丸靶向性,是一个潜在的研究睾丸基因功能的有力工具。; 刘飞孟军范立强; 关键词：基因打靶睾丸

基于同源重组技术的表达CRE重组酶的减毒沙门菌的构建及功能初步研究: 2018年; 为了构建表达Cre重组酶的减毒沙门菌,本试验首先将Cre重组酶表达框插入到自杀质粒pYA3599中,构建重组自杀质粒pYA3599-Cre,电转至感受态χ7232中,经酶切鉴定与测序后,电转至χ7213感受态中,得到含有自杀质粒pYA3599-Cre的重组菌χ7213。随后通过同源重组,经两步筛选,将Cre重组酶表达框整合至减毒沙门菌χ11802的基因组中,得到重组减毒沙门菌χ11802-Cre,通过Western-boltting技术检测重组酶Cre的表达,进而将报告质粒pYA4545-lox P电转至重组菌中验证Cre重组酶的功能。结果显示,成功构建了自杀质粒pYA3599-Cre,并基于同源重组技术成功将重组酶Cre表达框整合至χ11802基因组中,通过Western-blotting成功检测出重组酶Cre的表达,且报告质粒电转至重组菌中可被切除lox P位点之间序列。本试验成功构建出能表达重组酶Cre的减毒沙门菌,为后期以位点特异性重组酶Cre为基础的减毒沙门菌微环DNA疫苗的构建奠定了基础。; 高兴刘晶张赞刘洋许可杨桂连姜延龙王春凤; 关键词：CRE 同源重组减毒沙门菌

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