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一种提高龙眼胚性愈伤组织生物活性物质含量的方法: 本发明公开了褪黑素在提高龙眼胚性愈伤组织生物活性物质相对提取效率中的应用，涉及植物体胚培养领域。本发明通过在常规龙眼胚性愈伤组织培养基中添加特定浓度的褪黑素，在促进胚性愈伤组织增殖的同时，促进其类黄酮、类胡萝卜素和总酚积...; 肖学宸林玉玲刘梦雨薛晓东张雪莹赖春旺陈燕赖钟雄

利用外源槲皮素或牡荆素提高龙眼胚性愈伤组织类黄酮产量的方法: 本发明提供了一种利用外源槲皮素或牡荆素提高龙眼胚性愈伤组织类黄酮产量的方法，属于植物组织培养领域。由精胺和D‑精氨酸处理下龙眼胚性愈伤组织的广泛靶向代谢组数据筛选出的关键代谢物槲皮素和牡荆素。在龙眼胚性愈伤组织继代培养基...; 赖春旺林玉玲周小娟张雪莹赖钟雄徐涵陈裕坤张梓浩

利用外源多胺提高龙眼胚性愈伤组织生长量和类黄酮含量的方法: 本发明提供了一种利用外源多胺提高龙眼胚性愈伤组织生长量和类黄酮含量的方法，在龙眼胚性愈伤组织继代培养基中添加不同浓度的多胺（腐胺、亚精胺和精胺）和多胺合成抑制剂D‑精氨酸，并对不同处理时间下龙眼胚性愈伤组织的生长量与类黄...; 赖春旺林玉玲张雪莹赖钟雄陈裕坤张梓浩周小娟

褪黑素在提高龙眼胚性愈伤组织类黄酮、类胡萝卜素和总酚相对提取效率中的应用: 本发明公开了褪黑素在提高龙眼胚性愈伤组织生物活性物质相对提取效率中的应用，涉及植物体胚培养领域。本发明通过在常规龙眼胚性愈伤组织培养基中添加特定浓度的褪黑素，在促进胚性愈伤组织增殖的同时，促进其类黄酮、类胡萝卜素和总酚积...; 肖学宸林玉玲刘梦雨薛晓东张雪莹赖春旺陈燕赖钟雄

利用外源多胺提高龙眼胚性愈伤组织生长量和类黄酮含量的方法: 本发明提供了一种利用外源多胺提高龙眼胚性愈伤组织生长量和类黄酮含量的方法，在龙眼胚性愈伤组织继代培养基中添加不同浓度的多胺（腐胺、亚精胺和精胺）和多胺合成抑制剂D‑精氨酸，并对不同处理时间下龙眼胚性愈伤组织的生长量与类黄...; 赖春旺林玉玲张雪莹赖钟雄陈裕坤张梓浩周小娟

褪黑素在龙眼胚性愈伤组织增殖分化和合子胚生长中的应用研究: 褪黑素(N-乙酰基-5-甲氧基色胺,melatonin,MT)是一种吲哚胺类激素,其在植物中作为多功能分子保护植物的正常生长发育。目前,利用外源MT处理园艺植物以影响其生长发育和代谢过程的研究对生产具有实际参考意义。龙眼...; 肖学宸; 关键词：龙眼褪黑素体细胞胚胎发生次生代谢物

龙眼胚性愈伤组织RNA结合蛋白LSm14的基因克隆、亚细胞定位及表达分析被引量：1: 2020年; 【目的】探究LSm14对龙眼体胚发生的影响,克隆RNA结合蛋白DlLSm14e基因并观察其亚细胞定位,分析其表达特性。【方法】以龙眼胚性愈伤组织为材料,依据转录组数据和基因组数据,采用RT-PCR克隆了一个DlLSm14基因,将其命名为DlLSm14e。对该基因进行生物信息学分析、亚细胞定位观察、龙眼非胚性愈伤组织和不同胚性培养物以及不同激素处理下的FPKM值分析和不同浓度细胞分裂素(KT)处理下的qRT-PCR检测。【结果】该基因CDS全长1707 bp,编码568个氨基酸,该蛋白不含信号肽和跨膜结构,不属于分泌蛋白和跨膜蛋白;此外,该蛋白含有N端保守结构域以及延长的C端,并且含有74个磷酸化修饰位点;系统发育分析表明,DlLSm14e蛋白与漾濞槭(Acer yangbiense)相似度较高,与单子叶植物亲缘关系最远;顺式作用元件分析表明,该基因含有大量光响应元件和多种激素响应元件;亚细胞定位结果表明,该基因为核定位基因;表达谱与实时荧光定量分析显示,DlLSm14e的FPKM值在非胚性愈伤组织(NEC)阶段最低,在球形胚阶段达到最高,推测DlLSm14e大量累积可能有利于龙眼体胚早期形态建成;不同激素处理下,2,4-D抑制该基因表达,KT促进其表达,而KT的浓度能影响该基因的表达。【结论】龙眼LSm14e基因定位于细胞核,该基因FPKM值随龙眼体胚胚性增加而升高,并且响应多种与龙眼体胚发生相关的激素,推测该基因可能参与龙眼体胚早期的形态建成。; 厉雪苏立遥陈燕张舒婷徐小萍陈晓慧陈荣珠赖钟雄林玉玲; 关键词：龙眼克隆亚细胞定位

龙眼胚性愈伤组织AGO10基因克隆及其表达分析被引量：3: 2019年; 【目的】探究龙眼胚性愈伤组织Argonaute10(AGO10)基因的特性与龙眼生长发育、激素响应及非生物胁迫响应之间的关系。【方法】根据龙眼胚性愈伤组织转录组数据库Unigene序列,采用RT-PCR结合RACE技术,以‘红核子’龙眼胚性愈伤组织cDNA为模板,进行龙眼胚性愈伤组织DlAGO10基因的克隆和生物信息学分析,同时利用qRTPCR技术分析DlAGO10基因在龙眼体胚发生过程中、不同组织部位中、对不同激素的响应以及非生物胁迫响应的表达情况。【结果】获得龙眼DlAGO10基因的c DNA全长序列(GeneBank登录号为MH708535),全长共3 859 bp,其中包含完整开放阅读框(ORF)3 003 bp,编码999个氨基酸。生物信息学分析表明,DlAGO10的保守结构域具有AGO的经典结构域PiWi结构,与甜橙和克莱门柚AGO10蛋白同源性较高。qPCR分析结果表明,在龙眼体胚发生过程中,DlAGO10在龙眼非胚性愈伤组织时期和子叶胚时期的表达量较高,在‘红核子’龙眼合子胚S5阶段的相对表达量最高;不同组织部位的表达情况为,DlAGO10在‘红核子’龙眼雌花中表达量最高,雄花次之,其他组织部位表达量均较低。植物激素和非生物胁迫处理下的表达分析表明,一定浓度的2,4-D、KT和水杨酸(SA)均可诱导DlAGO10上调表达,而茉莉酸甲酯(MeJA)即可上调也可下调;盐、渗透、干旱和脱落酸(ABA)胁迫均可上调DlAGO10的表达。【结论】DlAGO10可能参与龙眼体胚发生早期和晚期的转录调控过程,且可能参与生长素、细胞分裂素、SA和ABA的逆境胁迫信号转导途径,调控龙眼多种非生物胁迫应答过程。; 陈荣珠陈荣珠陈晓慧陈晓慧徐小萍林玉玲; 关键词：龙眼体胚发生

光周期对龙眼胚性愈伤组织类黄酮类胡萝卜素含量及合成相关基因的表达影响被引量：1: 2019年; [目的]研究不同光周期对龙眼胚性愈伤组织中类黄酮和类胡萝卜素积累、细胞酶活性的影响,以及对类黄酮和类胡萝卜素合成相关基因表达的影响。[方法]以龙眼松散型胚性愈伤组织为材料,研究全光照24 h/0 h L/D、长光照18 h/6 h L/D、半光照12 h/12 h L/D、短光照6 h/18 h L/D、全黑暗0 h/24 h L/D 5种光周期处理下龙眼胚性愈伤组织中类黄酮和类胡萝卜素积累、细胞保护酶的变化,以及类黄酮和类胡萝卜素合成相关基因的表达。[结果]短光照处理下龙眼胚性愈伤组织中类黄酮的含量和产量最高;全光照处理下龙眼胚性愈伤组织中类胡萝卜素含量和产量最高;不同光周期处理下SOD、POD和H2O2的表达趋势基本一致;PRO含量仅全光照时比CK黑暗时期含量高;PAL含量在短光照时最高,与类黄酮短光照时积累量最高的结果一致;光周期处理下类黄酮合成基因CHI和CHS为"M"字表达模式;DFR和F3H为倒"V"字表达模式;类胡萝卜素合成所用的4个基因表达模式各不相同。[结论]该研究表明光周期对龙眼胚性愈伤组织中类黄酮和类胡萝卜素的积累以及其合成相关基因的表达均有调控作用。; 朱宁焦楠张舒婷李晓斐赖钟雄; 关键词：龙眼胚性愈伤组织光周期类黄酮类胡萝卜素基因表达

龙眼胚性愈伤组织DlCK2-α基因克隆、亚细胞定位及其表达特性分析: 2019年; 【目的】克隆龙眼DlCK2-α基因,并对其表达特性进行分析。【方法】该试验通过RACE技术对DlCK2-α进行克隆,并在此基础上进行生物信息学分析和亚细胞定位以及蛋白质结构和功能的预测。对调控DlCK2-α的miRNA及顺式作用元件进行预测,并进行亚细胞定位观察。采用QRT-PCR技术对其在龙眼体胚不同阶段胚性培养物和不同光质的表达特性进行研究。【结果】DlCK2-α基因含有开放阅读框1002 bp,共编码333个氨基酸(GenBank登录号:MG181952);DlCK2-α属亲水性蛋白,不含有信号肽和跨膜结构域,但是含有一个典型的STKc_CK2_alpha保守结构域,预测含有32个磷酸化位点;miRNA预测结果显示,共有miR2615a等10条miRNA可能调控DlCK2-α;顺式作用元件预测显示多个光响应与应激响应元件可能调控DlCK2-α;GFP荧光定位观察显示其定位于细胞质。QRT-PCR结果显示,DlCK2-α在黑暗条件下的表达量高于光处理下的表达量。在体胚不同发育阶段,DlCK2-α在不完全胚性紧实结构中的表达量最低,球形胚中表达量最高,整体呈先降后升趋势。【结论】DlCK2-α基因在龙眼光信号转导和体胚发育调控中发挥重要作用。; 李珊珊徐小萍陈旭陈晓慧李汉生林玉玲赖钟雄; 关键词：龙眼酪蛋白激酶亚细胞定位 QRT-PCR

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