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温度对鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1的影响: 2024年; 本文通过在不同温度条件下进行鸡胚成纤维细胞UMNSAH/DF-1细胞培养实验,同时模拟活细胞株常温运输环境寻找改善UMNSAH/DF-1细胞生长状态及胞体“空泡化”现象的方法。实验结果表明:相较于37℃,39℃的培养温度更有利于UMNSAH/DF-1细胞生长。室温运输时UMNSAH/DF-1细胞“空泡化”程度显著。但是正常传代后,其胞体“空泡化”现象又会显著减少。本文提示:若UMNSAH/DF-1细胞胞体“空泡”数量较多时,可通过优化该细胞最佳生长温度同时增加传代次数进行改善,一般多次传代后UMNSAH/DF-1细胞就会恢复至其正常状态。; 张雨晴夏晴喻峰吴军; 关键词：温度鸡胚成纤维细胞空泡化

Pcgf2促进鸡胚成纤维细胞重编程形成诱导多能干细胞: 2024年; 【目的】以提高诱导鸡多能干细胞的干性为目的,利用Pcgf2基因与传统诱导多能干细胞的重编程因子共同诱导鸡多能干细胞。【方法】以鸡早期胚胎为模板,对Oct4、Sox2、Nanog、Lin28、C-myc、Klf4这6种传统的重编程因子及Pcgf2进行基因扩增,并与慢病毒载体重组为慢病毒质粒,在包装慢病毒并测定相对应的病毒滴度后,分组感染鸡胚成纤维细胞,在诱导的过程中对干细胞标记物进行检测。【结果】利用传统的重编程因子组合与加入Pcgf2共同诱导后的细胞都较早地表达出磷酸酶活性。加入Pcgf2诱导多能干细胞可以使细胞更早地出现类干细胞形态,且内源性基因Oct4、Sox2、Nanog和Lin28的表达得到更稳定的提高。【结论】Pcgf2在加入诱导体系后可以有效提高细胞的重编程接近干细胞状态。该研究可为选择重编程因子诱导鸡细胞完全重编程及其机制研究提供理论参考。; 姚梓淇廖立钦宋佳蓓张新珩谢青梅; 关键词：慢病毒鸡胚成纤维细胞体细胞重编程诱导多能干细胞

一种诱导鸡胚成纤维细胞为鸡多能干细胞的化学诱导剂及诱导方法: 本发明公开了一种诱导鸡胚成纤维细胞为鸡多能干细胞的化学诱导剂及诱导方法。属于多能干细胞制备技术领域。该化学诱导剂包括XAV‑939、Y‑27632、Resveratrol、SF1670、CHIR‑99021、Mentho...; 邹娴罗成龙吕晓慧舒鼎铭刘子敬何燕华计坚陈鹏

一种诱导鸡胚成纤维细胞为鸡多能干细胞的化学诱导剂及诱导方法: 本发明公开了一种诱导鸡胚成纤维细胞为鸡多能干细胞的化学诱导剂及诱导方法。属于多能干细胞制备技术领域。该化学诱导剂包括XAV‑939、Y‑27632、Resveratrol、SF1670、CHIR‑99021、Mentho...; 邹娴罗成龙吕晓慧舒鼎铭刘子敬何燕华计坚陈鹏

用于鸡胚成纤维细胞高密度培养的补料培养基及高密度培养鸡胚成纤维细胞的方法: 本发明涉及用于鸡胚成纤维细胞高密度培养的补料培养基及高密度培养鸡胚成纤维细胞的方法。所述补料培养基包括多种氨基酸、葡萄糖、无机盐等组分。所述方法包括在含有源培CEF无血清培养基H5E0KJ和微载体的生物反应器中批式培养鸡...; 李智力孙奇威方芳刘园园贾晓俊

生长激素对感染J亚群禽白血病病毒的鸡胚成纤维细胞系的影响: 2024年; 生长激素(growth hormone,GH)不仅能调节动物的代谢、生长、发育和生殖,也能调节动物的免疫系统。本研究旨在通过转录组测序及生物信息学技术分析GH影响J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis viruses,ALV-J)感染的鸡胚成纤维细胞系(chicken fibroblast cells,DF-1)中的关键基因和信号通路。将空载和GH的过表达质粒分别转染至DF-1,接着均接种ALV-J毒株SCAU-HN06,采用转录组测序技术检测相关的基因表达谱变化。结果显示,与对照组相比,实验组中有上调差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)122个(49%),下调DEGs 127个(51%)。通过GO功能富集分析发现,DEGs主要富集于新陈代谢过程、生物调节、细胞过程、细胞部分、催化活性和结合等过程。经KEGG富集分析发现DEGs主要在免疫系统、信号转导、信号分子和相互作用、细胞生长和死亡等通路上富集。进一步构建蛋白质-蛋白质相互作用(protein-protein interaction,PPI)网络,筛选出7个免疫相关基因进行实时定量PCR(RT-qPCR)验证,其中TRAF1、DSTYK、HESX1基因的表达趋势与转录组测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)的测序结果相一致。本研究通过生物信息学分析挖掘出可能参与调控ALV-J的关键基因和信号通路,以期为禽白血病病毒-宿主相互作用的关系提供新的见解,为禽白血病的净化提供新的思路。; 林玲莫国东吴强张细权; 关键词：转录组测序

一种病毒在鸡胚成纤维细胞中的适应方法: 本发明涉及一种病毒在鸡胚成纤维细胞中的适应方法，属于生物技术领域。本发明提供了一种病毒在鸡胚成纤维细胞中的适应方法，所述方法通过控制细胞维持液的血清含量为0.5~2%，细胞维持液的换液周期为2~6天，以及，鸡胚成纤维细胞...; 安祺田大勇阮俊程傅振芳

一种病毒在鸡胚成纤维细胞中的适应方法: 本发明涉及一种病毒在鸡胚成纤维细胞中的适应方法，属于生物技术领域。本发明提供了一种病毒在鸡胚成纤维细胞中的适应方法，所述方法通过控制细胞维持液的血清含量为0.5~2%，细胞维持液的换液周期为2~6天，以及，鸡胚成纤维细胞...; 安祺田大勇阮俊程傅振芳

基于CRISPR-Cas9技术构建TET2基因敲除的鸡胚成纤维细胞系被引量：2: 2023年; 为研究甲基胞嘧啶双加氧酶2(tet methylcytosine dioxygenase 2,TET2)及其介导的羟甲基化修饰在调控天然免疫反应中的作用,利用CRISPR-Cas9基因编辑技术构建TET2基因敲除的鸡胚成纤维细胞系。针对鸡TET2 mRNA的2种剪接变体的共有CDS序列设计4组sgRNA,构建sgRNA表达质粒,连同Cas9-T2A-GFP质粒共转染DF-1细胞,筛选高切割效率的sgRNA;将转染该sgRNA的DF-1细胞,进行流式细胞分选,获取表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的细胞,再通过有限稀释法筛选单克隆细胞,并用DNA测序进行鉴定。单克隆敲除细胞扩大培养后,Western blot和Dot blot检测TET2蛋白的表达水平和羟甲基化(5hmC)水平。DNA测序结果表明,TET2-gRNA-2靶位点附近分别发生2和28 bp的缺失突变,引起TET2蛋白移码突变,将该细胞株命名为DT-6。DT-6细胞传代15次以上,细胞形态稳定。Western blot结果显示,与DF-1细胞相比,DT-6细胞几乎不表达TET2蛋白。Dot blot结果显示,与DF-1细胞相比,DT-6细胞全基因组羟甲基化水平显著降低。利用CRISPR-Cas9技术成功构建了敲除TET2基因的鸡胚成纤维细胞系,为研究鸡TET2及其介导羟甲基化修饰参与调控天然免疫反应的途径和分子机制奠定基础。; 王强州潘诗雨方梦雅李微王佳兴刘茵茵陈世豪; 关键词：鸡胚成纤维细胞

板蓝根多糖对马立克病病毒在鸡胚成纤维细胞中复制的影响被引量：3: 2023年; 从板蓝根多糖(Isatidis Radix polysaccharides, IRPS)对马立克病病毒(Marek?s disease virus, MDV)的增殖抑制、感染阻断以及直接杀灭这3个给药途径探讨IRPS抗MDV作用。利用Real-time quantitative PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹(Western blot)以及间接免疫荧光(IFA)等试验观察IRPS对病毒复制的影响。结果显示,IRPS剂量依赖性抑制MDV的基因表达、蛋白合成以及降低病毒复制水平。同时,IRPS可以降低IL-6的表达,并促进IFN-β的表达。结果表明,IRPS可能通过降低炎症反应,并且促进干扰素表达而抑制MDV的复制。; 龚乐乐秦静霖林树乾贺秀媛庄国庆孙爱军; 关键词：马立克病病毒板蓝根多糖病毒复制疫病防控

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