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猫CD 3 单克隆抗体 的筛选与鉴定 被引量:1 2023年 为研究猫CD 3 的生物学功能、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法,通过克隆 构建含猫CD 3 胞外区基因的重组质粒,将ExpiCHO-S细胞和Expi293 细胞表达的猫CD 3 蛋白分别作为免疫原和筛选抗原,利用杂交瘤技术制备抗猫CD 3 单克隆抗体 (m Ab),对其抗体 亚型和杂交瘤细胞株稳定性进行鉴定和分析,IFA、Western-blot、免疫组化(IHC)和流式细胞术(FCM)分析其生物学特性。结果显示,成功制备了2株可持续稳定分泌抗猫CD 3 m Ab杂交瘤细胞株,命名为2C9和3 E1;亚型鉴定结果显示均为Ig G1型,轻链类型均为κappa型。IFA和Western-blot结果显示,2株抗猫CD 3 m Ab均可与体外表达的猫CD 3 蛋白发生特异性结合。IHC和FCM结果显示只有2C9 m Ab可特异性识别猫脾、肠道淋巴组织及猫外周血单 核淋巴细胞(PBMCs)中的T淋巴细胞。结果表明,本研究制备的猫CD 3 m Ab为后续猫CD 3 分子的功能研究、猫淋巴瘤和自身免疫性疾病的诊断及治疗方法的建立奠定了基础。 贺帅杰 王小娟 穆永 丁航天 霍宁宁 曹玉姣 谭菲菲 田克恭关键词:CD3 T细胞 单克隆抗体 CD 3 单克隆抗体 诱导人源化细胞因子风暴小鼠模型2023年 目的构建CD 3 单克隆抗体 诱导人源化细胞因子风暴小鼠模型。方法提取健康成人的外周血单 核细胞(PBMCs),静脉注射10~12周龄NSG小鼠后,随机分为2组:(1)PBMCs组(2)OKT3 (CD 3 单 抗,anti-CD 3 mAb,0.1 mg/mL)+PBMCs。实验组6 d后注射CD 3 抗体 0.5 mg/kg,6 h后ELISA检测血清IL-10、CTLA-4、INF-γ、IL-6、IL-2、IL-7和TGF-β水平。结果相比对照组,使用OKT3 能有效诱导出细胞因子风暴,其中IL-2(P<0.001)、INF-γ(P<0.001)、TGF-β(P<0.001)、IL-6(P<0.001)、IL-7(P<0.001)和CTLA-4(P<0.001)。结论成功构建细胞因子风暴NSG小鼠模型。 刘潺潺 姚袁媛 王钟情 张立波 李婷关键词:INF-Γ CTLA-4 IL-7 调节性T细胞能有效降低抗CD 3 单克隆抗体 OKT3 引起的人外周血单 个核细胞细胞因子的释放 被引量:2 2023年 目的探索细胞因子风暴因子体外模型的构建方法及调节性T细胞(Treg)的调节作用。方法培养健康成人外周血单 核细胞(PBMC),随机分为PBMC组、对照组(PBS处理)、CD 3 单克隆抗体 OKT3 处理组、OKT3 联合Treg处理组。处理48 h后,收集上清液,采用ELISA检测血清转化生长因子β(TGF⁃β)、细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA4)、γ干扰素(IFN⁃γ)、白细胞介素10(IL⁃10)、IL⁃2、IL⁃7和IL⁃6水平。结果与对照组相比,OKT3 能明显增加PBMC的TGF⁃β、CTLA4、IL⁃10、IL⁃2、IL⁃7、IFN⁃γ和IL⁃6水平。Treg能有效减少OKT3 引起的上述细胞因子释放。结论成功构建了细胞因子风暴细胞模型,Treg能降低PBMC的细胞因子释放。 刘潺潺 李婷 王钟情 张立波 吴本清关键词:细胞因子 CD 3 E蛋白真核表达及全人源CD 3 单克隆抗体 的制备被引量:1 2020年 目的:高效真核表达和纯化获得CD 3 E蛋白,制备全人源CD 3 抗体 。方法:构建CD 3 E链胞外区真核表达质粒,利用293 F悬浮细胞表达系统表达并纯化获得高纯度蛋白。选取人源化抗体 转基因小鼠CAMouse-HG76进行免疫,通过细胞融合的方法获得杂交瘤细胞,再利用ELISA法和流式细胞分析法筛选CD 3 特异性单克隆抗体 。结果:成功构建重组表达载体pcDNA3 .4-CD 3 E-mFc,真核细胞表达并纯化获得纯度为85%的融合蛋白。免疫小鼠后效价高达1∶102400。杂交瘤细胞筛选获得3 株CD 3 特异性单克隆抗体 。结论:本研究成功获得了CD 3 E融合蛋白和CD 3 单克隆抗体 ,为后续建立ELISA检测方法、全人源治疗性抗体 药物及相关研究提供基础。 杨希 郎巧利 黄楠 余琳 吴梦 葛良鹏关键词:真核表达 单克隆抗体 抗CD 3 单克隆抗体 对食蟹猴免疫功能及相关基因表达的影响 被引量:1 2016年 目的使用传统免疫毒性评价手段以及T细胞依赖性抗体 反应(TDAR)检测、基因芯片等技术,从免疫器官、免疫细胞、免疫分子及基因水平上考察抗CD 3 单克隆抗体 (Ant-CD 3 Mc Ab)对食蟹猴免疫功能的影响,探索和验证抗CD 3 单克隆抗体 的作用机制。方法使用18只食蟹猴,每天1次,连续7 d,分别给予生理盐水、0.5和2.5 mg·kg^(-1)抗CD 3 单克隆抗体 ,期间进行临床症状观察、体重测定、血液学检查、抗体 检测、T细胞依赖性抗体 反应检测、淋巴细胞亚群分析、骨髓细胞计数、组织病理学检查和全血基因表达谱分析。结果抗CD 3 单克隆抗体 能明显抑制食蟹猴对外来抗原的免疫应答水平,引起外周血白细胞计数和CD 3 ^+细胞数量不同程度减少,胸腺皮质淋巴细胞数目减少。基因芯片检测发现,抗CD 3 单克隆抗体 引起的主要差异表达基因的基因功能涉及细胞增殖、免疫反应、细胞因子分泌、凋亡等几个方面。结论抗CD 3 单克隆抗体 能够引起食蟹猴出现明显的免疫抑制反应,检测全血基因表达谱的变化在评价免疫毒性方面切实可行。诱导T细胞凋亡和抑制T淋巴细胞增殖可能是抗CD 3 单克隆抗体 引起T淋巴细胞数目减少的主要原因,IL-8可能在抗CD 3 单克隆抗体 的作用机制中具有非常重要的作用。 耿兴超 周洋 林志 苗玉发 张琳 汪巨峰 李波 王军志关键词:抗CD3单克隆抗体 食蟹猴 免疫抑制 外周血 基因表达谱 半量抗CD 3 单克隆抗体 在预防肾移植术后急性排斥反应中的作用 目的:探讨半量抗CD 3 单克隆抗体 在预防肾移植术后急性排斥反应中作用。方法:选取54例肾移植患者,术后均采取三联免疫抑制方案,随机分为观察组(3 6)与对照组(18),对照组采取环孢素A、硫唑嘌呤、皮质激素三联治疗方案,观察... 潘振宏 张彦选 房军 梁绍峰 曲青山 苗书斋关键词:抗CD3 单克隆抗体 半量抗CD 3 单克隆抗体 在预防肾移植术后急性排斥反应中的作用 目的:探讨半量抗CD 3 单克隆抗体 在预防肾移植术后急性排斥反应中作用。方法:选取54例肾移植患者,术后均采取三联免疫抑制方案,随机分为观察组(3 6)与对照组(18),对照组采取环孢素A、硫唑嘌呤、皮质激素三联治疗方案,观察... 潘振宏 张彦选 房军 梁绍峰 曲青山 苗书斋关键词:抗CD3 单克隆抗体 Thymoglobulin与CD 3 单克隆抗体 在细胞因子诱导的杀伤细胞制备中的作用比较 被引量:1 2014年 目的研究人胸腺球蛋白(TG)在临床治疗级培养体系中,对细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖、免疫细胞表型和细胞毒作用的影响。方法分离11例健康正常人外周血单 个核细胞(PBMC),γ干扰素预处理;1 d后,TG或CD 3 mAb刺激;随后,每3 d补充IL-2等添加物,培养至21 d。台盼蓝拒染法计数细胞总数和活力;流式细胞术分析CD 3 、CD 4、CD 8、CD 16/CD 56和NK细胞活化/抑制受体表达情况以及CD 25+Foxp3 +调节T细胞(Treg)的变化;乳酸脱氢酶释放法检测细胞毒活性。结果 TG和CD 3 mAb均能刺激CIK细胞生长,但CD 3 mAb作用弱于TG。培养7 d,2组CIK细胞中,CD 3 +CD 16+CD 56+细胞、CD 3 -CD 16+CD 56+细胞及NK细胞活化/抑制受体表达均出现一过性减少;培养14 d,开始恢复,并持续增加至21 d;在7 d、14 d和21 d等3 个检测点,CD 3 mAb组的三者均低于TG组(P<0.05),而且,细胞毒活性也低于TG组。值得注意的是,培养7 d,Treg一过性增加,且TG组明显高于CD 3 mAb组(P<0.05);另外,在整个培养期间,2组CIK细胞中,CD 3 +CD 4+细胞持续减少,而CD 3 +CD 8+细胞在7 d,即迅速增加,并维持该水平至21 d,这种改变在2组间无差异。结论 TG能选择性地促进CIK细胞中主要效应细胞增殖、分化和成熟,提高其细胞毒活性,因此,其具有替代CD 3 mAb用于制备临床级CIK细胞制品的可行性;CD 3 mAb和TG培养体系均可一过性地扩增负相调控细胞Treg,剔除或减少Treg可能有助于提高主要效应细胞产率。 陈伟 蔺迪 姜志明 杨紫恩 宋爽 周季安 周丽 孙英慧 于卉影 马东初关键词:免疫治疗 抗CD 3 单克隆抗体 对食蟹猴外周血免疫毒性相关基因表达的影响 目的 采用传统免疫毒性评价手段以及TDAR检测、基因芯片等新技术方法,同时从免疫器官、免疫细胞、免疫分子及基因水平对动物免疫系统的毒性反应进行评价,全面考察机体整体免疫机能的变化,以期找到检测免疫毒性的敏感指标,希望能从... 耿兴超 周洋 林志 苗玉发 张琳 汪巨峰 李波关键词:外周血 食蟹猴 抗CD 3 单克隆抗体 预处理清除CCR7+DC预防GVHD研究 研究背景和目的:
异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)是目前治疗血液系统恶性疾病的有效手段之一。移植后约50-70%受者会发生移植物抗宿主病(GVHD),其中近半数患者因GVHD及GVHD相关并发症而致死,成... 刘灿关键词:抗CD3单克隆抗体 移植物抗宿主病 肠系膜淋巴结 发病机理
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金健行 作品数:8 被引量:28 H指数:2 供职机构:中国人民解放军第八五医院 研究主题:CD3单克隆抗体 介入化疗 肿瘤 中晚期肿瘤 癌肿 虞喜豪 作品数:29 被引量:96 H指数:5 供职机构:中国人民解放军第八五医院 研究主题:晚期 治肺 立体放疗 肝肿瘤 原发性肝癌 张正国 作品数:9 被引量:55 H指数:3 供职机构:中国人民解放军第八五医院 研究主题:CD3单克隆抗体 肝脾动脉双栓塞 栓塞疗法 介入化疗 中晚期肿瘤 饶灵宁 作品数:7 被引量:34 H指数:3 供职机构:解放军第85医院 研究主题:CD3单克隆抗体 TNF NK细胞 单克隆抗体 免疫治疗 程永德 作品数:226 被引量:1,435 H指数:20 供职机构:《介入放射学杂志》编辑部 研究主题:经皮椎体成形术 介入治疗 经皮椎体成形术治疗 介入放射学 介入