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- 传染性喉气管炎病毒RAA检测方法的建立
- 2025年
- 为建立一种快速、高效、灵敏的传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)检测方法。提取ILTV的DNA作为模板,通过条件优化、敏感性和重复性分析,建立针对ILTV的重组酶介导的等温扩增(RAA)荧光检测方法,同时使用禽流感病毒(avian influenza virus, AIV)、传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus, IBV)、新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)的核酸进行检测,验证此方法的特异性;最后利用此方法对采集自河北省多家规模化养鸡场的59份临床样本进行检测,并与国家标准中的实时荧光定量(qPCR)和PCR方法进行对比分析。结果显示,本研究建立的RAA检测方法,其反应体系为缓冲液25.0μL、引物2.1μL、探针0.6μL、乙酸镁5.0μL、模板5.0μL,反应温度为39℃,扩增时间为20 min以内;该方法的灵敏度为10^(1) copies/μL,特异性检测100%;对59份临床样本检测结果显示,RAA荧光法与qPCR法均检出17份阳性,PCR法检出12份,RAA(荧光法)检出率与实时荧光定量与qPCR一致,高于PCR检测法。结果表明:RAA荧光法检测时间短,并有较好的特异性与灵敏度,可用于ILTV的快速检测。
- 冯婉莹王转转刘一宁陈光明郭霄慧李伟欣李卫晴张志强李佩国张召兴吴同垒贾青辉
- 关键词：传染性喉气管炎重组酶RAA
- 鸡传染性喉气管炎病毒分离鉴定及遗传进化分析
- 2025年
- 荆州某鸡场出现了疑似鸡传染性喉气管炎病毒(ILTV)感染,为确定该病病因,用PCR初步检测鸡传染性喉气管炎病毒为阳性;将阳性病料经处理后接种于SPF鸡胚绒毛尿囊膜,传至5代,收集出现痘斑和增厚的绒毛尿囊膜及尿囊液,对其进行PCR检测、病毒滴度测定及动物回归试验。确定分离到1株ILTV毒株,命名为JZCD202302株。参照GenBank公布的鸡传染性喉气管炎病毒WG株设计了gB、gC、gD、gE、gK、TK基因特异性引物,用MEGA6.0软件绘制了遗传进化树。gB-gC-gD-gE-gK-TK串联进化树分析结果显示,该毒株与澳大利亚疫苗相关野外重组流行毒株7b、ACC78、CL9和实验室疫苗重组株ILTV.157/19亲缘关系最近。
- 袁辉刘丹刘敏吴琼李凌丹宾晨李伟李国攀陈红心周启立熊涛
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒
- 表达传染性喉气管炎病毒gB蛋白重组耐热新城疫病毒的构建
- 2025年
- 为制备一种耐热且可同时为传染性喉气管炎和新城疫2种重要家禽呼吸道传染病提供保护的候选疫苗株,利用无缝克隆技术将传染性喉气管炎病毒gB基因克隆至具有耐热性的新城疫NDV/rAHR09毒株中,利用Western blot试验验证gB蛋白的表达情况,最后利用耐热性评价试验及致病性评估试验评价重组病毒的生物学特征。结果表明:gB基因成功插入到pNDV/rAHR09中,拯救后重组病毒具有较高的血凝效价;Western blot结果显示重组病毒能成功表达gB蛋白;热稳定性测试结果显示重组病毒在56℃下暴露60 min后仍具有较高血凝活性及病毒滴度;致病性评估数据显示,重组病毒的平均死亡时间为148 h,脑内致病性指数为0,静脉内致病性指数为0.1,表明其具备弱毒株的特征。综上,该研究研制的针对传染性喉气管炎和新城疫的耐热候选疫苗株NDV/rAHR09-ILTV/gB,可为开发针对传染性喉气管炎病毒的活载体疫苗提供新思路。
- 薄宗义胡海韩成昊蒋皓静孟晨晨张小荣吴艳涛曹永忠
- 关键词：传染性喉气管炎病毒GB基因新城疫病毒耐热重组病毒
- 表达鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白的重组马立克病毒载体疫苗株及其用途
- 本发明提供了一种表达鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白的重组马立克病毒载体疫苗株及其用途，属于兽用生物制品技术领域。重组马立克病毒载体疫苗株以TK启动子作为传染性喉气管炎病毒的gD蛋白的启动元件，以HSV TK polyA作为...
- 孙化露楚电峰侯玉超李扬于可超于晓璐阮国宏孙小云张启珺杜元钊
- 检测鸡传染性喉气管炎病毒的组合物及其应用
- 本发明检测鸡传染性喉气管炎病毒的组合物及其应用，属于微生物的测定或检验方法其所用的组合物技术领域。本发明公开了试剂或试剂盒在检测或辅助检测鸡传染性喉气管炎病毒中的应用，所述试剂或试剂盒包括鸡传染性喉气管炎病毒引物探针，所...
- 谢芝勋谢志勤张艳芳范晴谢丽基 万丽军罗思思李孟
- 1株鸡传染性喉气管炎病毒的分离鉴定及致病性评价
- 2024年
- 研究旨在为当前国内鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus,ILTV)的流行情况调查及相关疫苗研发提供参考。河南省濮阳市某养鸡场的蛋鸡疑似感染ILTV,将阳性病料处理后接种鸡胚绒毛尿囊膜,盲传3代后产物进行PCR鉴定和TK、gD基因序列测定分析,并通过动物回归试验初步研究分离株的致病性。结果显示,盲传3代后绒毛尿囊膜出现痘斑、增厚现象,产物PCR鉴定结果为阳性,将其命名为PY株。PY株TK、gD核苷酸序列与GenBank发表的ILTV序列相似性分别为99.4%~100.0%、99.1%~100.0%。49日龄SPF鸡于攻毒后第3 d出现鸡传染性喉气管炎的典型临床症状,剖检病死鸡可见喉头气管内充满血样黏液。攻毒后鸡发病率为100%、死亡率为30%。研究表明,分离株PY株是一株致病力较强的ILTV。
- 张亚胡小飞田辉段佳蕾田克恭张云静张海洋逄文强
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒TK基因GD基因
- 鸡传染性喉气管炎病毒微滴式数字PCR定量检测方法的建立被引量：1
- 2024年
- 旨在建立检测鸡传染性喉气管炎病毒(infectious laryngotracheitis virus, ILTV)绝对定量方法。根据已发表的鸡ILTV的TK基因序列,针对其保守区域分别设计1对特异引物和1条探针,建立检测鸡ILTV的微滴式数字PCR(droplet digital PCR,ddPCR)方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果显示,建立方法的最佳引物浓度为20μmol/μL,最佳探针浓度为10μmol/μL,最佳退火温度为56℃。特异性检测结果显示,建立的方法只检出ILTV,没有检出其他病原株。敏感性检测结果显示,采用建立的方法定量检出ILTV重组质粒标准品的最低限为4.6拷贝/μL。对3个连续稀释的pMD18-ILTV重组质粒DNA进行检测,3次重复检测结果的变异系数均小于5%。对83份病鸡喉拭子、肺及脾组织样品进行检测,采用建立的ddPCR检出ILTV阳性样品10份,荧光定量PCR检出ILTV阳性样品9份,ddPCR的阳性检出率(12.05%)高于荧光定量PCR的阳性检出率(10.84%)。结果表明,建立的ddPCR方法定量检测ILTV特异性强、敏感性高、重复性好,为绝对定量检测ILTV提供更好的技术支撑。
- 谢志勤谢芝勋张艳芳范晴谢丽基万丽军罗思思李孟张民秀曾婷婷黄娇玲王盛李丹韦悠李小凤任红玉阮志华
- 关键词：鸡传染性喉气管炎病毒
- MAPK信号通路在鸡传染性喉气管炎病毒感染中的作用与机制研究
- 崔露
- 鸡传染性喉气管炎病毒分离株gB与gD蛋白融合表达及免疫效果评价
- 袁辉
- 鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白单克隆抗体、其杂交瘤细胞株及应用
- 本发明公开了一种特异性识别鸡传染性喉气管炎病毒gD蛋白的单克隆抗体。本发明还公开了鸡传染性喉气管炎病毒抗体检测试剂盒，以及上述单克隆抗体在制备预防和/或治疗鸡传染性喉气管炎的药物中的应用。本发明抗鸡传染性喉气管炎病毒单克...
- 李泽君 张志飞 崔利兵 苑纯秀 刘芹防 滕巧泱 闫大为 许榜丰 潘学
